国家自然科学基金(31101202)
- 作品数：13 被引量：30H指数：4
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- 深山含笑大、小孢子发生和雌、雄配子体发育研究被引量：4
- 2018年
- 采用石蜡切片技术对深山含笑大、小孢子的发生和雌、雄配子体发育进行观察:深山含笑花药4室,花药囊壁由5-7层细胞构成,腺质绒毡层,小孢子胞质分裂为修饰性同时型,四分体有四面体型、对称型,偶有交叉型,成熟花粉为2细胞型;胚珠倒生、双珠被、厚珠心,大孢子四分体直线型排列,合点端为功能大孢子、雌配子体发育方式为蓼型。从雌、雄配子体发育时间的先后来看,深山含笑春季雌、雄配子体能正常发育,雄蕊先熟,雄蕊和花瓣凋谢后雌蕊大孢子母细胞才形成。而秋季开花的深山含笑,花药中小孢子在孢原细胞或初生造孢细胞期停止发育,花粉败育;雌蕊胚珠珠心组织也未见大孢子母细胞发育,开花后雌蕊随花柄凋落。该研究为深山含笑生殖发育和杂交育种积累了资料。
- 熊海燕刘志雄
- 关键词：深山含笑小孢子发生雄配子体发育
- 重瓣榆叶梅PrtSHP的基因克隆与序列结构分析
- 2012年
- 采用同源克隆法结合3′-RACE技术从重瓣榆叶梅(Prunus triloba var.Plena)中分离得到了1个雌蕊和果实发育调控基因SHP的同源基因PrtSHP的全长cDNA(GenBank登录号:JF911701)。其cDNA全长970 bp,包括1个编码244个氨基酸的735 bp的完整开放阅读框。蛋白质序列比对和分子系统发生分析表明,PrtSHP是拟南芥的SHP的同源基因,其编码的蛋白质的C末端结构域具有2个高度保守的模体(AG I模体和AG II模体),属C类转录因子中PLE进化系。
- 刘志雄于先泥
- 关键词：VAR.基因克隆
- 甜荞半胱氨酸蛋白酶FaRDL基因的克隆和序列结构分析被引量：3
- 2013年
- 同源克隆结合RACE(Ropid amplification of cDNA ends)技术,从甜荞(Fagopyrum esculentum)花芽中克隆到了半胱氨酸蛋白酶FaRDL基因cDNA序列(GenBank登录号为JN605352)。结果表明,其cDNA全长1 298 bp,包括1个编码362个氨基酸共1 089 bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF)。其蛋白与拟南芥中木瓜蛋白酶GCP1的同源性最高,属半胱氨酸蛋白酶家族中的木瓜蛋白酶亚家族,有1个由22个氨基酸残基组成的信号肽、1个由100个氨基酸残基组成的前体肽和1个由Cys149-His285-Asn305木瓜蛋白酶家族保守的催化三联体活性位点。
- 方正武景雄刘志雄
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶克隆
- 甜荞木瓜类半胱氨酸蛋白酶基因FeRD21的克隆与表达分析（英文）被引量：3
- 2015年
- 该研究以旱区小杂粮作物甜荞(Fagopyrum esculentum)为材料,采用同源克隆、RACE技术和实时荧光定量RT-PCR方法,对其半胱氨酸蛋白酶基因(FeRD21)进行了分离和表达分析。结果表明:(1)FeRD21基因cDNA全长1 750bp,包含1个1 407bp的完整开放阅读框,编码468个氨基酸。(2)蛋白序列比对发现,甜荞FeRD21全酶包括信号肽、N末端自主抑制前体区域、蛋白酶、脯氨酸富含结构域和C末端颗粒体蛋白结构域,同时,其蛋白酶结构域包含1个木瓜类蛋白酶家族保守的催化三连体活性位点:Cys168-His304-Asn324。(3)分子系统发生分析证实,其与拟南芥的RD21一致性最高,属类RD21半胱氨酸蛋白酶类。(4)基因表达分析表明,FeRD21能被干旱、高盐、ABA和衰老胁迫诱导。
- 方正武李来运李晓方刘志雄
- 关键词：非生物胁迫甜荞
- 甜荞FaeseuFUL基因的克隆和序列结构分析
- 2015年
- 利用基因同源克隆技术结合3’RACE和5’RACE基因克隆技术,从甜荞(Fagopyrum esculentum)花芽中克隆到1个与花序分生组织发育和果实发育等过程中起到重要作用的euFUL基因的同源基因FaeseuFUL(GenBank登录号为KM386626)。序列分析表明,其cDNA全长1060bp,包括38bp的5’-UTR、1个编码231个氨基酸的696bp的完整开放阅读框以及326bp的3’-UTR。蛋白质分子序列比对和分子系统进化分析表明,FaeseuFUL基因是MIKC-type MADS-box基因,属于AP1/SQUA亚家族的euFUL进化系,与拟南芥的AGL8/FUL的同源基因相似性达到81.4%,其编码区的C末端含有euFUL进化系的FUL基序和paleoAP1基序。
- 齐蕊刘志雄
- 蕙兰CyfaSTK基因的克隆与表达分析被引量：5
- 2019年
- 采用同源克隆的方法,从蕙兰( Cymbidium faberi Rolfe)花芽中克隆获得 CyfaSTK 基因的cDNA序列,并对其进行生物信息学分析及基因表达分析。结果显示,该基因全长843 bp,其中开放阅读框(ORF)长 705 bp ,共编码234个氨基酸和1个终止密码子。同源蛋白序列比对及分子系统发育分析结果表明,CyfaSTK蛋白属于D类MADS-box转录因子STK-like进化系,含有MADS、I、K和C等4个结构域,其C末端转录激活区含有2个保守的基元:AG motif Ⅰ和AG motif Ⅱ,此外,还具有一个在天门冬目植物中相对保守的基元MD motif。基因表达的组织特异性分析结果显示:蕙兰 CyfaSTK 基因在花萼、花瓣、唇瓣、药帽、子房中均有表达,但在叶片中不表达,其中在子房中的表达量与其他组织相比,差异达到极显著水平;CyfaSTK 在花芽经过休眠后的萌动期表达量最高,且在开花当天该基因表达量有上升趋势。研究结果表明 CyfaSTK 基因不仅参与调控蕙兰花器官的发育过程,且对子房及合蕊柱的正常发育具有重要作用。
- 费越夏胜应熊海燕刘志雄
- 关键词：蕙兰花发育MADS-BOX基因
- 甜荞花同源异型基因FeMADS1的克隆和序列结构分析被引量：4
- 2015年
- 采用同源克隆方法,并结合RACE技术,从甜荞花芽分离得到1个A类MADS-box基因FeMADS1的cDNA全长,GenBank登录号为KM386627,其cDNA全长1 107bp,包括1个编码234个氨基酸、长为705bp的开放阅读框。序列同源比对和分子系统发生分析表明,其蛋白与拟南芥AGL8(FUL)的相似性最高,属A类MADS-box基因亚家族中的euFUL进化系,含MADS、I、K和C末端4个明显的结构域,并且K结构域包含K1、K2和K3共3个保守的富含疏水氨基酸残基的亚结构域,C末端结构域含FUL型基因2个特有的模体:FUL motif和paleoAP1motfi。
- 方正武刘志雄
- 关键词：甜荞MADS-BOX基因花发育
- 日本晚樱PrseSHP基因的克隆与功能分析被引量：2
- 2015年
- 采用同源克隆方法结合RACE技术,从日本晚樱（Prunus lannesiana）品种‘大岛樱’中克隆到花发育调控相关的PrseSHP基因（GenBank登录号为GU362645）。PrseSHP基因序列全长1 223bp,包含1个长741bp的完整开放阅读框,编码246个氨基酸和1个终止密码子。分子系统发生分析表明,PrseSHP属MADS-box转录因子的PLE/SHP进化系,并与蔷薇科植物的SHP同源蛋白聚于同一进化分支;蛋白序列比对显示,该转录因子拥有M、I、K和C共4个结构域,且其C末端结构域中包含高度保守的AGⅠ和Ⅱ基序。基因表达分析表明,PrseSHP基因主要在‘大岛樱’的花瓣、雄蕊、雌蕊和幼果等器官中表达,在花萼中仅能检测到微弱的转录信号,在幼叶中不表达,与其他植物SHP同源基因的表达模式有一定的差别。功能分析显示,转PrseSHP基因拟南芥植株明显比野生型拟南芥弱小,转基因拟南芥在6~8片莲座叶后即抽薹开花,时间较野生型拟南芥（14~17片莲座叶后抽薹开花）明显提前,证明异位表达的PrseSHP基因能促进拟南芥早花,其在花发育过程中可能参与调控植物开花。
- 刘志雄李来运李凤兰
- 关键词：日本晚樱花发育MADS-BOX
- 应用最大熵模型预测我国野生蕙兰潜在适生区分布及其影响因素被引量：1
- 2023年
- 为了加强对蕙兰自然种群的保护,分析在未来气候变化条件下,野生蕙兰适生区的分布范围及影响因素,对蕙兰自然种群的保育工作具有重要意义。以野生蕙兰379个分布点的数据为数据源,借助MaxEnt模型和ArcGIS平台,以SSP2-4.5为温室气体排放模式,对当前和未来58 a我国野生蕙兰潜在适生分布区进行预测和分析,筛选影响野生蕙兰分布和迁移的主要环境因子。结果表明:(1)当前野生蕙兰的适生区面积为282.132×10^(4)km^(2),主要分布在(22°~40°N,95°~122.4°E)的区域。(2)最干季度均温、气温季节性变动系数、最干季度降水量是影响野生蕙兰分布和迁移的主要限制性气候因子,在最干季度均温达到10℃、气温变动系数标准差为800、最干季度降水量达到200 mm时,野生蕙兰出现的概率最大;土壤密度、土壤pH、海拔和坡度是影响野生蕙兰小尺度区域生长分布的关键因子,野生蕙兰适宜生长的土壤密度为1.7~1.8 g/cm^(3)、土壤pH为5.4~6.0,坡度15°~35°。(3)在气候变暖的情境下,野生蕙兰适生区总面积将增加到297.4×10^(4)km^(2),整体向高纬度、高经度的区域迁移,分布质心由(111°52′11.82″N,29°3′24.50″E)逐渐迁移至(112°5′38.03″N,29°48′36.83″E)。
- 焦鑫宇龙梅刘志雄
- 关键词：气候变暖
- 日本晚樱同源异型基因PrseAP3的克隆及其在单瓣与重瓣花中的表达分析被引量：7
- 2012年
- 用同源克隆的方法和3′RACE技术,从日本晚樱(Prunus lannesiana)中分离得到了1个AP3同源基因PrseAP3的cDNA全长,GenBank登录号为JF710371。其cDNA全长977bp,包括1个编码235个氨基酸共708bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明,PrseAP3是拟南芥的AP3同源基因,其蛋白质的C末端具有2个保守基元:PI-derived模体和paleoAP3模体,属B类转录因子中paleoAP3进化系。半定量RT-PCR分析表明,PrseAP3主要在单瓣日本晚樱品种大岛的萼片、花瓣和雄蕊中表达;在重瓣品种一叶的花瓣、雄蕊和叶化心皮中表达。其表达组织特异性在2个品种间表现出明显的差异,并与拟南芥的AP3基因有一定的差别。
- 刘志雄于先泥
- 关键词：日本晚樱同源克隆半定量RT-PCR
