浙江省科技计划项目(2012C23076)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：陈建澍应国清易喻梅建凤黄婷婷更多>>
- 相关机构：杭州博林生物技术有限公司浙江工业大学更多>>
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- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 温敏载体固定化木瓜蛋白酶的特性及其消化HCG抗体的应用被引量：4
- 2013年
- 以温敏性材料N-羟基琥珀酰亚胺活化的聚(N-异丙基丙烯酰胺)为载体制备固定化木瓜蛋白酶,对其酶学性质进行了研究。结果表明:固定化酶的最适pH值为7.5,最适温度为65℃,米氏常数为2.72 mg/mL;经过24次温敏循环操作,剩余相对活力86.6%;在4℃条件下放置60 d,剩余相对活力为71.5%。与游离酶相比,固定化酶pH值稳定性、热稳定性、操作稳定性和储存稳定性都有显著提高。将此固定化酶应用于HCG单克隆抗体消化,与纤维素固定化酶相比,水解能力更强,更适合于大分子的酶解,特别是抗体片段的制备。
- 梅建凤黄婷婷陈建澍易喻朱克寅应国清
- 关键词：木瓜蛋白酶固定化聚(N-异丙基丙烯酰胺)酶学性质
- 固定化木瓜蛋白酶水解HCG抗体及其片段的纯化被引量：2
- 2014年
- 采用温敏载体NHS-PNIPAM固定化木瓜蛋白酶,水解β-HCG单克隆抗体制备Fab片段,并优化水解工艺。结果表明:30℃,在pH 7.0的磷酸盐缓冲液中(含10 mmol/L半胱氨酸,2 mmol/L EDTA),加酶量40 u·(mg抗体)-1,转速180 r/min,反应3 h,β-HCG抗体的转化率大于98.0%,主要生成目的产物Fab片段。酶解产物通过Protein L亲和色谱法分离纯化,得到的Fab片段回收率为74.5%,纯度为98.6%。
- 易喻高虹陈建澍朱克寅应国清
- 关键词：水解木瓜蛋白酶纯化FAB片段
- β-hCG单抗在亲和双水相体系中的分配研究被引量：1
- 2013年
- 以磺胺二甲基嘧啶(SM2)作为亲和配基,构建聚乙二醇(PEG)/柠檬酸钠亲和双水相体系,并对β-hCG单克隆抗体在该体系中的分配效果进行研究。结果表明β-hCG单克隆抗体在PEG/柠檬酸钠双水相亲和体系中具有较好的分配特性,进一步考察了成相聚合物分子质量、体系各组分浓度、PEG-SM2加入量、pH值、抗体加入量等因素对分配效果的影响,优化后的分配条件为:PEG 4 000 9%,PEG-SM2 8%,柠檬酸钠浓度12%,pH6.0,抗体加入量0.5 mg/g,抗β-hCG单克隆抗体的分配系数达7.6,收率为91.1%。
- 梁国杰易喻张彦璐梅建凤陈建澍朱克寅应国清
- 关键词：双水相
