舟山市科技计划项目(2012C23023)
- 作品数：5 被引量：29H指数：4
- 相关作者：丁国芳黄芳芳杨最素景奕文胡晓斐更多>>
- 相关机构：浙江海洋学院浙江省舟山医院浙江国际海运职业技术学院更多>>
- 发文基金：舟山市科技计划项目浙江省科技厅重大专项基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学医药卫生化学工程更多>>
- LPS致肝细胞损伤模型的建立研究被引量：3
- 2014年
- [目的]探索LPS体外致人Chang Liver细胞损伤模型的建立方法和意义。[方法]分别用20、40、60、80、100μg/ml浓度的LPS作用Chang Liver细胞24 h,采用MTT法检测LPS对Chang Liver细胞存活率的影响,分别测定Chang Liver细胞上清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并通过Hoechst 33258荧光染色观察用药24 h后Chang Liver细胞形态的变化。[结果]80和100μg/ml浓度的LPS作用后Chang Liver细胞存活率显著性降低,胞外AST、ALT、ALP、γ-GT、LDH酶活性升高,细胞数目减少,细胞形态发生改变,呈现细胞核固缩等细胞凋亡现象。[结论]用80μg/ml的LPS与Chang Liver细胞共培养24 h,可以建立理想的体外肝细胞损伤模型。
- 滕芳芳胡晓斐刘晨晨杨最素黄芳芳丁国芳
- 关键词：LPSCHANGASTALT
- 茶味鱼鳔胶原蛋白果冻的研制被引量：8
- 2013年
- 以鱼鳔为原料,提取其中的胶原蛋白,琼脂为凝胶剂,乌龙茶为去腥剂和调味剂,研制一种新型茶味鱼鳔胶原蛋白保健果冻。对鱼鳔胶原蛋白与茶汁的比例、琼脂和乌龙茶质量浓度、柠檬酸添加量及白砂糖添加量等工艺条件进行了研究,并采用单因素和正交试验对茶味鱼鳔胶原蛋白果冻的配方进行了优化,得到最佳配方:2 g/100 mL茶汁,1 g/100 mL的琼脂,鱼鳔胶原蛋白和茶汁的比例为1:3.5,每100 mL原液中添加50 mL 1 g/100 mL琼脂,0.07 g柠檬酸,8 g白砂糖。
- 曾丽李丽王加斌杨最素丁国芳
- 关键词：茶汁果冻
- 鳕鱼皮胶原蛋白肽制备及其对肝细胞损伤的保护作用被引量：4
- 2017年
- 目的:研究鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺及不同浓度的鳕鱼皮胶原蛋白多肽对经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞的修复作用。方法:以料液比、加酶量、酶解时间和酶解温度为因素,MTT试验所得细胞OD值为指标,通过正交试验探讨鳕鱼皮胶原蛋白肽的最佳酶解工艺,并经超滤、阴离子交换、分子层析对其纯化。通过试剂盒法检测该纯化肽作用Chang Liver细胞后,细胞内抗氧化酶和细胞上清液中转氨酶变化情况;采用Hoechst 33258染色法和Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术观察鳕鱼皮胶原蛋白肽作用损伤Chang Liver细胞后的细胞凋亡情况。结果:最优酶解条件:以胰蛋白酶为水解酶,酶解温度50℃,p H 6,加酶量2 000 U/g,酶解时间8 h,经纯化得到蛋白肽GM2-2-3;GM2-2-3作用经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞后,细胞氧化损伤明显减轻,细胞内SOD、CAT、GSH-PX活性上升,MDA的含量下降,并呈剂量依赖性;细胞上清液中AST、ALT、ALP、γ-GT、LDH活性有所下降,且呈剂量依赖性;与损伤组细胞相比,Chang Liver细胞形态较舒展,细胞染色质出现明显的聚集及边集化,细胞核皱缩现象减少,早期凋亡率降低,早期凋亡细胞变少。
- 滕芳芳胡晓斐刘晨晨杨最素黄芳芳丁国芳
- 关键词：鳕鱼皮胶原蛋白肽
- 乌贼墨多肽诱导人前列腺癌DU-145细胞凋亡的机制研究被引量：8
- 2014年
- 本文探讨了乌贼墨多肽(SHP)诱导DU-145细胞凋亡机制。采用CCK-8法检测SHP对DU-145细胞增殖的影响;采用HE染色和AO/EB荧光染色观察DU-145细胞的形态学的变化;采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率;并通过Western Blotting检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF的蛋白表达变化。结果表明,SHP对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用且呈现剂量和时间依赖性;SHP作用后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征;流式细胞术结果显示,随着SHP浓度和作用时间的增加,DU-145细胞的早期凋亡率从12.25%增加到34.20%;Western Blotting结果显示,当SHP作用24 h后,VEGF、Bcl-2蛋白表达量降低,p53、Bax、Caspase-3蛋白表达量增加。综上可知,SHP能够诱导DU-145细胞凋亡,其机制有可能是通过激活抑癌基因p53,下调Bcl-2/Bax比例;下调VEGF,激活凋亡蛋白酶Caspase-3,诱发凋亡级联反应来实现的。
- 景奕文杨最素黄芳芳郁迪丁国芳
- 关键词：多肽凋亡
- 乌贼墨多肽体外抗氧化活性研究被引量：7
- 2013年
- [目的]研究乌贼墨多肽体外抗氧化活性。[方法]采用分光光度法测定多肽对2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑林-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羟自由基(·OH)的清除能力和还原能力,利用琼脂糖凝胶电泳检测多肽对羟自由基诱导的DNA损伤的保护作用。[结果]乌贼墨多肽具有明显清除ABTS自由基(半数有效浓度EC50为3.45 mg/ml)、·DPPH自由基(EC50为4.34 mg/ml)和羟自由基(EC50为3.30 mg/ml)的能力;当乌贼墨多肽的浓度达到5.00 mg/ml时,还原力达到0.387。[结论]乌贼墨多肽具有较好的抗氧化活性。
- 景奕文杨最素丁国芳黄芳芳
- 关键词：多肽抗氧化
