安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2012B132)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：刘勇李文雍吴风瑞丁彪王荣更多>>
- 相关机构：阜阳师范学院安徽大学江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 未成熟卵母细胞的形态与成熟能力、染色质构型和H3K27三甲基化水平的相关性研究被引量：3
- 2014年
- 该文研究未成熟卵母细胞的形态指标与成熟能力、染色质构型和表观遗传模式的相关性,为家畜繁育和人医辅助生殖选卵标准提供参考。以经不同激素处理(N组、P组、H组)的小鼠未成熟卵母细胞作为实验材料,利用滴中孔技术进行体外跟踪培养检测不同形态未成熟卵母细胞的成熟能力,Hoechst33342标记DNA AT双键研究染色质构型,H3K27三甲基化抗体检测全基因组H3K27三甲基化水平差异。结果表明,H组小鼠卵母细胞中,细胞质直径较小的更适合在滴中孔系统内培养成熟[(71.63±1.02)μm,A形态vs(68.33±0.97)μm,B形态,P<0.05],核仁直径和透明带厚度与卵母细胞成熟能力无关。A形态卵母细胞NSN型(non-surround nucleolus)比例高于SN型(surround nucleolus)(78.57%vs 21.43%),B形态卵母细胞SN构型比例高于NSN构型(65.12%vs34.88%)。N、P、H三组小鼠卵母细胞H3K27三甲基化水平差异不显著,但N组小鼠中,A形态未成熟卵母细胞H3K27三甲基化水平显著低于B形态组(P<0.05)。P组和H组小鼠中,A形态卵母细胞与B形态卵母细胞H3K27三甲基化水平差异不显著。如果不考虑激素处理分组,则A形态卵母细胞H3K27三甲基化水平显著低于B形态卵母细胞H3K27三甲基化水平(P<0.05)。综上可知,卵母细胞形态可以反映其成熟能力、染色质构型和H3K27三甲基化水平,激素处理影响H3K27三甲基化水平。
- 刘勇张领贾二腾花学洋李漫漫张贺丁彪吴风瑞王慧利李文雍
- 关键词：体外培养
- 小鼠组蛋白H3K4甲基化酶Smyd3启动子荧光素酶报告载体的构建与活性分析
- 2013年
- 为研究小鼠(Mus musculus)组蛋白H3K4甲基化酶基因Smyd3转录调控的分子机制,本研究首先通过PCR的方法克隆了5条不同长度的Smyd3启动子5'端缺失片段,与pMD19-T载体连接后,双酶切克隆入pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,构建Smyd3启动子-pGL3-Basic报告基因重组质粒,瞬时转染HEK293细胞48 h后采用双报告基因检测试剂盒检测Smyd3启动子各缺失片段的相对荧光活性。结果表明,本研究成功构建Smyd3启动子5'端缺失片段-pGL3-Basic荧光报告基因重组质粒,所构建的启动子重组子转染组与阳性对照组相比表现出荧光活性,并且pGL3-Smyd3-4的荧光活性最强,是其他的2至4倍左右,pGL3-Smyd3-5的荧光活性最弱。本研究初步确定Smyd3基因的启动子核心区域可能位于-533～-42 bp之间,在-2 026～-533 bp之间可能存在启动子负调控序列。
- 雷学华吴风瑞吴风瑞刘勇丁彪王荣
- 关键词：活性分析小鼠
- 调整时差对昆明小鼠排卵的影响
- 2012年
- 为了研究调整时差对排卵数量的影响,为需要调整时差生活的人们提供生殖健康理论基础,以时差调整的时机和时长为因素,以昆明小白鼠为实验材料设计了四组实验,统计分析了上述因素对排卵数量的影响。结果表明时差调整2 h左右不会影响排卵数量,时差调整12 h左右,会导致排卵数量减少。并且排卵启动时调整时差,对排卵数量影响不大,而排卵启动后12 h再调整时差,会减少排卵数量。
- 刘勇丁彪吴风瑞李文雍
- 关键词：排卵小鼠
- H3K27乙酰化模式在孤雌胚与正常胚中的差异及其对胚胎发育的影响被引量：4
- 2013年
- 目的考察小鼠孤雌胚胎H3K27乙酰化模式与体内胚胎的差异,探究表观遗传模式对孤雌胚发育的影响。方法利用SrCl2激活卵母细胞,获得植入前各时期孤雌胚胎,并统计胚胎发育率;小鼠注射孕马血清激素(Pregnant Mare Serum Gonadotrophin,PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin,hCG)超排后合笼,在不同发育时间采用体内冲胚的方法获得体内各时期胚胎;将获得的各期各类胚胎用H3K27乙酰化抗体与特异性位点结合,与连接有FITC荧光基团的二抗共同孵育,利用激光共聚焦显微镜检测荧光强度,获得小鼠植入前各时期孤雌胚和体内胚组蛋白H3K27乙酰化模式。结果用SrCl2激活成熟卵母细胞得到的孤雌胚的激活率和囊胚率分别为96.39%和69.54%,处于正常发育水平;孤雌胚H3K27乙酰化荧光强度从原核期相对较高的水平逐渐降低,2-细胞、4-细胞和8-细胞时期荧光强度都处于较低水平,到桑葚胚时期又突然升高,总体变化趋势和体内组先降低后升高的整体趋势一样,且原核期至8-细胞时期的荧光值孤雌胚高于体内胚,桑囊胚时期则相反;两组的H3K27乙酰化荧光强度值在原核期和桑葚胚时期差异不显著(P>0.05),在2-细胞、4-细胞、8-细胞和囊胚期差异显著(P<0.01)。结论本研究表明小鼠孤雌胚H3K27乙酰化模式与体内胚的模式存在差异,可能是影响孤雌胚发育能力的重要原因之一。进一步的深入研究将对纠正小鼠孤雌胚乙酰化模式和提高孤雌胚发育能力具有重要意义。
- 王彩红刘勇黄继昌吴风瑞丁彪张远王荣李文雍
- 关键词：小鼠卵母细胞孤雌胚胚胎发育
- 微创输精管结扎术的建立与应用被引量：2
- 2013年
- 目前,输精管结扎手术方法较多,但普遍伤害较大。研究通过自制工具,采用微创手术,缩小了切口的大小,可以让术后小鼠尽快恢复健康,降低感染风险,也为人医相关手术提供了新的思路。
- 刘勇张强张先乐李文雍
- 关键词：输精管结扎微创小鼠
