国家科技重大专项(2009ZX09401-006)
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
- 相关作者：李振国姚文兵郭明明高向东更多>>
- 相关机构：北京双鹤药业股份有限公司中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- 重组蛋白A亲和填料的制备及其性能评价被引量：3
- 2012年
- 为了获得一种优良的抗体纯化介质,制备了重组金黄色葡萄球菌蛋白A(rProtein A)亲和填料,并考察了所制备的亲和填料的纯化性能。利用自行构建的rProtein A工程菌,经诱导表达、纯化获得rProtein A纯品,将其偶联到经环氧氯丙烷活化的Sepharose 4 Fast Flow凝胶上,得到rProtein A亲和填料,并使用兔抗尿酸氧化酶抗体对该填料的性能进行验证。结果显示,在自制的rProtein A亲和填料上rProtein A浓度为1.5×10-4 mol/L。采用Scatchard模型分析,得到其解离常数和最大表观吸附量分别为2.28×10-7 mol/L和20.697 g/L,说明制得的rProtein A亲和填料对抗体有很好的结合能力。将该填料于0.1 mol/L NaOH溶液中浸泡1 h,其色谱性能未见变化。将该填料用于纯化兔抗体,湿胶结合抗体量可达19 mg/mL;一步柱色谱即可得到电泳纯度的抗体样品,回收率高于96%。本研究为rProtein A亲和填料的国产化奠定了基础。
- 郭明明王俊玲吴彦卓徐明波高向东
- 关键词：纯化抗体
- 大肠杆菌周质蛋白提取工艺的研究被引量：5
- 2011年
- 研究了精氨酸缓冲液在不同浓度、pH值及提取时间下的周质蛋白提取率,并以溶菌酶法、渗透压休克法作为对比。结果表明浓度0.4 mol/L,pH值8.0,提取时间为45 min时,周质目的蛋白达到0.89 mg/g湿菌,相比其他方法,周质蛋白提取率分别提高93%、187%。实验得到一种高效、方便的大肠杆菌周质蛋白提取工艺,为周质表达的重组蛋白大规模生产奠定了基础。
- 李振国徐明波牛罡姚文兵
- 关键词：周质蛋白大肠杆菌
- 在大肠杆菌周质表达重组蛋白的研究进展被引量：9
- 2011年
- 大肠杆菌表达系统是基因表达技术中发展最早和应用最广的表达系统,由于大肠杆菌周质空间具有其独特优势,重组蛋白在周质表达和提取技术得到国内外学者的关注。文章从重组蛋白在大肠杆菌周质表达的特点、提高周质蛋白表达的策略以及周质蛋白提取技术进行了论述。
- 李振国徐明波牛罡陈遥姚文兵
- 关键词：分泌表达大肠杆菌
