北京市重大科技计划项目(D0706005040431)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 相关作者：曾洪梅邱德文袁京京杨秀芬张云华更多>>
- 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所沈阳农业大学甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：北京市重大科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 灰葡萄孢菌激活蛋白PEBC2的生物功能被引量：10
- 2008年
- 通过沸水浴、离心、阴离子交换层析等方法,从灰葡萄孢菌Botrytis cinerea BC-4-2-2-1菌丝体中分离纯化出一种激活蛋白,命名为PEBC2,经SDS-PAGE银染显示呈单一条带,相对分子量约为14kD。该激活蛋白能显著提高小麦种子的发芽率,促进小麦幼苗生长,增强小麦的抗旱性和番茄对灰霉病的抗性。经激活蛋白处理后小麦发芽率从75.00%提高到98.33%,处理7、9、11天时株高分别比对照增加了17.07%、23.05%和17.19%,幼苗抗旱综合系数从36.53提高到57.45;该激活蛋白对番茄灰霉病的诱抗效果达60.09%。
- 张云华邱德文张立军杨秀芬曾洪梅袁京京
- 关键词：灰葡萄孢菌纯化生物活性
- 灰葡萄孢菌激活蛋白对番茄灰霉病的诱导抗性及防御相关酶活性的影响被引量：4
- 2008年
- 为探索激活蛋白对植物诱导抗病性机理,分析诱导过程中植物的应激反应,采用室内盆栽的方法,研究了来源于灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)的14 kD激活蛋白PEBC2诱导番茄对灰霉病的抗性,结果表明,经1.182μg/mL激活蛋白诱导处理后番茄对灰霉病的抗性有显著提高,番茄接种灰霉菌17 d后,对灰霉病的诱抗效果达到67.03%。测定了番茄体内与抗病代谢有关的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的动态变化,经激活蛋白处理后,番茄幼苗叶片的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性均有不同程度提高,PAL活性在诱导48 h后达到最高,比对照提高53.82%;POD活性在诱导168 h后达到最高,是对照的2.63倍;PPO活性在24 h和120 h出现2个峰值,分别比对照增加77.57%和87.21%。说明防御相关酶活性的提高,是激活蛋白诱导番茄植株抗灰霉病的主要生理机制之一。
- 张云华张立军邱德文杨秀芬曾洪梅袁京京
- 关键词：灰霉病激活蛋白诱导抗性防御酶
- 应用实时荧光定量RT-PCR检测几种食用菌蛋白抗烟草花叶病毒的活性被引量：2
- 2010年
- 根据烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）外壳蛋白（CP）RNA的特异性序列设计TaqMan荧光探针及其引物,利用实时荧光定量RT-PCR检测食用菌蛋白抗TMV的活性。经食用菌蛋白处理后,TMV病毒汁液中TMV的RNA浓度下降了22.02%~87.93%,传统生物学测定的食用菌蛋白抗TMV的平均枯斑抑制率为10.88%～83.97%;相关性分析表明,实时荧光定量RT-PCR测定的病毒RNA浓度的下降与传统生物学方法测定的平均枯斑抑制率之间呈正相关（r=0.818 8）,具有较好的一致性。利用实时荧光定量RT-PCR检测蛋白抗烟草花叶病毒活性的方法,具有特异性好、快速、简便、重复性高的特点,适合于蛋白抗烟草花叶病毒活性的痕量快速高效检测。
- 廖芳严红赵素芳李兴红
- 关键词：实时荧光定量RT-PCR烟草花叶病毒
- 极细链格孢菌66kDa激活蛋白的纯化及诱导烟草抗TMV的功能被引量：9
- 2008年
- 激活蛋白是一类来源于真菌、诱导植物获得系统抗性的蛋白激发子。通过加热离心、乙醇沉淀、离子交换层析、超滤等方法,从极细链格孢菌(Alternaria tenuissi ma)JH505菌株的菌丝体中分离纯化出一种激活蛋白,在SDS-PAGE银染图谱显示单一条带,表观分子量约为66 kDa,糖蛋白特异性染色确定其为糖蛋白。该蛋白可以诱导三生烟提高对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抗性,处理后的三生烟叶片TMV枯斑数显著减少,枯斑抑制率可达到49%。
- 李杰邱德文杨秀芬曾洪梅袁京京朱建兰
- 关键词：激活蛋白分离纯化诱导抗性
- 提高蛋白激发子产量的培养基及发酵条件的优化被引量：2
- 2009年
- 为了进一步提高极细链格孢菌产蛋白激发子的产量,通过单因子和多因子试验与分析,筛选优化了适于极细链格孢菌产生蛋白激发子的培养基和培养条件,并检测了发酵过程中pH、还原糖、氨基氮和菌丝量变化以及与蛋白激发子产量的关系。结果表明,土豆淀粉和黄豆粉对蛋白激发子产量影响最大,其次是蛋白胨和无机盐。优化的发酵培养基主要成分(g/L):碳源Ⅰ15、葡萄糖5、玉米淀粉5、土豆淀粉20、谷氨酸10、氮源Ⅰ5、黄豆粉10、硫酸铵5。确定了优化的培养条件,调整培养基起始pH为7.0～7.5,将18h菌龄的种子培养液按10%接种量接种到装液量为75mL的500mL摇瓶中,在温度(28±1)℃、摇床转速180r/min下培养可获得理想的蛋白产量。在优化的培养基和培养条件下,发酵12～48h该菌进入对数生长期,48h进入稳定生长期,60h菌丝和蛋白激发子产量达最高。蛋白产量与菌体生物量呈正相关,当还原糖、总糖量消耗到最低水平时,菌丝产量和蛋白激发子产量达最高。优化的培养基菌丝干重收率达3.9g/100mL,蛋白激发子产量达到5.17g/L,比普通的土豆液体培养基提高近4倍。
- 金鑫杨秀芬邱德文曾洪梅袁京京孙东园
- 关键词：培养基发酵条件
