国家自然科学基金(31101254) 作品数:18 被引量:68 H指数:6 相关作者: 刘冬梅 吴晖 黄娟 李理 肖性龙 更多>> 相关机构: 华南理工大学 浙江大学 深圳市大百汇技术有限公司 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 环境科学与工程 更多>>
益生菌发酵技术及其在保健品应用中的研究 益生菌是一类通过改善肠道菌群平衡,对食用者的身体健康及生理功能产生有益作用的活性微生物。随着人们生活水平的提高,益生菌产品逐渐成为全球最大的功能性食品市场,发酵制品及益生菌保健品作为益生菌产品的主要载体也日渐出现在人们的... 赵珊 黄燕燕 刘冬梅关键词:益生菌 发酵技术 文献传递 响应面法优化多汁乳菇多糖提取工艺及抗氧化活性研究 被引量:7 2017年 本文意在优化多汁乳菇多糖的提取工艺,探讨多汁乳菇多糖抗氧化活性。本文以浸提温度、浸提时间、液料比为考察因素,在单因素实验的基础上,设计响应面法Central-Composite中心组合实验,对多汁乳菇多糖提取工艺参数进行优化,同时,通过O_2^-·、·OH、DPPH及ABTS自由基清除实验探究了多汁乳菇多糖的抗氧化活性。结果表明,多汁乳菇多糖的最佳提取工艺:浸提温度90℃,浸提时间4 h,液料比33∶1 m L/g,对应多糖得率为2.18%,产品中多糖纯度为55.40%,蛋白含量为11.37%,不含淀粉;多汁乳菇多糖对O_2^-·、·OH、DPPH及ABTS自由基清除活性的IC50值分别为:868.16、280.00、342.06、167.65μg/m L。可见,响应面法可有效拟合多汁乳菇多糖得率与浸提温度、浸提时间、液料比之间的关系,且多汁乳菇多糖具有较高的抗氧化活性。 黄娟 黄燕燕 刘冬梅 陈素芹 潘伟才关键词:多糖 响应面 抗氧化活性 通过L-乳酸脱氢酶1的上下游DNA序列鉴定Lactobacillus sp.DMDL 9010 被引量:4 2014年 从发酵蔬菜中分离到乳杆菌DMDL 9010,将此菌与LCR 719、LB 1.83、ST 1.204和LP 8140等4株乳酸菌用于MRS培养基体系中亚硝酸盐的降解,作用24h后发现,DMDL 9010的降解效果最好并具有显著性(P≤0.001).利用16S rDNA将鉴别的范围缩小到植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)或戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus),生理生化实验将DMDL 9010鉴定为戊糖乳杆菌.但在后续的PCR中无法得到戊糖乳杆菌的特异性条带.通过分析两种菌的基因组序列,发现它们都具有编码L-乳酸脱氢酶1的同源DNA序列(ldhL1),序列相似度达到90%.同时这段同源序列上下游片段序列相似度较低,其序列的差异可以作为鉴别依据.对DMDL 9010的L-乳酸脱氢酶1基因上下游900bp左右的DNA片段进行PCR扩增并测序,利用生物信息学分析方法进行序列比对分析,DMDL9010被鉴定为植物乳杆菌. 刘冬梅 费永涛 王盼 陈谷 肖性龙 吴晖 唐语谦关键词:DNA序列 LCR 6013降解亚硝酸盐的途径及其亚硝酸盐还原酶的初步定位 被引量:14 2013年 研究了在De Man,Rogosa and Sharpe medium(简称MRS培养基)体系中NaCl、Vc对Lactobacillus casei subsp.rhamnosus6013(简称LCR 6013)降解亚硝酸盐的影响。并利用电子捕获-气相色谱法和靛酚蓝染色法确定亚硝酸盐的降解途径。通过测定LCR6013细胞中不同组分的酶活研究了亚硝酸盐还原酶(Nitrite reductase,NiR)的定位。在MRS体系中,NaCl、Vc浓度分别为0.75%、0.02%时,LCR 6013对亚硝酸盐的降解量最高分别为9.29μg/mL和9.89μg/mL,与对照比,此降解效果显著(p 0.01)。当NaNO2初始量为10.00μg/mL时,降解产物中含有28.81 10-6的N2O气体,没有NH4+。当NaNO2初始量为50.00μg/mL,在16 h时LCR 6013能够将NaNO2完全降解,14 h时N2O体积百分比含量最高为96.61 10-6;细胞周质间隙中NiR酶活是细胞质中的2.5倍。总之,在MRS体系中,LCR 6013能有效降解亚硝酸盐是源于细胞内亚硝酸盐还原酶NiR的作用;最可能通过NO2-NO N2O N2的途径进行降解,而非铵化作用;降解产物中含有N2O气体。 张馨月 刘冬梅 许喜林 李平 李理关键词:干酪乳杆菌鼠李糖亚种 一氧化二氮 反硝化 益生菌粉喷雾干燥工艺的研究现状及展望 益生菌是一类可以改善宿主微生态平衡、发挥抗衰老、降胆固醇、提高免疫力等益生作用的微生物。利用喷雾干燥手段对益生菌进行处理,可以保护其活性稳定,以较高的活菌数到达作用靶点。目前,研究人员使用喷雾干燥技术对益生菌进行干燥和工... 邝嘉华 刘冬梅关键词:益生菌 喷雾干燥 文献传递 蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus LJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达和纯化 被引量:5 2018年 利用克隆表达技术,对一种蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus LJ01的亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,Ni R)基因进行克隆、原核表达,利用Ni柱亲和层析和DEAE Sepharose Fast Flow交换层析对表达的重组NiR进行纯化,分析重组酶的性质。研究结果显示,该NiR含有一个1 623 bp的开放阅读框,编码540 个氨基酸序列,重组NiR的分子质量约为67 ku;该酶中同时存在铁离子和铜离子,且含量分别为51.0 mg/kg和184.5 mg/kg;圆二色谱结果显示α-螺旋结构在重组NiR中所占比例最大。 陈思敏 罗彤晖 费永涛 吴健锋 刘冬梅关键词:蜡样芽孢杆菌 基因克隆 工程菌 蜡样芽孢杆菌LJ01的鉴定及亚硝酸盐还原酶性质 被引量:3 2015年 从豆瓣酱中筛选出一株能高效降解亚硝酸盐的菌株LJ01,经鉴定为蜡样芽孢杆菌.通过测定LJ01细胞中不同组分的酶活,研究了亚硝酸盐还原酶的初步定位.LJ01经100 mg/L的Na NO2诱导后,用溶菌酶破壁,粗酶液先经阴离子DEAE Sepharose Fast Flow层析柱分离,测定不同蛋白组分a、b、c降解亚硝酸盐的活力,利用0.1 mol/L无机电子供体丁二酸和亚硫酸钠等鉴定出组分c为亚硝酸盐还原酶,再经葡聚糖凝胶G-150层析柱分离,获得较纯的亚硝酸盐还原酶,每升发酵液可得到0.54 mg活性酶蛋白,酶蛋白活力达到4004.89 U/mg,得率为2.37%,纯化后其NiR的比活力提高了17.57倍.经SDSPAGE电泳后确定LJ01中亚硝酸盐还原酶的单体分子质量约为30 ku. 刘冬梅 罗彤晖 杨丹霞 黄娟 吴晖 余以刚 李理关键词:蜡样芽孢杆菌 RDNA 细胞定位 花生粕的枯草芽孢杆菌BSH001发酵及产物性质 被引量:4 2014年 为改善花生粕中的氨基酸平衡,减少花生蛋白质中的过敏原,将枯草芽孢杆菌BS H001用于花生粕的发酵,对发酵条件进行了优化,并研究了发酵后花生粕的部分性质.正交试验结果表明:枯草芽孢杆菌BS H001发酵花生粕的最优条件为含水量52%、发酵时间44 h、搅拌间隔8 h、灭菌时间45 min、硫酸铵含量4.0%,在此条件下发酵花生粕中的蛋白质含量达56.20%,比花生粕的提高了23.49%;发酵花生粕中非必需氨基酸、必需氨基酸和总氨基酸的含量分别提高了4.92%、43.97%和16.49%.SDS-PAGE电泳分析表明,经优化后第9、13、15、16组发酵花生粕中分子质量为63、48、41 ku的蛋白质大分子被全部降解.上述结果表明,BS H001发酵花生粕可成为动物可利用高蛋白质的来源. 刘冬梅 陈浩 胡小慧 吴晖 李理关键词:发酵 枯草芽孢杆菌 花生粕 氨基酸 电泳 正交试验 紫外线诱变木醋杆菌及优良突变菌种的选育 2013年 为了提高细菌纤维素(简称BC)量和续代发酵的稳定性,该研究利用紫外线照射木醋杆菌Acetobacter xylinum CGMCC 5173菌株诱变,还对3种不同培养基培养得到BC进行了对比。研究表明,紫外线分别照射3 min、4 min和5 min,经筛选得到UV31、UV32、UV33、UV42、UV44五株产量较高的突变菌株,其产量高达26.96 g/L~35.48 g/L;菌株UV31、UV32、UV33、UV42连续发酵四代产量仍比较稳定,分别稳定在23 g/L~39 g/L、25 g/L~36 g/L、24 g/L~39 g/L;菌株UV32、UV42和野生菌在CMMF中的BC产量高约为19.94 g/L~39.97 g/L,但结构松散,在MMF中BC的产量低为10.17 g/L~22.28 g/L,均匀紧密,在CO-MMF-CMMF中BC产量中等为16.24 g/L~31.09 g/L,较均匀紧密。结果表明,紫外诱变3 min菌株的BC产量高且3代~4代发酵产量保持稳定,CO-MMF-CMMF是最适于发酵的培养基。 蔡兴蓉 刘冬梅 许燕娜 肖性龙 袁琨关键词:木醋杆菌 紫外诱变 选育 突变菌株 细菌纤维素 植物乳杆菌DMDL9010冻干优化研究 被引量:1 2018年 以植物乳杆菌DMDL9010为研究对象,采用单因素实验并应用Box-Behnken设计对冻干保护剂配方进行优化,研究了该菌株在冻干过程中离心条件和冻干保护剂对冻干菌株存活率的影响。结果表明:在8 000 r/min离心30 min,菌泥活菌数可达最大值3.135×10~9mL^(-1);当冻干保护剂质量分数为:脱脂乳粉12.0%,细菌学蛋白胨7.95%,海藻糖15.2%时菌株存活率最高,经验证菌体数最高可达3.78×10~8g^(-1),冻干存活率达13.38%。 黄燕燕 赵珊 何嘉敏 刘冬梅 周钦育 林钟培 冯立科 彭小霞 杨爱君关键词:冻干保护剂 BOX-BEHNKEN设计 活菌数