国家自然科学基金(81301478)
- 作品数：9 被引量：21H指数：3
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- 肠道病毒71型感染诱导宿主细胞凋亡的研究进展被引量：2
- 2019年
- 肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)是一种具有潜在致命性和破坏性的嗜神经细胞病毒,可能是新型小儿麻痹症的致病因素,局灶性瘫痪与受累的脑干灰质或脊髓有关[1]。EV71感染引起的手足口病、疱疹和相关并发症的严重儿科病例和较高死亡病例在亚洲带来了巨大的公共卫生影响[2]。
- 邱丽红罗文英
- 关键词：肠道病毒71型宿主细胞凋亡EV71小儿麻痹症相关并发症致病因素
- RNAi技术对人脑微血管内皮细胞ANXA2基因表达水平的影响
- 2016年
- 目的研究RNAi技术对人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular cells,HBMEC)ANXA2基因表达水平的影响。方法将化学合成三对siRNA采用ribo FECT^(TM)CP转染试剂介导法转染HBMEC,应用荧光定量PCR法检测RNA干扰后ANXA2 mRNA表达量,得出抑制率。应用Western-blot检测RNA干扰后对ANXA2蛋白表达的影响。结果成功将siRNA转染HBMEC,荧光定量PCR结果显示,在转染24 h后,各干扰组与阴性组比较ANXA2基因表达量明显下调(P<0.01),Western-blot显示siRNA-ANXA2-2、siRNA-ANXA2-3转染前后ANXA2蛋白的表达水平明显受到抑制。结论合成的ANXA2 siRNA能有效抑制ANXA2蛋白的表达、降低ANXA2 mRNA水平,对ANXA2有高效和特异的沉默作用,以ANXA2为靶点的RNA干扰技术可望成为鉴定HBMEC有关EV71膜受体的新策略。
- 罗文英丁瑜钟琼
- 关键词：RNAIEV71
- 880株念珠菌的临床分布特征及药敏结果分析被引量：1
- 2014年
- 目的了解2012年1月—2013年12月本院念珠菌感染状况和药敏情况。方法临床标本经接种培养,开放性部位标本若培养出以念珠菌为优势菌株和无菌部位标本培养出念珠菌均进一步进行纯培养及药敏试验。结果 880例念珠菌以白色念珠菌为主要致病菌,其次为光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌;主要来源于老年人群,不同年龄人群念珠菌分布具有明显差异(P<0.01);男性多于女性;以痰标本最多,尿液其次,胃液最少,不同标本来源分布具有明显差异(P<0.01);念珠菌感染主要来自于心脑血管、肺部疾病患者,不同临床诊断类型的念珠菌感染具有明显差异(P<0.01);不同念珠菌对氟康唑、伏立康唑的敏感性具有统计学差异(P<0.05),以光滑念珠菌、热带念珠菌对氟康唑、伏立康唑耐药率最高。结论白色念珠菌为本院念珠菌感染最为常见菌株,光滑念珠菌次之,在治疗心脑血管患者、老年患者,要警惕发生念珠菌等二重感染,一旦发生,要根据念珠菌药敏试验合理用药。
- 罗文英吴显劲罗虹烈林湛
- 关键词：念珠菌药敏试验耐药
- 2012～2014年尿液标本病原菌的分布特征及耐药性分析被引量：6
- 2015年
- 目的探讨该院尿路感染患者的临床分布和耐药性特征,为临床诊治尿路感染提供参考依据。方法收集2012-2014年该院住院或门诊患者的尿液标本中分离培养获得的菌株数据进行统计分析。结果该院尿路感染患者不同年份男女性别比较差异有统计学意义（P〈0.05）。以泌尿外科、肾病内科、神经内科、颅脑外科居多,致病菌主要以革兰阴性菌为主,分离菌以大肠埃希菌居首位。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物厄他培南、亚胺培南的耐药率最低,其耐药率为0.0%-25.9%,但在2014年耐药率相对于前2年均有升高表现。有些致病菌在2014年的耐药率低于2012、2013年。结论该院尿路感染患者呈逐年递增趋势,每年感染菌株种类有所不同,开展耐药机制研究对临床合理、规范用药及防治泛耐药或全耐药菌株很有帮助。
- 罗文英吴显劲麦奇林湛许蓝月
- 关键词：尿路感染细菌培养耐药
- 肠道病毒71型能诱导THP-1巨噬细胞的自噬和凋亡被引量：1
- 2020年
- 目的探讨肠道病毒71型(EV71)诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡及其相关信号通路。方法设置EV71处理组和DMEM对照组,EV71处理组是用感染复数0.1感染THP-1巨噬细胞2、8和16 h,对照组是用DMEM培养基作为阴性对照即是0 h组。CCK-8检测EV71对THP-1巨噬细胞增殖和毒性的影响;荧光定量PCR法检测EV71在细胞内病毒核酸变化情况;透射电镜观察THP-1巨噬细胞内超微结构变化;Hoechst 33342染色法和AnnexinV/PI双染法检测EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡的情况;免疫印迹法分析EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡相关蛋白水平的变化;用3-MA和Ac-DEVD-CHO抑制剂分别检测EV71对THP-1巨噬细胞自噬和凋亡的影响。结果EV71作用THP-1巨噬细胞2、8和16h的细胞存活率逐渐下降(P<0.05);细胞内病毒核酸拷贝数逐渐增多(P<0.01);可见细胞内自噬小体和病毒颗粒;总细胞凋亡率逐渐增加(P<0.01);与对照组比较,EV71处理组LC3转化量(LC3-II/LC3-I)逐渐增多,而p62蛋白逐渐减少,cleaved caspase 3蛋白增多,Bcl-2和caspase-3蛋白减少(P<0.01),而cleaved caspase-8无差异(P>0.05);与PBS对比,在8 h时3-MA明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬,LC3-II/LC3-I比值减少,而p62蛋白增多(P<0.01);与DMSO对比,Ac-DEVD-CHO明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡,凋亡率分别为15.5%和7.7%(P<0.01)。结论EV71能感染THP-1巨噬细胞并在其中复制,且能诱导自噬和凋亡,其可能与激活LC3/p62自噬途径和caspase凋亡途径有关。
- 罗文英杨拉维潘庆军邱丽红
- 关键词：肠道病毒71型THP-1巨噬细胞自噬凋亡
- 肠道病毒71型感染人脑微血管内皮细胞的初步研究被引量：6
- 2014年
- 目的 初步探讨肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）穿血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）的相关机制.方法 用人脑微血管内皮细胞（human brain microvascular endothelial cells,HBMECs）建立体外BBB模型,采用EV71毒株感染HBMECs,并设置阴性对照.通过形态学观察、免疫荧光、透射电镜及实时荧光定量PCR方法探讨EV71能否感染HBMECs,激光共聚焦方法观察EV71能否诱导HBMECs微丝骨架的重排.结果 EV71感染后能诱导HBMECs的细胞病变,细胞内可见EV71抗原红色荧光表达及直径为20～30 nm的EV71颗粒存在,实时荧光定量PCR方法证实EV71能在HBMECs内复制,不同时间水平差异有统计学意义（P＜0.01）.细胞感染EV71后失去正常形态,变得极不规则,胞内微丝排列紊乱,极性消失,微丝聚集在细胞边缘.结论 本研究首次证明EV71可以感染HBMECs并复制,并且可以诱导部分HBMECs的骨架重排.
- 罗文英赵卫彭亮余晶仪张立科张文炳曹虹
- 关键词：肠道病毒71型血脑屏障人脑微血管内皮细胞细胞骨架
- 95株致泌尿道感染大肠埃希菌耐药性及耐药基因表型分析被引量：3
- 2016年
- 目的了解广东医科大学附属医院泌尿系感染患者大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶型（ESBLs）基因型特征和临床耐药情况。方法收集2015年1~10月该院住院或门诊患者的泌尿系感染患者尿液标本中分离培养获得的大肠埃希菌菌株,双纸片协同试验确定产ESBLs大肠埃希菌,PCR扩增技术进行基因分型。结果 95株大肠埃希菌以CTX-M-14型46例最多;TEM型32例;SHV型30例;CTX-M-1型26例;OXA-1型7例;OXA-2型4例;OXA-10型3例。ESBLs阴性菌株TEM型仅5例阳性,其余基因型别为阴性。ESBLs阳性株对多种抗菌药物的耐药率（碳青霉烯类除外）明显高于ESBLs阴性株,而CTX-M-14、CTX-M-1、TEM、SHV四种基因型别大肠埃希菌对18种抗菌药物的耐药性之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论广东医科大学附属医院泌尿系感染患者产ESBLs大肠埃希菌以CTXM型为主,对常用抗菌药物耐药率高于ESBLs阴性菌株。不同基因型别产ESBLs大肠埃希菌对抗菌药物耐药率没有明显差异。
- 罗文英丁瑜林湛许蓝月
- 关键词：大肠埃希菌超广谱Β-内酰胺酶
- 黏液型与非黏液型铜绿假单胞菌的比较蛋白组学分析被引量：2
- 2017年
- 目的探讨黏液型与非黏液型铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.a)的差异蛋白谱,以发现黏液型P.a潜在的生物标志物。方法采用来自于临床囊性纤维化患者分离的3株黏液型P.a菌株,脉冲场凝胶电泳以确定它们的同源性;采用同位素相对和绝对定量标记(isobaric tags for relative and absolute quantitation,i TRAQ)结合二维液相色谱串联质谱(two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry,2D LC-MS/MS)技术分析3株黏液型与对照组1株非黏液型P.a的差异蛋白谱,并采用RT-q PCR方法对5个共同差异蛋白进行验证。结果 3株黏液型P.a菌株不具有同源性,i TRAQ结果没有明显差异。3组共有219个上调和101个下调差异蛋白。pa2815、pa2018、dnak、pa5046和acef基因转录水平与i TRAQ结果一致。结论不同黏液表型P.a的i TRAQ结果没有明显差异,219个上调和101个下调差异蛋白可以作为研究黏液型与非黏液型P.a致病机制的候选生物标志物。
- 罗文英刘建军丁瑜杨拉维任晓虎
- 关键词：铜绿假单胞菌生物标志物蛋白质组学
- 肠道病毒71型诱导人脑微血管内皮细胞的凋亡被引量：2
- 2014年
- 目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)诱导人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMECs)的凋亡及其相关机制。方法流式细胞仪检测EV71能否诱导HBMECs的凋亡;免疫荧光方法观察EV71诱导HBMECs线粒体膜电位的改变情况;免疫印迹检测DJ-1蛋白在EV71感染HBMECs不同时间点的表达;酶联免疫方法检测EV71感染HBMECs不同时间点TNF-α、IL-10、IL-4的分泌情况。结果 EV71感染HBMECs不同时间点的HBMECs的早期凋亡数与晚期凋亡、坏死细胞数具有显著差异(P<0.01);随着感染时间延长,HBMECs早期凋亡数与晚期凋亡、坏死细胞数均有所增加,但以晚期凋亡、坏死细胞数增加更明显(P<0.01)。与对照组相比,EV71感染HBMECs8 h线粒体膜电位明显降低(P<0.01);EV71感染HBMECs 16、24 h,DJ-1表达增强(P<0.05)。EV71感染HBMECs不同时间点TNF-α、IL-10、IL-4的浓度具有明显差异(P<0.01)。结论 EV71能诱导HBMECs的凋亡以及改变线粒体膜通透性,EV71还能诱导HBMECs中DJ-1的表达改变和TNF-α、IL-10、IL-4的分泌改变。
- 罗文英吴显劲彭亮何肖龙张立科张文炳曹虹
- 关键词：肠道病毒71型人脑微血管内皮细胞凋亡DJ-1细胞因子
