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携带人卵泡刺激素受体的慢病毒载体疫苗的构建及其免疫效应检测被引量：1: 2016年; 制备携带卵泡刺激素受体的慢病毒载体疫苗,并研究其对小鼠的免疫效应。将卵泡刺激素受体胞外区(fshr366)基因克隆到慢病毒载体上,采用脂质体转染法将重组质粒转染至293T细胞中,包装并产生含有目的基因的病毒颗粒;分别利用RT-PCR和Western blot检测感染病毒颗粒的293T细胞中fshr366在m RNA水平及蛋白水平的表达情况;用携带fshr366的病毒颗粒单次腹腔免疫BALB/c小鼠,分别在免疫0、14、21和28 d对小鼠眼眶采血,ELISA法检测免疫小鼠血清的特异性并测定抗体滴度。酶切和测序结果表明fshr366基因片段成功构建到慢病毒载体上。将包装产生的携带fshr366的慢病毒颗粒感染293T细胞后,RT-PCR和Western blot检测结果表明细胞在转录水平和蛋白水平均表达fshr基因。ELISA结果显示携带fshr366的慢病毒颗粒单次腹腔免疫小鼠后,免疫14 d就激起了机体的体液免疫反应,抗体滴度达到1∶1 600。成功制备了携带卵泡刺激素受体的慢病毒载体疫苗,其可以在小鼠体内激发FSHR抗原特异的早期持续性免疫反应。; 马晓玲刘红春李江伟; 关键词：卵泡刺激素受体慢病毒载体疫苗体液免疫反应

抗卵泡刺激素受体纳米抗体的制备及鉴定被引量：6: 2013年; 目的获得抗卵泡刺激素受体(FSHR)的纳米抗体。方法使用原核表达的重组蛋白His-FSHR234对新疆双峰驼单域抗体噬菌体展示文库进行亲和筛选,将筛选获得的重链抗体的可变区(vhh)基因亚克隆至pET30a表达载体,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达VHH重组蛋白,镍离子亲和层析柱纯化获得纳米抗体。ELISA检测纳米抗体的抗原结合活性。结果 His-FSHR234筛选富集后,随机挑选40个克隆进行鉴定,其中28个为阳性克隆,挑选4个vhh基因进行克隆,PCR和酶切鉴定目的基因大小与预计相符。SDS-PAGE显示,VHH FSHR-06、VHH FSHR-25、VHH FSHR-30、VHH FSHR-50分别在相对分子质量(M r)31 000、26 000、25 000、26 000有目的条带。ELISA检测显示,4个纳米抗体对His-FSHR234重组蛋白均具有结合活性,其中VHH FSHR-06的抗原结合活性最高。结论从新疆双峰驼单域抗体噬菌体展示文库中筛选获得了1个具有较高抗原结合活性的抗FSHR的纳米抗体。; 夏雪琴木亚沙尔·买买提拉洪翟田甜李江伟; 关键词：卵泡刺激素受体双峰驼

卵泡刺激素功能肽与受体胞外区不同片段结合作用的分析: 2017年; 【目的】卵泡刺激素(FSH)33-53肽可以与FSH受体(FSHR)结合,并激活下游信号,被作为FSH功能肽。然而其在受体上的具体结合位置还不清楚。阐明FSH33-53肽在FSHR上的结合区域,为基于FSH的疫苗设计提供依据。【方法】采用重组的FSHR胞外区(ECD)和富含亮氨酸区(LRR)及合成的FSHR9-30区分析这些FSHR的功能区域与FSH33-53的结合作用。PCR扩增得到h FSHR ECD和h FSHR LRR目的基因,构建重组质粒p ET22b-FSHR-ECD和p ET22b-FSHR-LRR,表达纯化获得蛋白FSHR-ECD和FSHR-LRR。采用多肽合成法获得FSHR9-30-KLH。通过ELISA方法检测受体片段与FSH33-53肽的结合和亲和力。【结果】获得FSHR-ECD和FSHR-LRR蛋白,其相对分子质量(Mr)分别为43和32k Da。在受体为0.5μgm L,配体为2.5μgm L时,三种蛋白均与FSH33-53肽结合。ELISA检测受体与配体的亲和力分别为0.21×10^(-6)、0.45×10^(-6)和0.056×10^(-6)mol/L。【结论】FSHR 9-30片段与FSH33-53肽的结合较其它两个片段结合力强。; 赵婷席欧彦秦瑞坪邱玲玲马晓玲李江伟; 关键词：LRR 胞外区

抗人卵泡刺激素受体多克隆抗体的制备及其对实验大鼠骨质疏松的抑制作用被引量：2: 2017年; 近年来,卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)在骨质疏松中的作用得到了证实。卵泡刺激素受体(FSH receptor,FSHR)在成熟的人破骨细胞及破骨细胞前体即单核细胞表面表达,成为阻断FSH作用的潜在靶点。制备了高滴度的兔抗人FSHR多克隆抗体,采用双侧去卵巢手术方法建立SD(Sprague-Dawley)大鼠骨质疏松症动物模型,观察抗FSHR抗体对大鼠实验骨质疏松症的治疗效果。结果显示,卵巢摘除(ovariectomized,OVX)大鼠经抗FSHR多抗和亮丙瑞林(leuprorelin,LE)治疗两周后,与PBS对照组相比,血清FSH和黄体酮(luteinizing hormone,LH)水平显著降低(P<0.05),而雌二醇(estrogen,E2)水平有一定升高,但结果不显著(P>0.05)。另外,骨组织化学染色显示多抗和LE治疗组大鼠骨小梁数目增加,断裂现象较少。这些结果初步表明,采用抗FSHR抗体对SD大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用。; 秦瑞坪李玲霞马晓玲席欧彦赵婷邱玲玲李江伟; 关键词：SD大鼠卵泡刺激素受体亮丙瑞林

卵泡刺激素及其受体与肿瘤的相关性被引量：1: 2015年; 卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)被认为只表达在人和哺乳动物的睾丸支持细胞和卵巢颗粒细胞中,在生殖中具有重要作用。最近研究发现,FSHR在多种肿瘤血管内皮细胞表面特异表达,这引起了研究者对该受体与肿瘤尤其是与肿瘤血管形成之间关系的关注。本文主要对FSH和FSHR信号通路及其病理意义和在肿瘤中的作用等方面的研究进展进行综述。; 木亚沙尔·买买提拉洪夏雪琴郭骏李江伟; 关键词：卵泡刺激素卵泡刺激素受体肿瘤血管形成

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国家自然科学基金(81260333)