广西医疗卫生重点科研课题(200844)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王长青肖强李雷谢玉波钱倩更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院广西卫生管理干部学院广西壮族自治区人民医院更多>>
- 发文基金：广西医疗卫生重点科研课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转录因子E2F-1在胃癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2009年
- 目的探讨转录因子E2F-1在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和免疫组化检测E2F-1在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系临床病理特征进行分析。结果胃癌组中E2F-1 mRNA的阳性表达率为72.4%(42/58),癌旁组为50.0%(29/58),正常对照组为27.9%(12/43),组间比较差异有显著性(P<0.05);E2F-1 mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无显著性(P>0.05)。胃癌组中E2F-1蛋白的阳性表达率为65.5%(38/58),癌旁组为43.1%(25/58),正常对照组为23.3%(10/43),组间比较差异有显著性(P<0.05);E2F-1蛋白在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无显著性(P>0.05)。结论E2F-1 mRNA和E2F-1蛋白均在胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间没有必然联系,提示E2F-1的高表达可能与胃癌的发生有关。
- 刘春斌唐振勇肖强李雷王长青马玉林尹永硕
- 关键词：E2F-1实时荧光定量PCR免疫组化胃肿瘤
- E2F-1过表达对胃癌细胞中癌基因和抑癌基因表达的影响
- 2009年
- 目的:了解E2F-1过表达对胃癌细胞中癌基因和抑癌基因表达的影响,探讨E2F-1影响胃癌细胞侵袭能力的作用机制。方法:从胃癌细胞MGC-803和MGC-803/E2F-1中提取总RNA,纯化mRNA,逆转录将Cy3和Cy5两种荧光素标记到两组逆转录合成的第一链cDNA。与22K人类基因组寡核苷酸芯片进行杂交,采用LuxScan 10K/A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种荧光信号,应用LuxScan3.0图像分析软件对图像处理分析,筛选出差异基因。结果:在21522条基因中,MGC-803/E2F-1和MGC-803细胞差异表达的癌基因和抑癌基因有39条,其中上调基因19条(49%),下调基因20条(51%)。结论:过表达E2F-1在胃癌细胞MGC-803中影响了众多癌基因和抑癌基因的表达变化,表明胃癌侵袭能力的变化是多基因相互作用,多种信号传导途径相互影响的结果。
- 胡锦伟肖强谢玉波李雷王长青解乃昌
- 关键词：胃癌E2F-1基因芯片差异表达基因
- E2F-1基因过表达影响胃癌MGC-803细胞对化疗药物敏感性的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:构建E2F-1真核表达载体,建立稳定过表达E2F-l的胃癌细胞株,探讨E2F-l基因过表达对胃癌MCC-803细胞化疗敏感性的影响方法:应用Tri zol法从胃癌的癌组织中提取mRNA逆转录合成cDNA,按Gene-Bank公布的E2F-1基因序列设计带有酶切位点的引物并行扩增获得E2F-1的ORF片段;然后经限制性内切酶EcoR l和Hind Ⅲ双酶切后将E2F-1定向克隆到真核表达载体pCMV-HA2中转化筛选用脂质体Lipofectamine2000将该载体转染MGC-803胃癌细胞,然后用含G418的培养基筛选获得具Genectin抗性的过表达E2F-1的胃癌细胞株实时定量PCR( real-time quantitative PCR)和蛋白印迹(Western blotting)技术检测MGC-803/E2F-1细胞内E2F-1表达情况四唑蓝(MTT)法检测MGC-803/E2 F-1组(实验组)、MGC-803/EV组(阴性对照组)和MCC-803组(未转染组)细胞对化疗药物的敏感性结果:重组载体pCMV-E2F-1-HA2经EcoR I和Hind Ⅲ双酶切后得到预期片段,测序结果与报道的E2F-1基因之0RF完全一致,证明目的基因已成功克隆入真核表达载体,获取具Genectin抗性的细胞克隆、并进行了扩增。RT-PCR和Western blotting实验证实重组载体pCMV-E2F-l-HA2成功转入胃癌细胞内,并稳定过表达E2F-1 MTT法检测发现,5-氟尿嘧啶(5-FL)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)对MGC-803/E2F、-1组细胞的抑制率分别为71.45%、74.03%、76.72%,均明显高于MGC-803/EV组(45.58%、53.69%、54.58%)和MGC-803组(53.70%、54.67%、55.05%) (P<0.05)结论:成功构建了真核表达载体pCMV-E2F-1-HA2,并建立了稳定过表达E2F-1的胃癌细胞株MGC-803/E2F-1。E2F-1过表达增强了胃癌细胞对化疗药物的敏感性。
- 钱倩王长青李雷谢玉波肖强
- 关键词：E2F-1转染药敏试验
