广东省自然科学基金(05004719)
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 相关作者：董为人陈英华肖应庆仇欣霞赵冰雷更多>>
- 相关机构：南方医科大学佛山科学技术学院顺德桂洲医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胶原膜包裹及环孢素A对鸡羽根角蛋白移植物组织相容性的改善作用
- 2008年
- 背景:前期实验提出将鸡羽根角蛋白管作为神经桥接材料这一设想,发现机体组织对鸡羽根角蛋白有一定的免疫排斥作用,埋植材料周围组织中有大量炎性细胞出现。目的:观察经胶原膜包裹或应用免疫抑制剂后,鸡羽根角蛋白材料在体埋植对周围组织的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-10/2007-01在南方医科大学组织学与胚胎学实验室完成。材料:选择SD大鼠42只,按随机数字表法分成5组,空白对照组6只,其余各组各9只。方法:参照胶原蛋白提取方法,由牛跟腱提取胶原蛋白。将经特殊处理的鸡羽根角蛋白埋植入大鼠竖脊肌组织中,鸡羽根角蛋白材料+环孢素A组大鼠材料埋植后2周腹腔注射环孢素A5mg/(kg·d);鸡羽根角蛋白材料浸泡环孢素A组将材料浸泡于2.5g/L环孢素A后埋植;胶原膜包裹鸡羽根角蛋白材料组应用胶原膜包裹材料后埋植;单纯鸡羽根角蛋白材料组仅埋植材料;空白对照组仅作切口,不埋植材料。主要观察指标:分别于材料埋植后2,4,8周取材,光镜下观察埋植材料的降解情况及对周围组织的影响,应用免疫组织化学方法检测周围组织巨噬细胞的浸润情况。结果:①材料埋植后各组大鼠一般状况良好,创口未见肿胀及渗液。②材料埋植后2,4,8周,材料埋植周围组织可见大量巨噬细胞,尤其是多核巨细胞分布于材料边缘,吞噬材料;炎性细胞数量较少,以鸡羽根角蛋白材料+环孢素A组为著。③材料埋植后2,4,8周各组材料埋植周围组织均可见CD68阳性表达细胞,其中4周时巨噬细胞阳性数比其他两个时点多(P<0.05)。结论:短期应用免疫抑制剂可显著改善鸡羽根角蛋白的在体组织相容性;鸡羽根角蛋白在体内可降解,巨噬细胞尤其是多核巨细胞参与了该过程。
- 仇欣霞赵冰雷陈英华郭家松肖应庆董为人
- 关键词：环孢菌素胶原
- 鸡羽根管作为组织工程支架材料的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的了解鸡羽根的结构特点,观察其在活体组织内的降解情况及其对周围组织的影响,为其作为组织工程备选支架材料提供依据。方法健康鸡羽根,采用序贯的、不同程度(轻、中、重)理化处理程序,得到3种鸡羽根角蛋白(CCK-I、CCK-II、CCK-III),光学显微镜/扫描电镜观察其形态结构。大鼠背部肌组织内植入鸡羽根角蛋白片(实验组)和未处理鸡羽根片(对照组),以及坐骨神经束间植入鸡羽根角蛋白丝(实验组)和未处理羽根丝(对照组),于不同时间点取材,观察其降解情况和组织相容性。结果(1)光镜:鸡羽根管壁从内到外依次为4个致密层:嗜碱性均质状粗线,3￣5层的嗜酸性角质层,60￣100层含大量色素颗粒的环行角蛋白束和10￣20层含少量色素颗粒的角蛋白束。扫描电镜:未处理的鸡羽根结构致密,管壁平整,无孔洞;处理后结构较疏松,可见大小、深浅不等的孔洞。(2)肌组织内植入:第8周材料呈细丝状或散在细颗粒状,部分被降解吸收,仍有少量炎性细胞,可见多核巨细胞;第12周材料降解为细小碎片。对照组各时间段材料结构完整。(3)神经束间植入:引起的组织反应与细胞类型同肌组织内植入组,神经组织无变性、坏死。结论未处理的鸡羽根由多层致密的角蛋白束构成,含色素颗粒和少量基质。处理后表面出现许多孔洞,结构疏松,且体内可降解,其降解产物不引起机体组织的变性、坏死。鸡羽根有可能成为组织工程化器官或组织构建的备用支架材料。
- 赵冰雷陈英华肖应庆仇欣霞董为人邹仲之
- 关键词：形态学生物材料
- 卵胞质移植——问题和展望(英文)被引量：3
- 2006年
- 人类卵细胞间的胞质转移最近作为人类辅助生殖生物技术的手段并成为研究热点。许多研究表明线粒体对卵母细胞的受精和胚胎发育有显著影响。但是, 卵胞质转移伴随着DNA异质即线粒体的异质性。本文对国内外近年来卵胞质转移的研究进展进行综述, 并结合克隆技术对其进一步的发展提出自己的见解—逆克隆技术。
- 董为人仇欣霞陈英华赵冰雷
- 关键词：胚胎发育
- 大鼠脂肪源性干细胞定向分化为施万细胞样细胞的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究体外培养成年大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs)并诱导分化为施万细胞样细胞的潜能。方法分离、培养成年SD大鼠ADSCs,免疫细胞化学法鉴定细胞表面抗原CD44,CD49d和CD106。传6～8代的ADSCs接种在多聚赖氨酸铺板的培养板内,用含5ng/ml血小板源性生长因子,10ng/ml牛碱性成纤维细胞生长因子,14μmol/LForskolin,200ng/mlHeregulin及10%FBS的DMEM/F12培养基诱导分化12d,免疫细胞化学法鉴定细胞表面标记物GFAP,S-100和P75。结果分离纯化的ADSCs呈CD44和CD49d阳性,而CD106表达为阴性;诱导后的细胞呈梭形,并表达施万细胞特异性标志蛋白-GFAP,S-100和P75。结论从大鼠脂肪组织能获得具有增殖和分化潜能的干细胞,这些细胞在特定条件下可定向诱导分化为施万细胞样细胞。
- 汤银娟张丽华刘杰明董为人郭家松王海红戴翔陈英华肖应庆
- 关键词：脂肪源性干细胞体外培养细胞分化免疫细胞化学法
- 鸡羽根角蛋白管毒性作用的研究(英文)
- 2007年
- 目的观察鸡羽根角蛋白管作为组织工程材料的毒性作用。方法分别制备不同处理强度的3种鸡羽根角蛋白管的浸提液并测定其化学成分。采用皮肤致敏实验(大鼠)、皮内刺激实验(家兔)、小鼠全身急性毒性实验以及体外细胞毒性实验观察鸡羽根角蛋白管浸提液的体内和体外毒性作用。结果鸡羽根在浸出液中释放的主要物质为中等分子量的肽类物质,大分子蛋白释放不多。皮肤致敏实验和皮内刺激实验显示对浸提液不引起皮肤及皮内红斑、水肿和坏死现象。小鼠全身急性毒性实验中,腹腔注射浸提液的小鼠未出现死亡、衰竭、发绀、震颤、严重的腹膜刺激、眼睑下垂及呼吸困难等毒性症状。体外细胞毒性实验示浸提液细胞毒性接近于0级。结论鸡羽根角蛋白管可被水解,释放一些肽类物质,其浸提液对皮肤无致敏作用,皮内刺激反应弱,不引起全身急性毒性症状,无细胞毒性。
- 董为人赵冰雷肖应庆仇欣霞陈英华邹仲之
- 关键词：毒性作用生物材料
- 大鼠附睾脂肪垫脂肪源性干细胞的分离培养及分化潜能被引量：9
- 2009年
- 背景:相对于骨髓基质干细胞,脂肪源性干细胞来源丰富,取材方便,干细胞丰度高,极易培养,具有多向分化潜能,有望成为组织工程、细胞治疗以及基因转染良好的源细胞,但目前对脂肪源性干细胞的研究尚处于初级阶段。目的:拟在体外分离培养大鼠脂肪源性干细胞,并探讨其分化潜能。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-01在南方医科大学组胚教研室和南方医院临床医学实验中心完成。材料:SPF级成年雄性SD大鼠1只,由南方医科大学实验动物中心提供。方法:无菌条件下切取大鼠双侧附睾尾脂肪垫,胶原酶消化法分离培养脂肪源性干细胞,胰蛋白酶消化法传代扩增。取第4代脂肪源性干细胞接种到96孔板,5×104个细胞/皿,待细胞贴壁后分成3组:成骨诱导组加入成骨培养基,成脂诱导组加入成脂培养基,对照组仍用基础培养基,培养14d。主要观察指标:脂肪源性干细胞的形态变化、体外增殖能力、细胞免疫化学鉴定结果。脂肪源性干细胞成骨和成脂分化能力。结果:体外培养的脂肪源性干细胞易扩增,传代后以长梭形细胞为主,呈旋涡状排列,克隆样生长;经多次传代仍能保持较强的增殖能力,细胞生长曲线呈"S"形;细胞表面标志CD44和CD49d呈阳性表达,CD106呈阴性表达。脂肪源性干细胞经成骨诱导7d后,碱性磷酸酶染色呈阳性;成脂诱导3d后,油红O染色示胞浆内有脂滴出现;对照组细胞碱性磷酸酶染色呈阴性,无脂滴存在。结论:从大鼠附睾脂肪垫内分离的脂肪源性干细胞易于培养和传代扩增,在特殊条件下可分化为成骨细胞和脂肪细胞。
- 张丽华汤银娟刘杰明杨林董为人郭家松王海红戴翔宋建武陈英华肖应庆
- 关键词：脂肪源性干细胞免疫细胞化学
- 胶原膜包裹或应用环孢素A改善鸡羽根角蛋白材料的组织相容性(英文)
- 2007年
- 目的观察经胶原膜包裹或应用免疫抑制剂后,鸡羽根角蛋白(CCK)材料在体埋植对周围组织的影响。方法30只SD大鼠,随机均分为5组。将经特殊处理的CCK埋植入竖脊肌组织中。实验组:A组为CCK材料埋植加术后两周腹腔内注射免疫抑制剂环孢素A(CsA,日剂量5mg/kg),B组为CCK材料浸泡CsA(2.5mg/ml)后埋植,C组为胶原膜包裹CCK材料后埋植,D组仅埋植CCK材料。空白对照组仅作切口,不埋植材料。分别于术后2、4、8周取材,常规切片染色,光镜下观察埋植材料的降解情况及对周围组织的影响,免疫组织化学术检测周围组织内T淋巴细胞浸润情况。结果术后各组大鼠一般状况良好,术后第2、4、8周,可见大量巨噬细胞,尤其是多核巨细胞分布于材料边缘,吞噬材料。炎性细胞数量较少。第2、4、8周A组CD3阳性表达细胞数较B组少,与D组有显著差异(P<0.05),A组与空白对照组无显著差异(P>0.05)。结论短期应用免疫抑制剂可显著改善CCK的在体组织相容性;CCK在体内可降解,巨噬细胞,尤其多核巨细胞参与了该过程。
- 董为人仇欣霞赵冰雷陈英华肖应庆郭家松邹仲之
- 关键词：环孢素A胶原T淋巴细胞巨噬细胞
