国家自然科学基金(30670997)
- 作品数：13 被引量：35H指数：3
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- 白血病患者异基因造血干细胞移植术后股骨头坏死的影响因素被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨白血病患者异基因造血干细胞移植（Allo-HSCT）术后发生股骨头坏死（ONFH）的影响因素及可能机制.方法 追踪随访2003年1月至2007年10月接受Allo-HSCT的102例白血病患者,在术后2年内移植物抗宿主病（GvHD）和ONFH的发生情况,并统计患者从初诊到术后2年内甲泼尼龙（MP）的用量.对既发生了急性GvHD（aGvHD）又发生了慢性GvHD（cGvHD）的患者,在MP用量不同阶段定期采用酶联免疫吸附法检测其外周血中破骨细胞分化指标可溶性核转录因子-κB受体活化因子的配体（sRANKL）的水平以及破骨细胞代谢指标抗酒石酸酸性磷酸酶-5b（TRAP-5b）与Ⅰ型胶原蛋白羧基末端交联肽（CTP-Ⅰ）的水平,并分析Allo-HSCT术后ONFH发生的可能影响因素.结果 Allo-HSCT术后2年内,共有7例白血病患者发生了ONFH,发生率为6.9%（7/102）,ONFH发生与患者年龄、性别、白血病类型和供者类型无关;ONFH均发生在既有aGvHD又有cGvHD的患者中,ONFH发生率可达21.9%（7/32）,明显高于无GvHD、单纯aGvHD和单纯cGvHD患者（P〈0.05）;在既有aGvHD又有cGvHD的患者中,ONFH阳性患者MP用量（232.7±28.6）mg/kg,明显高于ONFH阴性患者的（115.1 ±16.9）mg/kg（P〈0.05）.ONFH发生时,患者血浆中sRANKL、TRAP-5b和CTP-Ⅰ的水平明显高于预处理前和术后28 d（P〈0.05）,且以上指标与MP用量均存在相关性（相关系数分别为0.597、0.664和0.682,P值均〈0.05）.结论 白血病患者Allo-HSCT术后,ONFH的发生与抗GvHD治疗过程中MP用量有关,MP可通过引起患者体内破骨细胞分化及代谢水平增加,导致ONFH的发生.
- 许多荣许辉茹李娟李庆山邹外一黄珊杨茂华
- 关键词：造血干细胞移植股骨头坏死甲泼尼龙破骨细胞
- 血浆单核细胞趋化蛋白-2水平不能作为Allo-HSCT术后早期急性移植物抗宿主疾病与感染的鉴别指标
- 2011年
- 目的研究检测血浆单核细胞趋化蛋白-2(monocyte chemoattractant protein-2,MCP-2)水平作为区分白血病患者行异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,Allo-HSCT)后出现中性粒细胞缺乏合并感染(感染)或急性移植物抗宿主疾病(aGVHD)的鉴别指标的可行性。方法采用酶联免疫吸附试验检测35例Allo-HSCT患者(Allo-HSCT组)、14例自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic stem cell transplantation,Auto-HSCT)患者(Auto-HSCT组)和10名健康人(正常对照组)血浆中MCP-2的水平。比较Allo-HSCT与Auto-HSCT术后感染或aGVHD患者的血浆MCP-2水平变化。结果 14例Auto-HSCT患者和12例Allo-HSCT患者移植后早期发生中性粒细胞缺乏合并感染,其血浆MCP-2水平均明显高于感染前、感染控制后以及正常对照组的血浆MCP-2水平(均为P<0.05),但后3者比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。Allo-HSCT组确诊aGVHD时的血浆MCP-2水平均明显高于发生aGVHD前、经抗aGVHD治疗有效后1d以及正常对照组的血浆MCP-2水平(均为P<0.05),但后3者比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。与正常对照组比较,Auto-HSCT组、Allo-HSCT组患者确诊感染时及Allo-HSCT组患者确诊aGVHD时的血浆MCP-2水平均明显升高(均为P<0.05),但后3者比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 Allo-HSCT术后早期发生aGVHD或中性粒细胞缺乏合并感染时血浆MCP-2水平均明显升高,但比较差异无统计学意义,初步认为MCP-2血浆水平不能作为鉴别Allo-HSCT术后早期aGVHD或感染的指标。
- 许多荣邹外一许辉茹杨茂华
- 关键词：造血干细胞移植
- 前列腺素E_2体外可促进人CD34^+细胞增殖被引量：3
- 2013年
- 【目的】探讨前列腺素E2(PGE2)体外对人CD34+细胞增殖的影响及其可能机制。【方法】用mini-MACS免疫磁珠分选系统分选人CD34+细胞,并应用流式细胞术鉴定其纯度;将5×103/孔的CD34+细胞用不同浓度的dmPGE2及阴性对照无水乙醇干预后,用集落形成实验检测红系爆式集落形成单位(BFU-E)和粒-单核系集落形成单位(CFU-GM)形成情况;将1×106/mL的CD34+细胞用不同浓度的dmPGE2及无水乙醇干预后,分别用流式细胞术检测细胞周期分布、real time-PCR检测survivin-mRNA水平、Western blot检测胞浆内β-catenin和survivin蛋白表达情况。【结果】人CD34+细胞阳性分选后经流式细胞术鉴定其纯度达95%以上,符合实验要求;1μmol/L dmPGE2干预后,人CD34+细胞形成的BFU-E及CFU-GM数目较其他组明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05);1μmol/L dmPGE2干预后,人CD34+细胞进入细胞周期S/G2M期的比例平均是对照组的3.7倍,差异具有统计学意义(P<0.001);1μmol/L dmPGE2干预组人CD34+细胞内survivin-mRNA和survivin蛋白以及β-catenin蛋白表达较其他组明显增多。【结论】PGE2在体外可促进人CD34+细胞增殖,其机制可能与PGE2促进CD34+细胞内survivin、β-catenin表达从而促使部分CD34+细胞由静止期进入分裂期有关。
- 赖淑萍戚永磊许多荣
- 关键词：异基因造血干细胞移植PGE2造血干细胞增殖
- TNFR1/RANK嵌合体的构建及其在研究破骨细胞分化中的意义被引量：3
- 2007年
- 【目的】构建肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)膜外部分和核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)跨膜及膜内部分相结合的嵌合体,探讨其在破骨细胞(OC)分化中的意义。【方法】克隆TNFR1/RANK嵌合体的cDNA,用plat E将其包装成逆转录病毒,通过感染将这种逆转录病毒转染到敲除TNFR1/R2基因的小鼠(TNFR1-/R2-)骨髓巨噬细胞(BMM)中;用TNFα刺激,分别观察OC的分化及骨的重吸收能力;用Western Blot方法证实TNFR1/RANK是通过NF-κB、JNK、P38和ERK蛋白的磷酸化来调节OC的分化和功能。【结果】在TNFα刺激下,BMM能分化成OC,而且分化出的OC能明显地导致骨质破坏。TNFα刺激BMM 5min后磷酸化的NF-κB、JNK、P38和ERK蛋白的表达明显增强。【结论】TNFR1/RANK嵌合体具有完整的分子结构和生物功能,可作为研究RANK结构、功能及其信号途径的一个简便、有效的生物工具。
- 许多荣罗绍凯童秀珍李娟
- 关键词：嵌合体破骨细胞分化克隆
- VX-680体外诱导异基因干细胞移植后复发AML细胞凋亡的初步研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨Aurora激酶抑制剂VX-680在体外对异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后复发的急性髓系白血病(AML)患者细胞增殖和凋亡的影响。方法:以正常人CD34+细胞为对照,体外用5nmol/L浓度VX-680分别处理3例Allo-HSCT后复发的AML患者白血病细胞,48h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察细胞增殖活力,Hoechest33342方法观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡百分率,蛋白质印迹法检测Aurora-A磷酸化蛋白及Caspase-3凋亡蛋白的表达。结果:MTT法观察发现,体外VX-680均能抑制3例复发患者白血病细胞的增殖,增殖抑制率分别为(77.5±3.1)%、(76.8±4.7)%和(81.1±4.2)%,均明显高于正常对照的(11.2±1.6)%,P值均<0.001;Hoe-chest33342方法观察发现,3例患者白血病细胞在VX-680作用下出现了明显的细胞凋亡形态,流式细胞术检测到凋亡百分率分别为(88.8±4.6)%、(98.7±0.9)%和(99.3±0.4)%,也均高于正常对照的(13.6±3.5)%,P值均<0.001;蛋白质印迹法检测显示,VX-680处理后3例患者白血病细胞中Aurora-A磷酸化蛋白表达显著下降,而Caspase-3凋亡蛋白表达明显升高。结论:VX-680体外可通过诱导Allo-HSCT后AML复发患者的白血病细胞凋亡来抑制其增殖。
- 许多荣赖淑萍邹外一黄珊李娟
- 关键词：复发细胞凋亡
- 初治急性早幼粒细胞白血病缓解后三氧化二砷和常规化疗巩固治疗疗效分析被引量：12
- 2011年
- 【目的】探讨初治急性早幼粒细胞白血病(APL)缓解后三氧化二砷(ATO)和常规化疗交替巩固治疗的长期疗效和安全性。【方法】自2003年5月至2009年12月,初治APL患者完全缓解(CR)后采用ATO和常规化疗交替巩固治疗方案:ATO10mg/d每周5d×4周或连续20d为1疗程,化疗为常规剂量蒽环类药物-阿糖胞苷"3+7"方案。【结果】54例初治APL患者CR后采用ATO和常规化疗交替巩固治疗方案,男29例,女25例,中位年龄31岁,ATO和化疗巩固中位疗程数各4(2～8)个,ATO总剂量中位数15.1(5.9～34.8)mg/kg。ATO巩固治疗结束阶段常出现3/4级中性粒细胞减少,但不增加细菌感染率,其它毒副作用轻微、可逆。巩固治疗期间无治疗相关死亡,所有患者在巩固治疗期间获分子生物学完全缓解。中位随访39(12～91)个月,复发2例,其CR期分别为25和46个月;3年、5年无白血病生存率(LFS)和累积复发风险分别为(97.7±2.3)%、(93.4±4.7)%和(2.4±2.3)%、(6.8±4.7)%,其中CR>5年17例(占31%)、>3年29例(占54%),无ATO慢性蓄积中毒和继发第二恶性肿瘤的发生。COX回归模型单因素分析表明患者年龄、性别、病初WBC、Hb、PLT、LDH值、外周血和骨髓异常早幼粒细胞比例以及诱导治疗方案中维甲酸是否联合ATO与LFS均无显著相关(P>0.05)。【结论】初治APL缓解后采用ATO联合常规化疗安全有效,可获得更高的长期无病生存率。
- 王荷花许多荣张婧李娟童秀珍彭爱华张国材罗绍凯
- 关键词：急性早幼粒细胞白血病三氧化二砷化疗缓解后治疗
- 调节破骨细胞分化的RANK特异性cDNA片段的研究被引量：3
- 2009年
- 【目的】在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段,为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】先将RANK膜内部分的1.2kb大小的cDNA分成20个片段,用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤坏死因子受体1和RANK跨膜和膜内部分组成的TNFR1/RANK嵌合体的突变体,每一个突变体在RANK膜内部分含60bp缺失。再将RANK-cDNA第1561～1680bp之间的120bp片段分为10个片段,构建10个新的TNFR1/RANK突变体,每一个突变体在其RANK膜内部分含12bp缺失。用包装细胞PlatE分别将各突变体包装成逆转录病毒,通过感染分别将这些逆转录病毒转染到肿瘤坏死因子受体1和2基因敲除小鼠的骨髓巨噬细胞(BMM)中。用TNFɑ刺激后、观察哪一个突变体不能诱导OC形成。【结果】首先发现表达TNFR1/RANK1561-1620或TNFR1/RANK1621-1680的逆转录病毒感染的BMM不能分化成OC,然后在RANK-cDNA第1561～1680bp这个大的片段中又发现表达TNFR1/RANK1597-1608、TNFR1/RANK1609-1620、TNFR1/RANK1621-1632或TNFR1/RANK1633-1644的逆转录病毒感染的BMM也不能分化成OC。【结论】RANK-cDNA第1597～1644bp之间的48bp片段(5′-gggcaggtgatgaacttcaagggtgacatcatcgtggtgtatgtcagc-3′)对OC形成起决定性作用。
- 许多荣罗绍凯苏畅方荸荠黄珊李娟
- 关键词：嵌合体破骨细胞分化
- 血清中巨噬细胞炎症蛋白水平在判断多发性骨髓瘤骨病中的临床意义被引量：2
- 2012年
- 【目的】探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血清中巨噬细胞炎症蛋白(MIP)水平与多发性骨髓瘤骨病(MBD)之间的关系。【方法】采用酶联免疫吸附法检测了42例初诊MM病人(观察组)以及25例健康体检者(对照组)外周血清中MIP-1α及MIP-1β的水平、其下游信号传导因子可溶性核转录因子-κB受体活化因子的配体(sRANKL)和骨保护素(OPG)水平、以及破骨细胞代谢指标抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRAP-5b)与Ⅰ型胶原蛋白羧基末端交联肽(CTP-Ⅰ)的水平,同时根据全身X光摄片判断MM患者骨损害情况,分析MIP-1α及MIP-1β与sRANKL/OPG比值、TRAP-5b和CTP-Ⅰ及MBD之间的相关性。【结果】观察组患者血清中MIP-1α及MIP-1β中位水平为125.18 ng/mL和134.35ng/mL,均明显高于对照组(P<0.05);将观察组患者按X光结果分为有MBD组(29例)和无MBD组(13例)发现:MBD组的MIP-1α及MIP-1β水平高于无MBD组(P<0.05),且MIP-1α及MIP-1β水平与骨病分级之间均存在相关性(γ分别为0.381和0.429,P<0.05);进一步分析发现:MIP-1α及MIP-1β与sRANKL/OPG比值(γ分别为0.641和0.451,P<0.05)、TRAP-5b(γ分别为0.547和0.529,P<0.05)和CTP-Ⅰ(γ值分别为0.476和0.512,P<0.05)水平之间均存在相关性。【结论】MM患者血清中MIP-1α及MIP-1β水平不仅升高,还与MBD分级有关,它可通过调节sRANKL/OPG比值和增加破骨细胞代谢来引起MBD,所以MIP-1α及MIP-1β水平可作为判断MBD的一个较好的参考指标。
- 苏畅许多荣邹外一许辉茹黄珊李娟罗绍凯
- 关键词：巨噬细胞炎症蛋白多发性骨髓瘤骨病骨保护素破骨细胞
- 不同浓度地塞米松体外对人成骨细胞和破骨细胞分化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨地塞米松(DEX)体外对人成骨细胞(OBs)和破骨细胞(OCs)分化的影响。方法:以DEX为主要成分的诱导剂体外刺激正常人骨髓间充质干细胞(MSCs),茜素红染色及碱性磷酸酶(ALP)定量法检测OBs间钙结节形成及OBs中ALP水平;改变DEX浓度后,再检测ALP水平以及用Western blotting检测OBs中磷酸化GSK-3β蛋白的表达;外源性核因子κB受体活化因子配基(RANKL)刺激人骨髓单个核细胞(BMMs)14 d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色鉴定OCs形成情况、Western blotting检测BMMs中RANKL下游的信号途径;不同浓度DEX刺激MSCs 7 d后,用ELISA和Western blotting检测培养液中可溶性RANKL(sRANKL)水平及MSCs中RANKL蛋白表达。结果:含0.1μmol/L DEX的诱导剂刺激MSCs后可有钙结节形成,在DEX 0.001-0.1μmol/L浓度范围内,OBs中ALP水平逐渐增高、磷酸化GSK-3β蛋白表达逐渐增强,当DEX浓度进一步增加后(0.1-10μmol/L),ALP水平和磷酸化GSK-3β蛋白表达反而下降;外源性RANKL可以诱导BMMs分化为OCs,且BMMs中磷酸化IκBα、SPAK/JNK、p38 MAPK、p44/42 MAPK表达增强;在0.001-10μmol/L浓度范围内,DEX刺激MSCs后,培养液中sRANKL水平和MSCs中RANKL蛋白表达逐渐增高,且sRANKL水平和DEX浓度呈正相关(r=0.821,P<0.05)。结论:在低浓度(0.001-0.1μmol/L)范围内,DEX既促进OBs分化,又可促进OCs分化。在高浓度(0.1-10μmol/L)范围内,仍能促进OCs分化,但失去了其对OBs的分化作用。
- 许多荣许辉茹王荷花李娟吴洪福邓宇斌
- 关键词：地塞米松成骨细胞破骨细胞
- 血清sRANKL/OPG比值在判断多发性骨髓瘤骨病中的意义被引量：5
- 2010年
- 本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血清中可溶性核转录因子-κB受体活化因子的配体(sRANKL)和护骨蛋白(OPG)的水平与多发性骨髓瘤骨病(MBD)之间的关系。采用酶联免疫吸附法检测了42例初诊的MM病人(观察组)以及25例健康体检者(对照组)外周血清中sRANKL和OPG的水平以及破骨细胞代谢指标抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRAP-5b)与Ⅰ型胶原蛋白羧基末端交联肽(CTP-Ⅰ)的水平,同时根据全身X光摄片判断MM患者骨损害情况并分析sRANKL/OPG比值与TRAP-5b、CTP-Ⅰ水平和骨损害发生及其程度之间的关系。结果发现:观察组患者血清中sRANKL水平升高(中位水平9.33μg/L),OPG水平下降(中位水平4.93μg/L),sRANKL/OPG比值明显升高(比值2.65),与对照组相比各对应指标之间的差异均具有显著性(p<0.05);MM患者血清中sRANKL/OPG比值与TRAP-5b(r=0.512,p<0.05)和CTP-Ⅰ(r=0.481,p<0.05)水平之间均存在相关性。将观察组患者按有无骨损害分组发现,骨损害组(29例)和无骨损害组(13例)的sRANKL/OPG比值分别为5.13和1.12,有骨损害组的比值明显升高(p<0.05);如果按骨损害程度分组还发现,sRANKL/OPG比值与骨损害程度密切相关(r=0.445,p<0.05),但不同临床分型和不同临床分期(ISS分期)的MM患者之间,血清sRANKL/OPG比值的差异均无统计学意义(p>0.05)。结论:MM患者血清中sRANKL/OPG比值明显升高,不仅与破骨细胞代谢增强有关,还与骨损害的发生及其程度相关,所以sRANKL/OPG比值可作为判断MBD的一个参考指标。
- 许多荣苏畅邹外一许辉茹黄珊李娟罗绍凯
- 关键词：多发性骨髓瘤骨病破骨细胞
