中国科学院战略性先导科技专项(XDA01040200)
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
- 相关作者:徐浣白黄洁芳张雁云王军雷楗勇更多>>
- 相关机构:江南大学上海市第一人民医院上海交通大学更多>>
- 发文基金:中国科学院战略性先导科技专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- GPR120活化诱导乳腺癌化疗耐药的研究
- 化疗耐药是乳腺癌治疗失败甚至疾病复发的主要原因,深入探讨化疗耐药发生的分子机制,寻找导致化疗耐药发生的潜在关键分子对于改善乳腺癌预后具有重要的临床价值。本研究发现乳腺癌细胞阿霉素耐药株MCF-7/ADM中GPR120表达...
- 王雪
- 关键词:乳腺癌化疗耐药ABC转运蛋白
- 文献传递
- 干细胞因子治疗——研究与展望被引量:3
- 2016年
- 干细胞是一类具有自我更新能力的多潜能细胞,在一定的条件下,可分化为多种功能细胞。而干细胞因子是指可靶向调控干细胞的干性维持、定向分化等特性的重要因子,以及在干细胞治疗中产生的、对其修复损伤具有关键作用的活性因子。近年来,干细胞逐渐被应用到各种人类疾病的治疗中,但其临床应用仍然受到多种因素的制约。干细胞因子治疗为解决及避免这些问题带来了曙光,有望成为未来干细胞治疗的新方向。
- 黄洁芳徐浣白张雁云
- 关键词:干细胞治疗干细胞因子靶向调控疾病治疗
- 细胞穿膜肽TAT与小鼠干细胞转录因子Oct4融合表达及纯化被引量:2
- 2013年
- 将TAT-Oct4目的基因插入pET28a表达载体,构建重组表达质粒pET28a-TAT-Oct4,形成大肠杆菌重组表达体系。融合蛋白TAT-Oct4在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,表达产物经纯化后,纯度可达90%以上。通过尿素梯度透析复性,TAT-Oct4平均复性收率为8.8%。细胞免疫荧光技术分析表明,TAT-Oct4融合蛋白可穿透近100%细胞的细胞膜,其进膜后主要分布于细胞核内。建立了具有活性的TAT-Oct4融合蛋白生物制备方法,为细胞重编程提供了一种有效的研究材料,并可为其他用于细胞重编程的干细胞转录因子设计提供实用的方法学。
- 王军雷楗勇陈蕴金坚
- 关键词:包涵体纯化
- 转化生长因子βⅡ型受体胞外域融合蛋白的体内抗肝纤维化活性研究被引量:2
- 2019年
- 研究人血清白蛋白与转化生长因子βⅡ型受体胞外域的融合蛋白(HSA-eTGFBR2)的体内抗肝纤维化作用,以期寻找更加稳定的抗肝纤维化药物。通过CCl_4诱导构建小鼠肝纤维化模型,设正常组、模型组、阳性组、eTGFBR2治疗组、HSA-eTGFBR2治疗组和HSA组。经过苏木精-伊红染色、血清肝功能指标活性检测及Western blot等方法鉴定各组抗肝纤维化效果。结果显示:(1)CCl_4能引起肝脏结构紊乱、肝细胞坏死、胶原纤维增生,损伤肝功能,诱导纤维化;(2)HSA-eTGFBR2及其单体均能明显改善肝纤维化症状,减轻肝细胞损伤及胶原沉积,改善肝功能,降低肝脏中纤维化标志物α-SMA和COL I的表达水平,其改善肝纤维化效果与单体药物相当,而白蛋白几乎没有治疗效果;(3)与单体药物相比,HSA-eTGFBR2融合蛋白在降低给药频率的情况下能取得相当的治疗效果。综上表明HSA-eTGFBR2融合蛋白具有良好的抗肝纤维化效果,与单体药物相比,融合蛋白药物在低注射频率下也能取得较好的治疗效果,表明该融合蛋白药物半衰期更长、更稳定,具有更优的应用前景。
- 蔡燕飞万爱妮陈蕴金坚
- 关键词:肝纤维化
- 人血清白蛋白的生物制备工艺优化被引量:2
- 2020年
- 通过中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell, CHO)表达系统制备人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA),为HSA及其融合蛋白质药物的制备及功能研究提供依据。首先构建含有目的基因的重组表达质粒pMH3-HSA,通过有限稀释法和Dot blot检测筛选阳性单克隆,随后扩大培养并悬浮驯化,然后运用5 L一次性生物反应器进行高密度放大培养,以无血清培养基B001和F001分别作为基础和流加培养基,以55 r/min、DO 20%~40%、pH 6.8~7.4、Tm 37℃为基础参数进行发酵控制,通过细胞计数、SDS-PAGE、Elisa、Western Blot等实验方法,检测发酵过程中的细胞生长状态以及目标蛋白HSA的表达情况,同时与毕赤酵母表达系统制备的HSA进行比较。结果表明:1)成功构建并筛选出了含外源HSA基因的高表达单克隆CHO细胞株;2)在5 L一次性生物反应器中进行流加培养,HSA的最高产量达180μg/mL;3)CHO表达系统产物几乎无降解。综合表明HSA蛋白更适合在CHO系统中进行表达,其蛋白完整性优势在该系统中表现得尤为明显。
- 蔡燕飞陈蕴金坚
- 关键词:人血清白蛋白高密度发酵