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一株抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的广谱中和活性被引量：4: 2007年; 以H5N1禽流感病毒株Ck／HK／Yu22／02作为抗原，应用常规杂交瘤技术和血凝抑制实验筛选出抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的单抗8H5，单抗8H5经免疫荧光鉴定具有很好的H5特异性。选择33株2002～2006年不同地域，不同宿主中分离的不同遗传变异亚系的H5N1病毒代表株，对单抗8H5分别进行血凝抑制实验及中和试验分析，结果显示单抗8H5对所有H5亚型病毒均有较强反应，而对非H5亚型标准病毒株均不反应，说明8H5是一株广谱性抗H5特异性中和单抗，并提示单抗8H5的HA识别表位可能是一个相当保守的中和表位。并且单抗8H5双抗夹心系统的初步评价显示了其在诊断应用上的前景。; 罗海峰陈毅歆陈自敏郭永利王嘉张军陈鸿霖管轶夏宁邵; 关键词：禽流感病毒 H5N1 单克隆抗体血凝素

H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较被引量：4: 2007年; 利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA（Ag）Dot-ELISA（H5-Dot）”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测，结果：①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别，气管拭子的检出率最高，泄殖腔拭子次之，粪便拭子最低（P〈0．05），因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本；②陆禽标本检出率显著高于水禽标本（P〈0．05），对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80％（95％CI：70．6％～87．8％），对水禽气管拭子标本的检出率为38％（95％CI：26．9％～49．4％），可能与标本中病毒滴度高低有关；③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异。另外，H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99．4％（95％CI：97．9％～99．9％）。这些结果表明，H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法，在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值。; 陈毅歆罗海峰徐飞海葛胜祥陈自敏郭永利王嘉罗文新吴婷张军陈鸿霖管轶夏宁邵; 关键词：禽流感病毒 H5N1 血凝素拭子

高致病性禽流感病毒H5N1中和抗体的单链抗体构建与活性鉴定被引量：4: 2007年; 在本实验室研制出的多株针对H5N1血凝素的鼠单抗中,10F7对34株H5N1病毒株都有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强、识别谱广的特点。通过基因工程构建10F7单链抗体(scFv)表达重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化scFv,经血凝抑制实验及中和实验检测其活性。结果在针对3株病毒的血凝抑制实验中,10F7scFv蛋白对其中2株H5N1病毒均显示出结合活性,而对H9毒株没有反应。在针对7株H5N1病毒的中和实验中,10F7scFv对5株病毒具有较好的中和能力。H5N1广谱中和抗体10F7的单链抗体构建,为进一步研制针对H5N1禽流感病毒的治疗性抗体奠定了基础。; 方钟罗文新王明桥陈瑛炜张军陈鸿霖管轶夏宁邵; 关键词：单链抗体血凝抑制

一种A型流感病毒NP抗原快速检测试剂的建立被引量：10: 2008年; 目的建立一种适合现场检测需要的A型流感快速诊断试剂。方法以自制的抗A型流感（Flu A）病毒核蛋白（NP）单抗为原料，建立快速检测A型流感病毒的双抗体夹心酶免疫渗滤试验，并对其灵敏度和特异性进行了初步评价。结果该试剂对不同地区流行的各种亚型的A型流感病毒株均有较高的反应性，而对非Flu A病毒株无交叉反应。比较该试剂与BD公司的两种流感快速诊断试剂，发现该试剂对随机选取的3株Flu A病毒的检测分析灵敏度高出Directigen EZ FluA试剂5～125倍，对2株Flu A病毒的分析灵敏度高出Directigen Flu A试剂约20倍。另外，用该试剂对57份含漱液标本和170份动物拭子标本进行检测，结果显示：本试剂的灵敏度（〉85％）和特异性（〉95％）均优于当前主流的商品化A型流感快速诊断试剂。结论利用抗Flu A NP单抗为原料建立了A型流感快速诊断试剂，该试剂的应用无需任何专用仪器，操作简便快速，可满足现场检测需要。; 徐飞海王锐白佳伟齐先佳陈毅歆葛胜祥张军夏宁邵; 关键词：A型流感病毒核蛋白

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福建省科技重点项目(2005Y020)