国家自然科学基金(81260303)
- 作品数：10 被引量：33H指数：4
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- 相关机构：贵州医科大学贵阳医学院贵阳医学院附属医院更多>>
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- 胃泌素及胃泌素受体基因在胃癌和癌前病变组织中的表达被引量：3
- 2015年
- 目的:观察胃泌素(GAS)及胃泌素受体(CCK-BR)基因在胃癌和癌前病变组织中的表达,探讨GAS及CCK-BR与胃癌发生发展的关系。方法:收集行胃镜检查病人胃组织,根据病理学诊断分为慢性萎缩性胃炎组、肠上皮化生组、非典型性增生组及胃癌组,提取并纯化各组胃组织的总RNA,采用Taqman实时荧光定量PCR技术测定胃组织GAS及CCK-BR的表达,比较各类胃疾病胃组织中GAS和CCK-BR表达水平的差异。结果:GAS及其受体CCK-BR在所有患者胃组织中均有表达,在慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型性增生患者胃组织中GAS和CCK-BR的表达均高于胃癌患者(P<0.05),GAS为胃癌组患者的2.37、1.67及1.9倍,CCK-BR为胃癌组患者的1.62、3.66、1.33倍。结论:GAS和CCK-BR在胃癌组织中的表达低于癌前组织。
- 谢渊赵艳刘正美官志忠周建奖
- 关键词：胃泌素胃泌素受体
- Transgelin基因与胃癌及癌前病变的相关性研究
- 目的通过检测transgelin基因mRNA在慢性非萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生及胃癌组织中的表达.探讨transgelin基因与胃癌前病变及胃癌的关系。方法收集27例慢性非萎缩性胃炎、12例肠上皮化生、4例非典型...
- 潘科张人弘郑娟黄匀张丹丹蒙韬吴小艳赵艳
- 关键词：胃癌前病变TRANSGELIN实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 幽门螺杆菌临床菌株的分离培养和鉴定被引量：4
- 2016年
- 目的：建立一种幽门螺杆菌（H.pylori）临床菌株的分离培养的方法。方法：取临床胃黏膜组织标本88株,接种于10%绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上,37℃、5%O2、10%CO2、85%N2培养3-5 d后,挑取血平板上透明细小可疑菌落进行革兰氏染色和尿素酶试验,对阳性菌落进行扩大纯培养,提取细菌DNA,PCR扩增H.pylori 16sRNA、Cag A基因,电泳并进行测序鉴定。结果：成功从临床胃黏膜组织中分离培养出H.pylori,88例胃黏膜组织标本中分离培养并鉴定出H.pylori 19株,阳性率为22%;对16sRNA及Cag A基因进行扩增,电泳可见目的条带,并对16sRNA扩增产物测序,与H.pylori国际标准菌株26695比对,同源性为95%-99%。结论：37℃、5%O2、10%CO2、85%N2条件下10%绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上能成功分离培养出H.pylori临床株。
- 刘正美周建奖赵艳熊林龙妮娅谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌临床菌株革兰染色CAGA基因
- 胃泌素/CCK-B受体环在多种肿瘤中的表达被引量：2
- 2014年
- 目的:研究胃泌素(GAS)在多种肿瘤中的表达。方法:应用免疫组织化学检测由40例肿瘤组织组成(含87个点)的组织芯片中GAS的表达,同时检测临床相应的肿瘤组织和胃癌细胞SGC-7901、AGS、肺癌细胞A549、肝癌HepG2、乳腺癌细胞MCF-7中GAS和胃泌素受体(CCK-BR)的表达。结果:GAS主要表达于细胞质,组织芯片检测发现GAS在食管鳞状细胞癌、胃腺癌、结肠腺癌、肝细胞性肝癌、肺鳞状细胞癌、乳腺浸润性导管癌中表达;GAS在临床肿瘤标本胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌和胃癌细胞SGC-7901、AGS、肺癌细胞A549、肝癌细胞HepG2及乳腺癌细胞MCF-7中证实GAS阳性表达,同时发现CCK-BR也在胃癌、肝癌、肺癌和乳腺癌组织及SGC-7901、AGS、A549、HepG2、MCF-7细胞株中表达。结论:GAS和CCK-BR在消化道和非消化道肿瘤中表达,胃泌素/CCK-B受体环可能在胃癌、肺癌、肝癌及乳腺癌中起重要作用。
- 汪闯周建奖谢渊赵艳
- 关键词：胃泌素肿瘤免疫组织化学组织微阵列组织芯片技术
- 幽门螺杆菌对NLRP3炎症小体的活化作用被引量：1
- 2016年
- 目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染对NLRP3炎症小体相关蛋白的活化作用,探讨NLRP3炎症小体在H.pylori感染中的作用。方法培养H.pylori国际标准株NCTC11639,感染胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MKN-45,细菌数∶细胞数(感染复数)为100∶1和200∶1,于6 h和12 h收集细胞,提取总蛋白。Western blotting检测炎症小体中NLRP3及Caspase-1蛋白的表达水平,ELISA法检测细胞中IL-1β的含量。结果 H.pylori感染GES-1细胞后,NLRP3、Caspase-1以及IL-1β的表达随着感染复数的增加而增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);感染MKN-45细胞后,NLRP3的蛋白表达随着感染复数的增加而增加,而Caspase-1及IL-1β的表达随着感染复数的增加而降低,差异均有统计学意义(P<0.05);相同感染复数的H.pylori感染GES-1细胞和MKN-45细胞,6 h和12 h之间NLRP3、Caspase-1以及IL-1β的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 H.pylori感染在体外能活化GES-1细胞中NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3和Caspase-1,活化MKN-45细胞中NLRP3蛋白的表达,抑制Caspase-1蛋白的表达;促进上皮细胞GES-1中IL-1β炎症因子的表达,抑制肿瘤细胞MKN-45中IL-1β炎症因子的表达。
- 刘正美姜琼周建奖官志忠赵艳熊林谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌NLRP3CASPASE-1IL-1Β
- 幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠胃癌模型的建立及蛋白质组学研究被引量：11
- 2014年
- 目的：构建幽门螺杆菌（ helicobacter pylori， HP）长期感染的动物模型，寻找与胃癌相关的差异表达蛋白，进一步阐明HP致胃癌的病理机制。方法蒙古沙鼠共50只，雄性，出生4～5周，体质量60～100 g，通过HP长期感染蒙古沙鼠构建动物模型，选择感染后3、6、12及24个月处死沙鼠，取胃组织，进行HP培养，同时用 PCR 扩增HP 16s rRNA基因及组织切片银染法检查HP感染定植情况，病理检查其胃组织病理改变。提取胃组织蛋白进行双向电泳，选取随时间点其蛋白表达呈增加趋势的差异蛋白质斑点进行液相色谱－质谱联用质谱鉴定，并检测差异蛋白基因在人胃癌及淋巴结组织中的表达。结果幽门螺杆菌感染3个月HP开始定植在鼠的胃组织，一直持续到24个月。病理检查可见急性胃炎、萎缩性胃炎、肠上皮化生及胃癌病理表现。蛋白组学分析共得到78个差异蛋白质，其中上调蛋白质36个，下调蛋白质42个，质谱鉴定出10个差异表达的蛋白质，包括乳酸脱氢酶、ATP合成酶、脂肪酸结合蛋白、细胞色素氧化酶C、过氧化物还原酶－4、过氧化物还原酶、transgelin、琥珀酰CoA连接酶、角蛋白－8、二硫化物异构酶A2。其中 transgelin、ATP 合成酶、乳酸脱氢酶基因在人胃癌和淋巴结组织高表达。结论 HP感染可能通过上调 transgelin、ATP合成酶、乳酸脱氢酶等基因的表达参与胃相关疾病的发生发展。
- 赵艳谢渊陈娴徐文杰王妍周建奖
- 关键词：胃肿瘤蛋白质组学
- transgelin基因在幽门螺杆菌感染胃癌细胞及人胃癌组织中的表达被引量：3
- 2014年
- 目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染胃癌细胞及人胃癌、淋巴结组织中转凝蛋白基因（transgelin）的表达水平,探讨HP感染、transgelin基因与胃癌发生、发展的相关机制。方法用HP感染胃癌细胞系AGS和SGC-7901,同时收集胃癌患者手术切除的胃癌组织、切缘组织和淋巴结组织,提取及纯化总RNA。实时荧光定量PCR检测transgelin mRNA的表达水平,分析其与临床病理参数的关系。结果 transgelin mRNA在HP感染的AGS、SGC-7901细胞中的表达量增加,分别为对照细胞的11.39倍（t=30.025,P=0.000）、3.41倍（t=5.677,P=0.005）;transgelin mRNA在胃癌组织、淋巴结组织中的表达增加,分别是切缘组织的6.48倍（t=2.290,P=0.026）、2.64倍（t=2.043,P=0.046）;Ⅳ期胃癌组织transgelin mRNA表达量增加,是Ⅰ~Ⅱ期的2.32倍（t=2.111,P=0.049）;淋巴结转移组是无淋巴结转移组的2.93倍（t=2.123,P=0.043）。结论HP可上调transgelin基因的表达,transgelin基因可能参与胃癌的发生、发展,且与p TNM分期及淋巴结转移相关。
- 赵艳谢渊王文玲陈娴汪苏周建奖
- 关键词：胃癌幽门螺杆菌实时荧光定量聚合酶链反应
- 转凝蛋白基因与胃癌及癌前病变的相关性被引量：1
- 2016年
- 目的探讨转凝蛋白（transgelin）基因与胃癌前病变及胃癌的关系。、方法收集7例慢性非萎缩性胃炎、12例肠上皮化生、4例非典型增生及39例胃癌患者的胃组织，提取及纯化总RNA。采用实时荧光定量PCR测定transgelin mRNA的表达水平，分析其与临床病理参数的关系。结果transgelin mRNA在肠上皮化生、非典型增生及胃癌组织中的表达增加，分别是慢性非萎缩性胃炎组织的4．06倍、73．11倍、13．21倍（均P〈0．05）；IV期胃癌组织transgelin mRNA表达增加，是I～Ⅱ期的2．54倍；淋巴结转移患者胃癌组织transgelin mRNA是无淋巴结转移组的3．35倍（均P〈0．05）。结论transgelin基因可能与胃癌前病变的发生、发展有关，可能是胃癌发生过程中的促进因素。
- 潘科张人弘郑娟黄匀张丹丹蒙韬吴小艳赵艳
- 关键词：胃癌前病变
- 胃泌素/CCK-B受体环对多种肿瘤细胞生长和凋亡的影响被引量：5
- 2016年
- 目的探讨胃泌素/CCK-B受体环对肝癌、肺癌和乳腺癌细胞生长和凋亡的影响。方法用免疫细胞化学检测肺癌A549细胞、肝癌Hep G2细胞及乳腺癌MCF-7细胞系中胃泌素和CCK-B受体的表达。再用CCK-B受体拮抗剂丙谷胺(5 mmol/L)处理细胞(实验组),分别用MTT实验、流式细胞仪及分光光度法检测3种癌细胞的生长曲线、细胞凋亡及caspase-3的酶活性,对照组未用丙谷胺处理。结果肝癌Hep G2细胞、肺癌A549细胞和乳腺癌MCF-7细胞中胃泌素和CCK-B受体的表达均为阳性;与对照组比较,实验组细胞的生长被显著抑制,caspase-3酶活性和凋亡细胞百分数显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论胃泌素/CCK-B受体环参与肝癌、肺癌和乳腺癌细胞的生长和凋亡,阻断此环能抑制细胞的生长,促进细胞凋亡。
- 汪闯周建奖谢渊赵艳
- 关键词：胃泌素肿瘤细胞生长细胞凋亡
- 胃泌素对人胃癌细胞裸鼠移植瘤生长与转移潜能影响研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨胃泌素在胃癌细胞生长、侵袭和转移中的作用。方法构建过表达胃泌素的细胞模型,用裸鼠成瘤实验检测体内肿瘤形成;细胞伤愈和Transwell小室实验检测体外细胞侵袭和转移;蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases,MMP-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及分泌。结果过表达胃泌素的胃癌细胞,裸鼠体内成瘤率为100%(6/6),高于对照细胞50%(3/6)。接种后25d,移植瘤的体积和体质量分别为(0.980 9±0.626 0)cm3和(0.445 6±0.280 1)g,均高于对照细胞的(0.222 1±0.352 6)cm3和(0.128 0±0.201 4)g,P值分别为0.018和0.048。Transwell小室实验结果显示,过表达胃泌素和对照的SGC-7901细胞的迁移细胞数为(24±4)和(10±5)个/400倍视野,q=4.24,P<0.05;AGS细胞为(86±5)和(24±4)个/400倍视野,q=4.93,P<0.05。SGC-7901细胞的侵袭细胞数为(58±5)和(16±5)个/400倍视野,q=4.65,P<0.05;AGS细胞为(112±5)和(68±3)个/400倍视野,q=5.24,P<0.05。蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR和ELISA结果显示,与对照细胞比较,过表达胃泌素的SGC-7901细胞中MMP-2和VEGF蛋白相对表达量分别增加166%和190%,AGS细胞中分别增加50%和68%;SGC-7901细胞中MMP-2和VEGF mRNA的相对表达量分别上调20.82倍和98.61倍,AGS细胞中分别上调32.58倍和26.71倍;培养液中MMP-2和VEGF的含量也增加,差异均有统计学意义,P值均<0.05。加入丙谷胺后,胃泌素的促进作用被抑制。结论胃泌素能促进胃癌细胞体内外肿瘤生长、侵袭和转移,有可能成为阻断胃癌侵袭转移的新靶点。
- 曾怡姜琼周建奖谢渊赵艳
- 关键词：胃泌素肿瘤浸润
