深圳市科技计划项目(200405032)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- ITISC法获取基因修饰原代肝细胞的研究
- 2006年
- 目的以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为标记基因,探索一种高效获取基因修饰原代工程肝细胞(GMPEH)的新方法。方法W istar大鼠70%切肝建立肝再生模型,术后24 h肝隔离门静脉注射脂质体-质粒DNA复合物(lipofectam ine-pEGFP-N1 DNA comp lexes,lipop lexes)转绿色荧光蛋白(GFP)基因至肝细胞,对照组注射生理盐水(NS)。转染后15 d(分2组,每组5只:切肝并于门静脉注射lipop lexes组,L;切肝并于门静脉注射NS组,N)均以胶原酶消化、Percoll液梯离心法获取纯化肝细胞悬液;以NS组为对照并以GFP为荧光标记物,用流式细胞仪(FCM)分析实验组肝细胞的转染率。结果FCM分析L组的平均转染率(%)为(3.40±2.09)%。结论肝再生模型L ipop lex门静脉途径灌注转染,可获得稳定的EGFP表达率。ITISC法获取GMPEH是一种高效,可行的新方法。
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- 关键词：绿色荧光蛋白质类基因转移技术肝细胞
