国家自然科学基金(30670993)
- 作品数：8 被引量：13H指数：2
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- 蛋白质精氨酸甲基转移酶的研究进展被引量：1
- 2008年
- 蛋白质精氨酸甲基转移酶(protein arginine methyltransferases,PRMTs)是一种在哺乳动物中常见的酶类,负责对蛋白质底物中的精氨酸进行甲基化。精氨酸甲基化是一种广泛的翻译后修饰方式,涉及RNA加工、转录调控、信号转导、DNA修复等多种细胞过程,并参与调节蛋白质与蛋白质之间的相互作用。PRMTs表达异常与肿瘤、病毒感染、心血管系统疾病等密切相关。
- 陈亚军文格波
- 关键词：翻译后修饰细胞过程
- 微小RNAs和细胞周期
- 2011年
- 微小RNA(microRNAs,miRNAs)对细胞周期的调控已经得到证实,同时细胞周期调控依赖的转录因子(如c-MYC,E2F或P53)对miRNAs也具有调节作用,这些非编码小分子RNAs可通过扰乱关键的细胞周期调节因子而导致肿瘤的发生、发展。miRNAs作为基因表达的调节器,它的存在对于生物体的正常生长发育是非常必要的,miRNAs的异常表达会导致疾病甚至是癌症的发生,miRNAs在临床上正在逐渐变成一个非常重要的治疗靶标。
- 李蓉芳钟警文格波
- 关键词：微小RNAS细胞周期转录因子肿瘤
- 肿瘤相关基因的选择性剪接
- 2010年
- 刘薇钟警文格波
- 关键词：选择性剪接肿瘤相关基因组织特异性表达剪接变异体可变剪接剪接位点
- 雌激素受体α共激活子与乳腺癌被引量：1
- 2009年
- 在乳腺癌发生发展过程中,雌激素受体(estrogen receptor α,ERα)信号途径的活性增强,一个重要的原因是ERα共调节因子的变化。ERα共调节因子可分为共激活子和共抑制子。本文对ERα共激活子的种类、与ERα的结合方式、作用机制及其与乳腺癌的关系进行了综述。
- 钟雅琴钟警文格波
- 关键词：雌激素受体乳腺癌
- 靶向PRMT2基因的micro RNA对雌激素介导的乳腺癌MCF7细胞增殖的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:构建靶向人蛋白质精氨酸甲基转移酶 2 (protein arginine methyltransferase2,PRMT2)基因的microRNA真核表达载体,鉴定其稳定转染乳腺癌细胞株MCF7后对细胞增殖的影响。方法:根据PRMT2mRNA序列设计合成pre-microRNA片段,定向克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体,并稳定转染入MCF7细胞。采用间接免疫荧光法和蛋白质印迹法检测重组体对PRMT2表达的干扰效果以确定其生物活性。采用结晶紫实验和平板克隆形成实验检测重组体转染对MCF7细胞体外增殖和细胞克隆形成能力的影响。FCM法检测重组体转染对MCF7细胞周期的影响。结果:构建的重组体插入片段的碱基序列完全正确,并且重组体稳定转染MCF7细胞后可成功干扰PRMT2基因的表达。在无处理因子的情况下,重组体转染对细胞的生长速度无明显影响;与转染空载体的MCF7细胞相比,稳定转染重组体的MCF7细胞对雌激素的敏感性增强,但其对雌激素拮抗剂4-OHT处理的敏感性无明显差异。平板克隆形成实验表明,重组体能够增强雌激素介导的MCF7细胞的克隆形成能力。FCM法检测表明,转染重组体的MCF7细胞中G2期细胞比例明显升高(P<0.05)。结论:成功构建靶向PRMT2基因的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体,且在稳定转染MCF7细胞后具有生物学活性。抑制内源性PRMT2基因的表达能够提高雌激素介导的MCF7细胞的增殖和克隆形成能力,上调雌激素受体α目标基因cyclinD1和c-myc的表达,促进细胞周期进程。
- 钟警李蓉芳陈亚军曹仁贤文格波
- 关键词：乳腺肿瘤转染细胞增殖
- PRMT2下调NF-κB对甲状腺癌细胞增殖及凋亡的影响
- 2010年
- 目的:构建稳定表达PRMT2和空载体细胞系SW579-PRMT2-V5、SW579-V5,探讨PRMT2对人甲状腺癌SW579细胞生长的影响及其作用机制。方法:应用Lipofectamine2000将真核表达载体pCDNA3.1/NT-V5-PRMT2和空载体pCDNA3.1/NT-V5导入SW579细胞,经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养成细胞系,MTT法检测稳定表达PRMT2对SW579细胞生长的影响,流式细胞仪分析细胞凋亡的变化,Western blot检测转录因子NF-κB及相关基因的变化。采用RT-PCR和Western blot鉴定稳定表达PRMT2的SW579细胞。结果:成功建立了稳定表达PRMT2和空载体的细胞系SW579-PRMT2-V5、SW579-V5。PRMT2显著抑制SW579细胞体外增殖能力。而且在诱导SW579细胞发生凋亡的同时,PRMT2可下调NF-κB活性及其调节基因cyclin D1的表达。结论:PRMT2可通过诱导细胞凋亡和下调NF-κB活性而抑制人甲状腺癌细胞增殖。
- 刘美萍钟警曹仁贤文格波
- 关键词：甲状腺癌细胞CYCLIND1NF-ΚB基因转染
- 蛋白质精氨酸甲基转移酶2在乳腺癌细胞中的表达及其对SKBR-3细胞生长特性的影响被引量：8
- 2010年
- 目的:探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶2(protein arginine methyltransferase2,PRMT2)基因在多种乳腺癌细胞株中的表达情况,以及外源性PRMT2基因过表达对乳腺癌SKBR-3细胞生长特性的影响。方法:采用real-time RT-PCR法检测PRMT2基因在不同乳腺癌细胞株中的表达,并建立稳定表达pcDNA3.1/NT-GFP-PRMT2的SKBR-3细胞株;激光共聚焦显微镜下观察外源性PRMT2蛋白在细胞中的定位,检测在雌激素和雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂4-OHT作用下过表达PRMT2基因对SKBR-3细胞增殖的影响。结果:PRMT2基因在ERα阳性乳腺癌细胞株中表达水平明显高于ERα阴性乳腺癌细胞株;在转染PRMT2基因的SKBR-3细胞株中,雌激素反应元件-荧光素酶报告基因(estrogen response elements-luciferasereporter,ERE-luc)的转录活性明显升高。在无处理因子情况下,外源基因PRMT2在SKBR-3细胞中的表达对细胞的形态及生长速度无明显影响。与未转染及转染GFP空载体的SKBR-3细胞相比,稳定转染PRMT2基因的SKBR-3细胞对雌激素的敏感性明显下降,但其对4-OHT处理的敏感性降低无明显差异。结论:PRMT2基因表达的多少及部位与乳腺癌细胞中ERα的表达密切相关。外源性PRMT2基因在乳腺癌SKBR-3细胞中稳定表达使细胞对雌激素的敏感性降低,但不增加细胞对ER拮抗剂4-OHT的耐药性。
- 钟警陈亚军汤帅曹仁贤文格波
- 关键词：乳腺肿瘤雌激素受体Α转染细胞增殖
- PRMT2真核表达载体构建及在乳腺癌MCF7细胞的亚细胞定位
- 2012年
- 目的构建携带人蛋白质精氨酸甲基转移酶2(PRMT2)基因的真核表达载体pEGFP-N1-PRMT2,观察其转染乳腺癌MCF7细胞后融合蛋白在细胞中的亚细胞定位,为进一步研究PRMT2基因在乳腺癌中的作用奠定实验基础。方法以本实验室保存的pGEM-T-PRMT2载体为模板进行聚合酶链反应(PCR)特异扩增PRMT2基因片段,将扩增片段经HindⅢ和SalⅠ双酶切后克隆到pEGFP-N1载体,酶切与测序鉴定阳性克隆;激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在乳腺癌MCF7细胞中的定位。结果成功构建了pEGFP-N1-PRMT2重组真核表达载体,融合蛋白主要聚集成颗粒状分布于除核仁以外的核浆中,胞质中少量弥散分布。结论 pEGFP-N1-PRMT2重组真核表达载体的构建为进一步研究PRMT2基因在乳腺癌及其内分泌治疗中的作用奠定实验基础。
- 钟警陈亚军杨靖曹仁贤文格波
- 关键词：乳腺癌真核表达载体亚细胞定位
