重庆市科技攻关计划(2006AB1009)
- 作品数:1 被引量:42H指数:1
- 相关作者:陈善春彭爱红吴鑫何永睿雷天刚更多>>
- 相关机构:西南大学国家柑桔品种改良中心更多>>
- 发文基金:重庆市科技攻关计划科技部科研院所社会公益研究专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系的建立与优化被引量:42
- 2008年
- 通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、PCR反应体积、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量、引物量)、电泳检测方法的系统优化,建立了柑桔SRAP-PCR和ISSR-PCR体系;以此进行大规模引物筛选,从而建立了柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系。SRAP-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.2mmol/L,dNTP120μmol/L,Taq酶1.5U,引物0.4μmol/L,反应程序为94℃预变性5min,35个循环(94℃30s,47℃1min,72℃1min),72℃延伸10min;ISSR-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.6mmol/L,dNTP200μmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L。筛选出稳定性好、多态性高的24对SRAP引物和13条ISSR引物。
- 吴鑫雷天刚何永睿刘小丰许兰珍彭爱红陈善春
- 关键词:柑桔SRAPISSR