中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金(2012TS06)
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 相关作者：郭志勋冯娟张迪杨铿苏友禄更多>>
- 相关机构：上海海洋大学中国水产科学研究院南海水产研究所广东省水生动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金广东省科技计划工业攻关项目广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 青蟹呼肠孤病毒和青蟹双顺反子病毒-1双重巢式PCR检测方法的建立被引量：11
- 2013年
- 青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)和青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)是从近年发生大规模死亡的养殖拟穴青蟹体内分离的、对青蟹具有致病性的两种病毒。它们常常同时存在,给青蟹养殖业带来巨大经济损失。在疾病的防治中,快速高效的病毒检测方法对疾病诊断以及及时采取有效地防治措施具有重要的意义。本研究利用MCRV和MCDV-1基因保守区设计4对引物,建立了可同时检测这两种病毒的双重巢式PCR(duplex-nested PCR)检测方法。研究发现该方法对两种病毒的检测限都可以达到10个拷贝,并与鲍肌肉萎缩病毒(AbSV)、虾类传染性表皮与造血组织坏死症病毒(IHHNV)、大菱鲆红体病虹彩病毒(TRBIV)、对虾白斑综合症病毒(WSSV)、鱼类神经坏死病毒(NNV)和贝类急性病毒性坏死症病毒(AVNV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性地检测两种病毒。本方法具有高灵敏度、高特异性和简便快捷等特点,可作为一种快速诊断工具,检测拟穴青蟹中的MCRV和MCDV-1基因。
- 张迪杨铿苏友禄冯娟郭志勋
- 关键词：拟穴青蟹
- 青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用被引量：1
- 2015年
- 根据青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)基因的保守序列设计1对引物,从感染MCDV-1的青蟹鳃组织中提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到1 314 bp的c DNA片段。纯化后的PCR产物用地高辛(DIG)标记制备核酸探针,此探针与青蟹呼肠孤病毒(MCRV)、鲍肌肉萎缩症病毒(Ab SV)、类疱疹病毒(Ab HV)、白斑综合症病毒(WSSV)、虎纹蛙病毒(TFV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性的检测出MCDV-1,检出MCDV-1的灵敏度为8.58×107 copies/μL。采用原位杂交检测方法检测拟穴青蟹组织中MCDV-1的组织分布,结果表明,拟穴青蟹中MCDV-1 RNA的阳性信号主要分布于肝胰腺、神经节、肠道和食管。
- 崔亚婷倪军马红玲许海东冯娟申亚阳郭志勋
- 关键词：拟穴青蟹原位杂交
