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天津市应用基础与前沿技术研究计划(IOJCZDJC20300)
作品数:
1
被引量:4
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张惟
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2013
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糖尿病视网膜病变大鼠骨髓内皮祖细胞数量和功能变化
被引量:4
2013年
目的观察在大鼠糖尿病视网膜病变(DR)模型中骨髓内皮祖细胞(EPCs)功能变化,探讨EPCs在DR发病机制中的作用。方法实验研究。雄性成年Wistar大鼠50只,以随机数字表法,随机分为正常对照(CON)组(14只鼠)和糖尿病(DM)组(36只鼠)。根据病程,将DM组大鼠再分为糖尿病1个月(DMl)组、糖尿病3个月(DM3)组、糖尿病6个月(DM6)组,每组各12只。采用密度梯度离心法从各组大鼠骨髓获取单核细胞,将其接种于纤维连接蛋白包被的培养板;培养7d后,利用Dil-acLDL和FITC.UEA—I细胞荧光染色法及流式细胞仪CD34和CD133抗体标记法鉴定EPCs。在倒置相差显微镜下对EPCs计数克隆形成单位(CFU),以评估骨髓EPCs的数量水平;采用MrlTr比色法、Transwell小室和黏附能力测定实验观察EPCs的增殖、迁移和黏附能力。同时于各相应时间点摘除大鼠眼球行苏木精.伊红(HE)染色,采用免疫组织化学法分析血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠视网膜中的表达。对比分析EPCs的数量和功能变化及其与DR形态学变化的相互关系。组间骨髓EPCs数量、功能及视网膜VEGF表达阳性率比较,采用单因素方差分析和LSD—t检验法。结果DMl、DM3、DM6组大鼠骨髓来源EPCs-CFU为(9.6±1-8,11.5±2.5,14.0±2.4个/x200倍视野)较CON组(16.6±2.7个/x200倍视野)减少,差异有统计学意义(F=13.311,P〈0.01);DMl、DM3、DM6组EPCs增殖能力(0.133±0.027,0.106±0.016,0.072+0.011 OD)较CON组(0.203±0.068OD)降低,差异有统计学意义(F=16.091,P〈0.01);DMl、DM3、DM6组EPCs迁移能力(11.9±2.2,10.1±1.8,8.9±1.2个/x200倍视野)较CON组(14.8±2.6个/x200倍视野)降低,差异有统计学意义(F=12.506,P〈0.01):DMl、DM3、DM6组EPCs黏附能力(14.8±3.2,10.5±2.0,7.5±1.2个/x2
张惟
韩琪
陈松
颜华
关键词:
糖尿病视网膜病变
内皮祖细胞
细胞培养
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