广东省自然科学基金(8451051501000371)
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
- 相关作者：吴补领高杰李春雷黄欣李长霞更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院南方医科大学广州军区联勤部更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家教育部博士点基金更多>>
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- miR101通过PLAP-1调节牙周膜细胞成骨分化的研究被引量：3
- 2014年
- 目的:研究miR101的表达变化靶向调节PLAP-1基因对牙周膜细胞成骨分化中细胞骨化功能的影响。方法:首先获得miR101过表达和表达抑制的慢病毒,以此转染人牙周膜细胞并对其进行成骨分化诱导,分别于矿化0、7、14、21 d采用定量RT-PCR检测各组靶基因PLAP-1mRNA的表达量;酶活性检测法检测各组细胞ALP活性变化;茜素红染色法检测各组细胞矿化结节形成情况。结果:miR101过表达后可抑制PLAP-1mRNA的表达,并使ALP活性升高、矿化结节形成量增多;而抑制miR101的表达后则可上调PLAP-1mRNA的表达水平,并使ALP的活性降低、矿化结节形成量减少。结论:在人牙周膜细胞骨向分化中miR101可能通过抑制PLAP-1而促进其成骨分化能力。
- 李春雷卢昌懿李长霞岳静黄欣吴补领
- 关键词：牙周膜细胞成骨分化
- 干细胞因子促进人乳牙牙髓干细胞增殖与向成骨方向分化被引量：6
- 2011年
- 目的探讨不同浓度干细胞因子对人乳牙牙髓干细胞增殖及向成骨方向分化能力的影响。方法无菌条件下培养因发育滞留而拔除乳牙的牙髓,酶消化法培养乳牙牙髓干细胞,以浓度为3、10μmol/L干细胞因子培养液作用于乳牙牙髓干细胞,正常培养基为对照组。MTT法检测干细胞因子对乳牙牙髓干细胞增殖能力的影响,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测干细胞因子作用于乳牙牙髓干细胞后ALP活性的改变,RT-PCR方法检测细胞内骨钙素、骨涎蛋白mRNA含量的改变。结果 MTT结果显示两种浓度的干细胞因子均可以促进乳牙牙髓干细胞增殖,且随浓度增加促进作用增强。ALP试剂盒检测结果表明干细胞因子也可以促进乳牙牙髓干细胞的ALP活性,且浓度为10μmol/L的ALP OD值最高。RT-PCR结果显示干细胞因子可以上调乳牙牙髓干细胞内骨钙素及骨涎蛋白mRNA的含量。结论干细胞因子对乳牙牙髓干细胞的增殖和成骨方向分化能力具有一定的促进作用,提示干细胞因子具有促进牙齿再生的作用。
- 路娟英高杰麻丹丹陈婷
- 关键词：干细胞因子乳牙牙髓干细胞增殖骨向分化牙齿再生
- 人牙周膜细胞骨向分化中靶向调节PLAP-1基因的微小RNA的筛选与鉴定
- 2013年
- 目的筛选和鉴定靶向调节牙周膜相关蛋白1(peridontal ligament associated protein-1,PLAP-1)基因的微小RNA(microRNA,miRNA),探讨其在人牙周膜细胞骨向分化中的表达差异。方法用生物信息学方法筛选靶向调节PLAP-1基因的miRNA,用双荧光素酶法分析靶基因结合位点,定量PCR验证靶向调节PLAP-1基因的miRNA过表达及其在人牙周膜细胞骨向分化中的表达变化。结果 miR-21(miRNA-21)靶向调节PLAP-1,基因表达量在0 d时PLAP-1为1.001±0.053,miR-21为2.540±0.131;在28 d时PLAP-1为14.681±1.066,miR-21为1.000±0.016。过表达miR-21可抑制性调节靶基因PLAP-1表达,人牙周膜细胞骨向分化中PLAP-1的表达水平与miR-21的表达水平呈负相关。结论 miR-21靶向调节PLAP-1基因并参与人牙周细胞骨向分化中PLAP-1基因的表达调控。
- 李长霞李春雷岳静黄欣陈美美陈美美高杰
- 关键词：牙周膜
- Smad3对MDPC-23细胞矿化功能的影响
- 2009年
- 目的探讨TGF-β1通路中信号分子Smad3对小鼠成牙本质细胞样细胞MDPC-23细胞矿化能力的影响。方法瞬时转染、酶动力学方法和放射免疫法检测。结果在TGF-β1的作用下,Smad3可以发生转位表达,由细胞浆转入细胞核内。过表达野生型Smad3时,细胞裂解液和培养液中碱性磷酸酶活性均高于对照组(P<0.05),骨钙素分泌高于对照组(P<0.05)。结论TGF-β1促进MDPC-23细胞矿化这一生物学效应的输出受Smad3信号分子的调节。
- 高杰吴补领何文喜余擎张宇闫文娟
- 关键词：SMAD3碱性磷酸酶骨钙素
- miR101慢病毒表达系统的构建及其在人牙周膜细胞骨向分化中靶向调节PLAP-1基因表达的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:构建miR101的慢病毒表达系统并验证其对牙周膜细胞PLAP-1基因的表达调控。方法:用矿化培养液培养牙周膜细胞,使用p LVX-shRNA1慢病毒表达系统构建获得超表达miR101和抑制表达miR101的慢病毒;用q PCR验证miR101的表达水平,使用Western检测PLAP-1的表达水平。结果:成功获得了miR101的慢病毒表达系统,用于转染矿化诱导液培养的人牙周膜细胞。过表达miR101可抑制PLAP-1的表达,抑制表达miR101可增强PLAP-1的表达。结论:miR101可以调节PLAP-1基因并参与人牙周膜细胞骨向分化中PLAP-1基因表达的调节,miR101可能在人牙周膜细胞骨向分化中发挥调节作用。
- 李长霞卢昌懿李春雷岳静黄欣吴补领
- 关键词：牙周膜细胞成骨分化
- 改良组织块酶消化法培养人龋损牙髓干细胞的实验研究被引量：15
- 2011年
- 目的:比较3种方法培养人龋损牙髓干细胞的成功率和细胞生长状态,以探求人龋损牙髓干细胞的最佳培养方法。方法:取18～22岁成人新鲜正常和龋损离体第三磨牙各25个,采用组织块法、酶消化法、改良组织块酶消化法培养牙髓干细胞。通过倒置显微镜观察组织块的贴壁以及细胞的形态和数量,并记录培养所需时间;有限稀释法纯化牙髓干细胞,流式细胞仪检测正常和龋损牙髓干细胞表面标记物Stro-1、CD 90的表达情况,绘制正常和龋损牙髓干细胞生长曲线。结果:组织块法、酶消化法和改良组织块酶消化法均可以培养出人龋损牙髓干细胞,其中改良组织块酶消化法可以在短时间内获得数量多,状态好,形态多样的细胞。通过有限稀释法获得的龋损牙髓干细胞生长速率高于正常牙髓干细胞(P<0.05)。结论:改良组织块酶消化法是一种较为理想的原代培养人龋损牙髓干细胞的方法。
- 麻丹丹高杰吴补领
- 关键词：龋损牙髓干细胞原代培养
