国家重点基础研究发展计划(2013CB531301)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：许琪吴晓峰沈岩沙龙泽沙志强更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用GCaMP6f蛋白对小鼠伏隔核神经元活动的钙离子成像被引量：1
- 2016年
- 目的在小鼠伏隔核表达GCa MP6f蛋白,并在束缚状态下,应用钙成像技术实时监测小鼠伏隔核内活化的神经元。方法首先,包装并纯化aav-Syn1-GCa MP6f-P2A-Tomato病毒,并通过感染原代神经元验证目的蛋白的表达和功能。然后,通过脑立体定位技术注射aav-Syn1-GCa MP6f-P2A-Tomato病毒于小鼠伏隔核脑区,动物恢复21 d后,插入光纤,在其清醒状态下,给予束缚刺激,用钙成像技术实时记录伏隔核神经元的活化。结果表达GCa MP6f的原代神经元在给予谷氨酸刺激后,神经元被活化,Ca2+内流而产生绿色荧光;通过在体实验,给予小鼠束缚刺激,可在视野内检测到因伏隔核神经元活化而发出的绿色荧光信号;鼠脑切片同样可检测到位于胞质的绿色荧光信号与位于细胞核的病毒红色荧光标记共定位于相同细胞。结论 aav-Syn1-GCa MP6f-P2A-Tomato腺相关病毒可成功用于在体活化神经元的实时监测。通过在小鼠伏隔核定点注射该病毒,给予束缚刺激,应用钙成像技术可实时记录到小鼠伏隔核的活化神经元。
- 刘泽玥许琪
- 关键词：腺相关病毒伏隔核
- 生长相关蛋白-43在内侧颞叶癫痫小鼠模型海马中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的研究癫痫发生不同时期生长相关蛋白-43(GAP-43)及其磷酸化形式(p-GAP-43)在海马齿状回中表达的时空分布情况。方法构建海人酸(KA)诱导的内侧颞叶癫痫(MTLE)模型小鼠,采用免疫组织化学、Western blot技术检测GAP-43与p-GAP-43在模型鼠癫痫发生不同时期(5d,2、5周)海马齿状回中的表达变化。结果 GAP-43在正常对照鼠及模型鼠的齿状回、门区和海马内分子层均有较高表达。与对照组相比,p-GAP-43在KA诱导癫痫发作后的5d,2、5周3个时间点的表达水平逐步下降。结论活性形式磷酸化的GAP-43在齿状回颗粒细胞中的表达水平随着癫痫发作时间的推移逐步降低,可能与硬化海马的轴树突异常重组过程相关。
- 吴晓峰沙龙泽沙志强沈岩许琪
- 关键词：内侧颞叶癫痫生长相关蛋白-43海人酸海马齿状回
