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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒刺突蛋白基因片段的表达及其初步应用被引量：6: 2003年; SARS virus spike gene fra gment was expressed by Ecoli expr ession systemThe fragment enclose s major neutralization epitope of the virusThe expressed protein wa s purified and an ELISA method was set upBy using the recombinant,tw elve patients’ sera were detected The recombinant SARS coronavirus s pike protein offers an efficient wa y for serological diagnosis and is useful for epidemiological survey and vaccin e; 伊瑶段淑敏张明程周永东高阳杨焕明董小平毕胜利; 关键词：严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒刺突蛋白基因片段

严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒N蛋白基因的表达及其初步应用被引量：4: 2003年; SARS coronavirus N gene w as expressed by Ecoli expression systemThe expressed protein was p urified and an ELISA method was se t up for detection of SARS virus i nfected patient’s serum antibodyT he recombinant SARS coronavirus N protein offers an efficient way fo r serological diagnosis and is use ful for epidemiological study and vaccine; 张明程段淑敏伊瑶周永东高阳杨焕明董小平毕胜利; 关键词：严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒 N蛋白基因表达

SARS恢复期患者血液与排泄物中SARS-CoV RNA的检测被引量：1: 2005年; 目的　应用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测严重急性呼吸综合征(SARS)恢复期患者血液与排泄物中的病毒 RNA。方法　对连续 3 次收集的 23 例确诊 SARS恢复期(病程≥21天)患者的血、尿、痰、粪便标本进行核酸提取,设计特异性内外引物,使用巢式RT PCR的方法进行病毒RNA检测。结果　通过巢式RT PCR,共检测到6份阳性标本,其中粪便标本中检测到 4 份,检出率为5.8%;痰标本中检测到 2 份,检出率为2.9%。在尿液和血液标本中未检测到病毒 RNA。结论个别SARS恢复期患者排泄物中有SARS病毒RNA存在,因此对恢复期患者的排泄物应慎重处理,对其引起SARS的再次传播的危险性需要进一步评估。; 常昭瑞杨仁全王彦斌任丽丽王敏杨耀武郭丽晁彦公曲成毅王健伟洪涛; 关键词：SARS恢复期 RNA 血液粪便标本 SARS-COV 排泄物

抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性及其识别抗原表位的初步鉴定被引量：4: 2006年; 为了明确抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在E.coli中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Westernblotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoVN蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位。结果显示:(1)在4株抗N蛋白单克隆抗体中,1-1C2、1-1D6和2-2E5不与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白发生交叉反应,为SARS-CoVN蛋白特异性抗体;(2)2-8F11、1-1D6和2-2E5针对的抗原表位位于SARS-CoVN蛋白的aa30-60,1-1C2针对的抗原表位则位于SARS-CoVN蛋白的aa170-184。这一研究为阐明SARS-CoVN蛋白的免疫学特征,建立特异性免疫诊断技术和研究其致病机制提供了必要的依据和材料。; 王健伟王彦斌常昭瑞闫克夏谭文杰屈建国夏宁邵阮力洪涛; 关键词：核衣壳蛋白抗原表位

SARS冠状病毒结构蛋白在血清学诊断中潜在应用价值的比较被引量：5: 2005年; 为了确定特异的SARS抗体检测抗原,比较了SARS冠状病毒(SARS-CoV)主要结构蛋白与SARS患者血清的反应性。从SARS死亡患者的肺组织提取的总RNA为模板,用RT-PCR技术分别扩增S、N、M和E4种结构蛋白基因,对3种S截短突变体和N、M、E的重组蛋白在大肠杆菌中进行表达。以表达的蛋白为抗原,应用Westernblot跟踪检测11例SARS患者血清54份。结果显示:SARS-CoV的重组N蛋白和S蛋白有很强的抗原性,S蛋白的3个区段的抗原性强弱存在差异,S3抗原性强于S1和S2;在患病第1周、2周、3周及3周以上,N蛋白和S3蛋白抗体检出率分别为40%、65.2%、100%、100%和40%、61%、76.2%、100%;提示SARS-CoV重组N蛋白和S3蛋白在SARS的血清学诊断中有一定的应用价值。; 王彦斌常昭瑞魏海燕晁彦公曲成毅王健伟洪涛; 关键词：SARS冠状病毒结构蛋白 WESTERN BLOT 血清学诊断

医务人员感染传染性非典型肺炎的影响因素分析被引量：1: 2004年; 目的　分析医务人员感染传染性非典型肺炎 (SARS)的影响因素 ,为控制SARS在院内的传播 ,降低医护人员的SARS发病率和医院内感染水平提供一定的参考依据。方法　采用整群抽样方法抽取了广东省 9家医院 ,问卷调查了 9家医院中接触过SARS病人的 164 5名医务人员以及相关的科室。对影响医务人员感染SARS的因素进行了非条件Logistic回归的多因素分析。结果　共筛选出 7个可能与感染SARS有关的因素分别是 :医务人员的职业 (医生、护士和护理员 ) ,参与吸痰操作 ,诊治SARS病人时是否戴眼罩 ,洗手装置 ,隔离服的层数 ,通常戴口罩个数和初始接触病人是否戴口罩。在调查的 48个科室中 ,81.3 %的科室进行了严格的隔离分区 ,80 %的房间能够经常开窗通风 ,83 .3 % (4 0 /4 8)的科室使用紫外灯消毒 ,91.7% (4 4 /4 8)的科室使用过氧乙酸熏蒸喷雾消毒剂消毒 ,3 9.6%的科室使用循环风紫外线消毒。结论　医务人员应采取严格的分级防护措施 ;医院的科室应加强隔离与消毒措施 ;; 陶茂萱张美云曹兆进白雪涛邹宇华陈少贤; 关键词：传染性非典型肺炎医务人员影响因素

检测人血清中SARS冠状病毒IgG抗体的ELISA方法建立及其应用被引量：10: 2004年; 为了建立方便、敏感和特异的SARS病毒血清学诊断方法 ,利用PQE30表达系统在大肠杆菌M1 5中分段高效表达了SARS病毒N蛋白。通过金属鏊合亲和层析纯化了目的蛋白N - 1和N - 2 ,Westernblot结果显示 ,两个表达蛋白均具有较好的抗原性。然后将N - 1和N - 2蛋白共同包被 ,建立了检测人血清中SARS病毒IgG抗体的间接ELISA法。用此方法检测 1 2 0例临床诊断为SARS的病人和 2 4 4个不同年龄组正常人血清IgG抗体 ,结果 1 2 0例SARS病人的第一份血清IgG抗体总阳性率为 6 0 0 % ,发病第 0～ 7、8～ 1 0、1 1～ 1 4、1 5～ 2 7和 2 8天后的血清中 ,SARS病毒IgG抗体阳性率分别为 0、1 1 1 %、6 0 0 %、6 0 5 %和 70 3% ;而 2 4 4份正常人血清检测结果均为阴性 ,包括 1 0 0份1 4岁以下儿童血清也未发现假阳性。结果表明 ,利用大肠杆菌表达的N蛋白完全能够替代全病毒灭活抗原 ,所建立的间接ELISA方法简单 ,价格低廉 ,能保证生物安全 ,对SARS可疑病例的确诊和排除具有重要的实际应用价值 ,可用于SARS高危人群的血清流行病学监测 ,SARS疫情的控制和预防。; 毛乃颖张燕朱贞崔爱利刘中华杨建国严汉民蒋小泓张建阮力陈彪许文波; 关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒 N蛋白 ELISA 抗体

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国家高技术研究发展计划(2003AA208403)