国家高技术研究发展计划(2001AA213071)
- 作品数：24 被引量：94H指数：6
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- 相关机构：军事医学科学院吉林大学解放军军需大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 牛对表达口蹄疫病毒复合多表位基因的重组鸡痘病毒以及DNA疫苗联合免疫的免疫应答被引量：3
- 2006年
- 将构建的共表达口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)复合多表位基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT,分别以vUTA2-OAT/vVTA2-OAT(首免/加强免疫)、pVRI-OAT/vUTA2-OAT(首免/加强免疫)和vUTA2-OAT/pVRI-OAT(首免/加强免疫)等3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明,这3种方式均能诱导牛产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答,其中pVRI-OAT/vUTA2-OAT联合免疫方式的免疫效果最佳,诱导的中和抗体达1∶64,已接近于常规灭活疫苗免疫方式,而且其可以诱导比灭活疫苗免疫方式高得多的细胞免疫水平(P<0.01)。上述试验结果为进一步进行免疫攻毒试验,并最终筛选出最佳疫苗和免疫程序奠定了基础。
- 郑敏金宁一田明尧李昌秦晓冰刘棋贾雷立张林
- 关键词：DNA疫苗
- 共表达口蹄疫病毒衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因重组鸡痘病毒的构建及其免疫原性
- 将FMDV衣壳蛋白P1-2A和蛋白酶3C基因单一/共同插入到鸡痘病毒载体pUTA-2和pUTA-16LacZ中,构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTA2P1和pUTAL3CP1,分别与鸡痘病毒282E4株FPV共转染鸡胚成...
- 金宁一张洪勇尹革芬郑敏刘彤江文正李子健
- 关键词：FMDV重组鸡痘病毒免疫原性
- 文献传递
- 共表达O型口蹄疫病毒P1-2A基因和猪白细胞介素18的重组鸡痘病毒的构建被引量：4
- 2006年
- 目的:为获得能有效预防O型口蹄疫病毒的重组鸡痘病毒活载体疫苗奠定基础。方法:在O型口蹄疫病毒P1-2A基因上游引入Kozak序列,下游通过Linker与细胞因子IL-18联接,获得P1-2A基因与猪IL-18基因融合表达基因盒P1-2A-IL-18,将该表达基因盒克隆至鸡痘病毒中间转移载体pUTAL-3C中,构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-3C-P1-2A-IL-18。通过脂质体转染法,将pUTAL-3C-P1-2A-IL-18与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过BrdU三次加压筛选,挑选出单克隆重组病毒株。结果:经RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定,证明所筛选的1株重组鸡痘病毒在CEF中能正确表达P1-2A-IL-18基因盒。结论:成功获得了一株共表达O型口蹄疫病毒P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘毒疫苗候选株rFPV-3C-P1-2A-IL-18。
- 刘慧娟金宁一马鸣潇金明兰张林李旭计越鲁会军金扩世
- 关键词：口蹄疫病毒IL-18基因
- 口蹄疫植物疫苗的研究进展被引量：4
- 2004年
- 植物疫苗是利用植物表达重组抗原蛋白来生产疫苗。在植物中表达的抗原能够保持其自身的免疫原性。论文简要阐述了近10年来用植物表达系统生产口蹄疫疫苗的研究进展、优缺点及其应用前景。
- 余云舟金宁一王罡
- 关键词：植物口蹄疫疫苗
- 二价重组鸡痘病毒口蹄疫疫苗的豚鼠免疫试验
- 2009年
- 目的检测携带口蹄疫病毒(FMDV)Asia-1型P1-2A-IL18基因和O型P1-2A-3C基因的重组鸡痘病毒疫苗诱导豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将重组鸡痘病毒vUTAL-P1-2A-IL18-P1-2A-3C、w-FPV和PBS分别经肌肉注射免疫豚鼠,检测豚鼠脾T淋巴细胞亚群数量、特异性CTL细胞杀伤活性和血清中抗FMDV特异性抗体水平。结果重组鸡痘病毒免疫豚鼠脾细胞中T淋巴细胞亚群数量和特异性CTL细胞杀伤活性均显著高于w-FPV和PBS对照组,且能产生抗O型和Asia-I型FMDV特异性抗体。结论二价重组鸡痘病毒口蹄疫疫苗能诱导豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫。
- 谷长维金宁一李太元李昌田明尧马鸣潇霍晓伟常巧呈于长勇
- 关键词：口蹄疫病毒重组鸡痘病毒免疫应答
- 重组口蹄疫鸡痘病毒vUTAL3CP1的构建及其遗传稳定性和免疫原性被引量：9
- 2008年
- 目的构建重组口蹄疫鸡痘病毒,并检测其遗传稳定性和免疫原性。方法将口蹄疫病毒(FMDV)的衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中,构建重组鸡痘病毒转移载体pUTAL3CP1,并与鸡痘病毒(FPV)282E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过BrdU加压筛选获得重组鸡痘病毒vUTAL3CP1。重组病毒在CEF中连续传30代,分别进行毒力和基因检测,并免疫BALB/c小鼠,检测特异性抗体和中和抗体。结果重组鸡痘病毒经RT-PCR可扩增出目的基因;特异性荧光抗体反应呈阳性;在CEF中连续传30代,毒力稳定,基因未发生缺失和变异;免疫小鼠能产生较高水平的FMDV特异性抗体和中和抗体。结论已成功构建重组口蹄疫鸡痘病毒,且具有良好的遗传稳定性和免疫原性。
- 金明兰金宁一鲁会军马鸣潇郑敏金扩世霍晓伟计越
- 关键词：口蹄疫重组鸡痘病毒免疫原性
- 共表达O型口蹄疫病毒3C、P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒免疫原性研究被引量：1
- 2007年
- 目的:对筛选到的一株共表达O型口蹄疫病毒3C基因、P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18进行免疫原性研究。方法:分别用重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18、rFPV-P1-2A-3C和对照组282E4株FPV、PBS对小鼠进行免疫接种,并检测各免疫组的T淋巴细胞亚类数量、CTL杀伤活性及抗体效价。结果:重组鸡痘病毒疫苗组免疫小鼠T淋巴细胞亚类数量,CTL杀伤活性和抗体效价均显著高于对照组,且重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18的小鼠T淋巴细胞亚类数量和CTL特异性杀伤活性与rFPV-P1-2A-3C相比,差异显著。结论:为开发新型FMDV疫苗奠定了实验免疫基础。
- 刘慧娟金宁一马鸣潇金明兰沈国顺霍晓伟鲁会军金扩世李旭计越
- 关键词：口蹄疫病毒重组鸡痘病毒免疫原性
- 口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗分子设计及其构建被引量：9
- 2007年
- 针对我国口蹄疫（FMD）流行情况,利用计算机软件模拟分析,构建了口蹄疫病毒（FMDV）复合多表位基因工程疫苗表达盒OAAT。该表达盒以O型、A型FMDV结构蛋白VP1全基因和AsiaⅠ型FMDV2个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因（其中2个抗原表位来源于FMDVIND63/7株,该毒株与我国新疆分离株属于同一基因拓扑型,其余3个抗原表位来源于FMDVYNBS/58株）作为主要免疫原基因,以非结构蛋白上的2个Th2细胞表位基因及结构蛋白上的1个Th2细胞表位基因作为辅助基因。将构建好的表达盒OAAT和猪IL-18基因分别插入到鸡痘病毒（FPV）表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子（ATI-P7.5×20）和单一启动子（P7.5）下游,构建了携带OAAT表达盒和猪IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-OAAT-IL18。应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞（CEF）,经BrdU进行3次加压蚀斑筛选后,以不同代次的细胞mRNA为模板,利用FMDVVP1基因和猪IL-18基因特异引物进行RT-PCR和IFA检测,筛选出OAAT和猪IL-18基因共表达的重组鸡痘病毒rF-PV-OAAT-IL18,该重组鸡痘病毒的构建为新型FMDV活载体疫苗的研究奠定了基础。
- 马鸣潇金宁一刘慧娟沈国顺郑敏金明兰鲁会军霍晓伟马海利
- 关键词：鸡痘病毒
- 牛对表达口蹄疫病毒复合多表位基因的重组鸡痘病毒以及DNA疫苗联合免疫的免疫应答研究
- 将本课题组构建的共表达FMDV复合多表位基因以及猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT,分别以vUTA2-OAT/vUTFA2-OAT、pVRI-OAT/vUTA2-...
- 郑敏金宁一田明尧李昌秦晓冰刘棋贾雷立张林
- 关键词：口蹄疫重组鸡痘病毒DNA疫苗体液免疫
- 文献传递
- vUTAL3CP1重组载体疫苗与pVIRIL18P1 DNA疫苗在猪体内的免疫原性研究被引量：3
- 2006年
- 目的评价本课题组构建的共表达FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因以及免疫辅助基因的重组鸡痘病毒vUTAL3CP1和重组DNA疫苗pVIRIL18P1在猪体内诱导特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将上述2种疫苗采用4种不同的组合方式单独或联合给猪进行肌肉注射,用ELISA方法和中和实验检测猪产生的抗体水平,T淋巴细胞增殖反应、CTL反应以及T淋巴细胞亚类。结果这2种基因工程疫苗均能诱导猪产生特异性的体液及细胞免疫应答。其中单独免疫组vUTAL3CP1/vUTAL3CP1的效果最好,其诱导的抗体水平已接近于常规灭活疫苗,而细胞免疫水平则比后者高得多。联合免疫组中vUTAL3CP1/pVIRIL18P1可以诱导比vUTAL3CP1/vUTAL3CP1更高的CTL杀伤活性,但体液免疫水平略低。结论证实了这2种基因工程疫苗在猪体内均有良好的免疫原性。同时初步筛选出vUTAL3CP1/vUTAL3CP1和pVIRIL18P1/vUTAL3CP1组等较佳的免疫策略,为下一步的攻毒保护试验奠定了基础。
- 金宁一郑敏秦晓冰金扩世刘棋马鸣潇田明尧李昌万遂如
- 关键词：口蹄疫病毒重组鸡痘病毒DNA疫苗免疫原性
