国家自然科学基金(31101202)
- 作品数：13 被引量：28H指数：4
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- 深山含笑大、小孢子发生和雌、雄配子体发育研究被引量：4
- 2018年
- 采用石蜡切片技术对深山含笑大、小孢子的发生和雌、雄配子体发育进行观察:深山含笑花药4室,花药囊壁由5-7层细胞构成,腺质绒毡层,小孢子胞质分裂为修饰性同时型,四分体有四面体型、对称型,偶有交叉型,成熟花粉为2细胞型;胚珠倒生、双珠被、厚珠心,大孢子四分体直线型排列,合点端为功能大孢子、雌配子体发育方式为蓼型。从雌、雄配子体发育时间的先后来看,深山含笑春季雌、雄配子体能正常发育,雄蕊先熟,雄蕊和花瓣凋谢后雌蕊大孢子母细胞才形成。而秋季开花的深山含笑,花药中小孢子在孢原细胞或初生造孢细胞期停止发育,花粉败育;雌蕊胚珠珠心组织也未见大孢子母细胞发育,开花后雌蕊随花柄凋落。该研究为深山含笑生殖发育和杂交育种积累了资料。
- 熊海燕刘志雄
- 关键词：深山含笑小孢子发生雄配子体发育
- 重瓣榆叶梅PrtSHP的基因克隆与序列结构分析
- 2012年
- 采用同源克隆法结合3′-RACE技术从重瓣榆叶梅(Prunus triloba var.Plena)中分离得到了1个雌蕊和果实发育调控基因SHP的同源基因PrtSHP的全长cDNA(GenBank登录号:JF911701)。其cDNA全长970 bp,包括1个编码244个氨基酸的735 bp的完整开放阅读框。蛋白质序列比对和分子系统发生分析表明,PrtSHP是拟南芥的SHP的同源基因,其编码的蛋白质的C末端结构域具有2个高度保守的模体(AG I模体和AG II模体),属C类转录因子中PLE进化系。
- 刘志雄于先泥
- 关键词：VAR.基因克隆
- 甜荞半胱氨酸蛋白酶FaRDL基因的克隆和序列结构分析被引量：3
- 2013年
- 同源克隆结合RACE(Ropid amplification of cDNA ends)技术,从甜荞(Fagopyrum esculentum)花芽中克隆到了半胱氨酸蛋白酶FaRDL基因cDNA序列(GenBank登录号为JN605352)。结果表明,其cDNA全长1 298 bp,包括1个编码362个氨基酸共1 089 bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF)。其蛋白与拟南芥中木瓜蛋白酶GCP1的同源性最高,属半胱氨酸蛋白酶家族中的木瓜蛋白酶亚家族,有1个由22个氨基酸残基组成的信号肽、1个由100个氨基酸残基组成的前体肽和1个由Cys149-His285-Asn305木瓜蛋白酶家族保守的催化三联体活性位点。
- 方正武景雄刘志雄
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶克隆
- 甜荞木瓜类半胱氨酸蛋白酶基因FeRD21的克隆与表达分析（英文）被引量：3
- 2015年
- 该研究以旱区小杂粮作物甜荞(Fagopyrum esculentum)为材料,采用同源克隆、RACE技术和实时荧光定量RT-PCR方法,对其半胱氨酸蛋白酶基因(FeRD21)进行了分离和表达分析。结果表明:(1)FeRD21基因cDNA全长1 750bp,包含1个1 407bp的完整开放阅读框,编码468个氨基酸。(2)蛋白序列比对发现,甜荞FeRD21全酶包括信号肽、N末端自主抑制前体区域、蛋白酶、脯氨酸富含结构域和C末端颗粒体蛋白结构域,同时,其蛋白酶结构域包含1个木瓜类蛋白酶家族保守的催化三连体活性位点:Cys168-His304-Asn324。(3)分子系统发生分析证实,其与拟南芥的RD21一致性最高,属类RD21半胱氨酸蛋白酶类。(4)基因表达分析表明,FeRD21能被干旱、高盐、ABA和衰老胁迫诱导。
- 方正武李来运李晓方刘志雄
- 关键词：非生物胁迫甜荞
- 甜荞FaeseuFUL基因的克隆和序列结构分析
- 2015年
- 利用基因同源克隆技术结合3’RACE和5’RACE基因克隆技术,从甜荞(Fagopyrum esculentum)花芽中克隆到1个与花序分生组织发育和果实发育等过程中起到重要作用的euFUL基因的同源基因FaeseuFUL(GenBank登录号为KM386626)。序列分析表明,其cDNA全长1060bp,包括38bp的5’-UTR、1个编码231个氨基酸的696bp的完整开放阅读框以及326bp的3’-UTR。蛋白质分子序列比对和分子系统进化分析表明,FaeseuFUL基因是MIKC-type MADS-box基因,属于AP1/SQUA亚家族的euFUL进化系,与拟南芥的AGL8/FUL的同源基因相似性达到81.4%,其编码区的C末端含有euFUL进化系的FUL基序和paleoAP1基序。
- 齐蕊刘志雄
- 蕙兰CyfaSTK基因的克隆与表达分析被引量：4
- 2019年
- 采用同源克隆的方法,从蕙兰( Cymbidium faberi Rolfe)花芽中克隆获得 CyfaSTK 基因的cDNA序列,并对其进行生物信息学分析及基因表达分析。结果显示,该基因全长843 bp,其中开放阅读框(ORF)长 705 bp ,共编码234个氨基酸和1个终止密码子。同源蛋白序列比对及分子系统发育分析结果表明,CyfaSTK蛋白属于D类MADS-box转录因子STK-like进化系,含有MADS、I、K和C等4个结构域,其C末端转录激活区含有2个保守的基元:AG motif Ⅰ和AG motif Ⅱ,此外,还具有一个在天门冬目植物中相对保守的基元MD motif。基因表达的组织特异性分析结果显示:蕙兰 CyfaSTK 基因在花萼、花瓣、唇瓣、药帽、子房中均有表达,但在叶片中不表达,其中在子房中的表达量与其他组织相比,差异达到极显著水平;CyfaSTK 在花芽经过休眠后的萌动期表达量最高,且在开花当天该基因表达量有上升趋势。研究结果表明 CyfaSTK 基因不仅参与调控蕙兰花器官的发育过程,且对子房及合蕊柱的正常发育具有重要作用。
- 费越夏胜应熊海燕刘志雄
- 关键词：蕙兰花发育MADS-BOX基因
- 甜荞花同源异型基因FeMADS1的克隆和序列结构分析被引量：4
- 2015年
- 采用同源克隆方法,并结合RACE技术,从甜荞花芽分离得到1个A类MADS-box基因FeMADS1的cDNA全长,GenBank登录号为KM386627,其cDNA全长1 107bp,包括1个编码234个氨基酸、长为705bp的开放阅读框。序列同源比对和分子系统发生分析表明,其蛋白与拟南芥AGL8(FUL)的相似性最高,属A类MADS-box基因亚家族中的euFUL进化系,含MADS、I、K和C末端4个明显的结构域,并且K结构域包含K1、K2和K3共3个保守的富含疏水氨基酸残基的亚结构域,C末端结构域含FUL型基因2个特有的模体:FUL motif和paleoAP1motfi。
- 方正武刘志雄
- 关键词：甜荞MADS-BOX基因花发育
- 日本晚樱PrseSHP基因的克隆与功能分析被引量：2
- 2015年
- 采用同源克隆方法结合RACE技术,从日本晚樱（Prunus lannesiana）品种‘大岛樱’中克隆到花发育调控相关的PrseSHP基因（GenBank登录号为GU362645）。PrseSHP基因序列全长1 223bp,包含1个长741bp的完整开放阅读框,编码246个氨基酸和1个终止密码子。分子系统发生分析表明,PrseSHP属MADS-box转录因子的PLE/SHP进化系,并与蔷薇科植物的SHP同源蛋白聚于同一进化分支;蛋白序列比对显示,该转录因子拥有M、I、K和C共4个结构域,且其C末端结构域中包含高度保守的AGⅠ和Ⅱ基序。基因表达分析表明,PrseSHP基因主要在‘大岛樱’的花瓣、雄蕊、雌蕊和幼果等器官中表达,在花萼中仅能检测到微弱的转录信号,在幼叶中不表达,与其他植物SHP同源基因的表达模式有一定的差别。功能分析显示,转PrseSHP基因拟南芥植株明显比野生型拟南芥弱小,转基因拟南芥在6~8片莲座叶后即抽薹开花,时间较野生型拟南芥（14~17片莲座叶后抽薹开花）明显提前,证明异位表达的PrseSHP基因能促进拟南芥早花,其在花发育过程中可能参与调控植物开花。
- 刘志雄李来运李凤兰
- 关键词：日本晚樱花发育MADS-BOX
- 应用最大熵模型预测我国野生蕙兰潜在适生区分布及其影响因素
- 2023年
- 为了加强对蕙兰自然种群的保护,分析在未来气候变化条件下,野生蕙兰适生区的分布范围及影响因素,对蕙兰自然种群的保育工作具有重要意义。以野生蕙兰379个分布点的数据为数据源,借助MaxEnt模型和ArcGIS平台,以SSP2-4.5为温室气体排放模式,对当前和未来58 a我国野生蕙兰潜在适生分布区进行预测和分析,筛选影响野生蕙兰分布和迁移的主要环境因子。结果表明:(1)当前野生蕙兰的适生区面积为282.132×10^(4)km^(2),主要分布在(22°~40°N,95°~122.4°E)的区域。(2)最干季度均温、气温季节性变动系数、最干季度降水量是影响野生蕙兰分布和迁移的主要限制性气候因子,在最干季度均温达到10℃、气温变动系数标准差为800、最干季度降水量达到200 mm时,野生蕙兰出现的概率最大;土壤密度、土壤pH、海拔和坡度是影响野生蕙兰小尺度区域生长分布的关键因子,野生蕙兰适宜生长的土壤密度为1.7~1.8 g/cm^(3)、土壤pH为5.4~6.0,坡度15°~35°。(3)在气候变暖的情境下,野生蕙兰适生区总面积将增加到297.4×10^(4)km^(2),整体向高纬度、高经度的区域迁移,分布质心由(111°52′11.82″N,29°3′24.50″E)逐渐迁移至(112°5′38.03″N,29°48′36.83″E)。
- 焦鑫宇龙梅刘志雄
- 关键词：气候变暖
- 日本晚樱同源异型基因PrseAP3的克隆及其在单瓣与重瓣花中的表达分析被引量：6
- 2012年
- 用同源克隆的方法和3′RACE技术,从日本晚樱(Prunus lannesiana)中分离得到了1个AP3同源基因PrseAP3的cDNA全长,GenBank登录号为JF710371。其cDNA全长977bp,包括1个编码235个氨基酸共708bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明,PrseAP3是拟南芥的AP3同源基因,其蛋白质的C末端具有2个保守基元:PI-derived模体和paleoAP3模体,属B类转录因子中paleoAP3进化系。半定量RT-PCR分析表明,PrseAP3主要在单瓣日本晚樱品种大岛的萼片、花瓣和雄蕊中表达;在重瓣品种一叶的花瓣、雄蕊和叶化心皮中表达。其表达组织特异性在2个品种间表现出明显的差异,并与拟南芥的AP3基因有一定的差别。
- 刘志雄于先泥
- 关键词：日本晚樱同源克隆半定量RT-PCR
