国家科技重大专项(2013ZX08012-001)
- 作品数：5 被引量：26H指数：4
- 相关作者：曹际娟曹冬梅徐君怡闫伟张明更多>>
- 相关机构：辽宁出入境检验检疫局吉林省农业科学院吉林大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项公益性行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 耐辐射异常球菌高温胁迫下双组份系统dtrAB基因的功能分析
- 2014年
- 分析预测了耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)基因组中的一对双组份蛋白DtrA(DR_A0009)和DtrB(DR_A0010)。生物学软件分析结果显示,DtrA含有组氨酸激酶(HisKA_3)结构域和ATP酶(HATPase_c)结构域,且有4个跨膜区;DtrB含有接收结构域和HTH结构域,且有Lux家族的调控蛋白。两者共同构成一个转录单元。分别构建了dtrA和dtrB基因缺失突变株(ΔdtrA和ΔdtrB),发现42℃高温胁迫条件下,2个突变株的生长和生存率明显低于野生型菌株,而正常培养温度(30°C)条件下,突变株和野生型菌株的生长无差异。QRT-PCR分析显示,dtrA或dtrB基因突变导致了热激相关基因发生下调。推测双组份蛋白DtrAB参与了耐辐射异常球菌在高温胁迫下的调控作用。
- 王文涛郝艳华陈明张维
- 关键词：耐辐射异常球菌
- 应用多重PCR技术筛选检测转Bt基因作物被引量：10
- 2014年
- Bt基因在抗虫转基因作物中广泛应用,是转基因食品筛选检测中最主要的目的基因。本研究依据核苷酸序列分析结果,将在转基因作物中常见的8种Bt基因(cry1Ab、cry1Ac、cry1Ab/Ac、cry1A.105、cry1Ac-M、cry2Ab、cry3A和cry3Bb)划分为cry1A、cry2A、cry3A三个组,并根据每个组的一致性序列设计了可分别检测各组Bt基因的特异性检测引物,其中cry1A组采用了简并引物,经过特异性、灵敏度等测试,建立了针对cry1A组、cry2A组和cry3A组的单一PCR检测方法。此外,通过将这三对检测引物放入同一PCR体系中,还建立了可特异检测上述3组Bt基因的三重PCR方法。结果表明,本研究建立的单一PCR和三重PCR方法均可从各类样品中准确检测出预期Bt基因成分,检测灵敏度达到0.1%。本方法特异性强、灵敏度高,在转基因成分的筛选检测中有很好的应用前景。
- 李飞武闫伟龙丽坤李葱葱张世宏张明
- 关键词：转基因生物多重PCR简并PCRBT基因
- 实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系被引量：7
- 2014年
- 目的:建立实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系的鉴定方法。方法:以转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2为研究对象,在转基因小麦外源片段与小麦染色体重组的边界序列分别设计引物和探针,以其他多种转基因产品和非转基因小麦为对照进行特异性实验,以B73-6-1样品模拟制备10个含量梯度的添加样品进行灵敏度实验。结果:本研究设计的引物和探针具有很好的品系鉴定特异性,检测灵敏度可达到0.01%(m/m)。结论:该方法特异性好、灵敏度高,可快速、准确地鉴定转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系。
- 曹际娟徐君怡曹冬梅张丕桥栾凤侠刘洋
- 关键词：转基因小麦品系鉴定
- 一种交叉引物扩增技术检测转基因水稻品系Bt63方法的建立被引量：5
- 2014年
- 交叉引物扩增技术是一种新型的恒温扩增技术,为转基因生物的检测提供了新的手段。本研究针对转基因水稻Bt63的3'端边界序列设计5条CPA引物进行恒温扩增,反应条件为62℃50min。结果表明该方法特异性好,检测限为0.1%,可用于转基因水稻Bt63品系特异性检测。
- 翟聪聪黄新朱水芳李志红陈洪俊
- 关键词：特异性
- 转基因玉米BT11品系环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立被引量：5
- 2013年
- 目的建立转基因玉米BT 11品系的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法根据转基因玉米BT 11品系特有序列(AY123624.1和AY629236)设计引物,优化建立LAMP反应体系,对该体系进行特异性、灵敏度、稳定性分析。结果本研究设计的引物具有很好的特异性,可特异性检测出转基因玉米BT 11品系;检测灵敏度可达0.5%;经精密度实验分析,该方法的稳定性良好。结论 LAMP方法检测转基因玉米品系BT 11具有特异性高、稳定性好、快速灵敏、过程可视等优点,具有广阔的应用前景。
- 王清华徐君怡曹冬梅刘宇曹际娟
