北京市科技新星计划(H020821500190)
- 作品数：10 被引量：49H指数：4
- 相关作者：程石宋茂民史敬东闫文貌杨彬更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京天坛医院更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氯化钆诱导急性坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞凋亡机制的研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨氯化钆(GdCl3)诱导急性坏死性胰腺炎(SAP)肺泡巨噬细胞(AM)凋亡的可能机制。方法48只成年SD大鼠随机分为正常对照组、SAP组、GdCl3治疗组,每组16只。逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立AP大鼠模型。经支气管肺泡灌洗获取AM。检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)含量。肺脏/胰腺组织HE染色检查,透射电镜观察和流式细胞仪AnnexinV/FITC及碘化丙啶(PI)双染色法检测AM凋亡情况,并行AM爬片的FasL免疫组化检查。结果GdCl3治疗组电镜下可见典型凋亡形态学特征,BALF中TNF-α和IL-1β含量[(7.84±0.75)pg/mL,(8.57±5.64)pg/mL]较SAP组明显减低,差异均有显著性(P<0.05),而AM凋亡率明显增高(22.48±1.44)%,与正常对照组、SAP组相比差异也有显著性(P<0.05);GdCl3治疗组免疫组化FasL阳性表达较正常组和AP组明显增多(41.67±11.69)%,差异均有显著性(P<0.05)。AM凋亡率与AM中FasL阳性表达率呈明显的线性正相关(r=0.835,P<0.001)。结论GdCl3可能通过激活FasL诱导SAP大鼠AM发生凋亡进而减轻肺损伤。
- 程石闫文貌宋茂民
- 关键词：胰腺炎急性坏死性氯化钆肺泡FASL
- 急性坏死性胰腺炎大鼠肺泡巨噬细胞中TNFα的表达及意义
- 2006年
- 目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及意义。方法将72只SD大鼠随机分为Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。Ⅰ、Ⅱ组逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立ANP模型。支气管肺泡灌洗获取各组肺泡巨噬细胞,检测TNFα水平;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(M PO)水平;以逆转录聚合酶链反应法测定肺泡巨噬细胞TNFαmRNA表达情况;行肺组织病理学检查。结果ANP发生后,肺泡巨噬细胞TNFαmRNA的表达逐渐增强,6 h最显著,12 h表达减弱,Ⅰ、Ⅱ组TNFα水平随时间变化趋势与TNFαmRNA相符。ANP大鼠肺损伤随病情进展而逐渐加重,肺组织M PO及BALF蛋白含量随时间延长而逐渐升高,Ⅰ组各指标与Ⅲ组相比,P均<0.05。Ⅱ组各指标与Ⅲ组相比仍然升高(P均<0.05),但与Ⅰ组比较明显降低(P均<0.05)。肺泡巨噬细胞分泌TNFα水平与肺组织M PO及BALF蛋白含量密切相关。结论ANP发生后,肺泡巨噬细胞分泌的TNFα过度表达,并导致肺损伤。
- 程石宋茂民史敬东
- 关键词：肿瘤坏死因子
- 抗TNF-α治疗对重症急性胰腺炎肺损伤NF-κB信号通路的影响被引量：17
- 2008年
- 目的探讨抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)治疗对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)细胞核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法SD大鼠随机分为对照组、SAP组、抗TNF-α抗体治疗组。每组再分为术后1,3,6,12h4个时相组,每时相6只。逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立SAP大鼠模型。从支气管肺泡灌洗液(BALF)获取AM,检测AM分泌TNF-α水平,并检测BALF中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平。以RT-PCR法测定AM TNF-αmRNA的表达。行肺组织病理学检查及免疫组化检查NF-κB的表达。结果对照组肺组织较少有NF-κB活化的AM,SAP各组肺组织均可见NF-κB活化,且随时间进展NF-κB由细胞质逐渐进入细胞核。TNF-α抗体治疗组仍有少量NF-κB活化。ANP大鼠肺损伤随病情进展而加重。肺组织MPO及BALF蛋白含量随时间延长而升高,12h达最高值,分别为(10.78±0.58)U/g和(2011.0±105.5)μg/mL。AM分泌TNF-α水平也逐渐升高,至6h达高峰[(1624.2±149.2)pg/mL],12h回落。TNF-αmRNA的表达与TNF-α的变化趋势相似。SAP大鼠上述各组指标与正常对照组相比均有统计学差异(P<0.05)。TNF-α抗体治疗组各指标仍显著高于正常对照组(P<0.05),但低于SAP组(P<0.05)。AM分泌TNF-α活性与MPO及BALF蛋白含量呈正相关(r=0.65,0.76,P<0.01)。结论抗TNF-α治疗可抑制SAP大鼠的TNF-α对AM NF-κB活化的反馈激活作用,并可直接减少TNF-α,进而减轻肺损伤。
- 程石杨彬闫文貌史敬东宋茂民
- 关键词：胰腺炎肺泡核因子ΚB肺损伤
- 氯化钆对急性坏死性胰腺炎肺源性炎症介质的影响
- 2006年
- 实验研究表明急性坏死性胰腺炎（acute necrotizing pancreatitis,ANP）肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage,AM）可活化并引起肺损伤[1],如果能抑制其活化,可能减少其分泌炎症介质,阻止炎症的发生、发展,从而减轻肺损伤.钆是一种稀有金属,可抑制AM介导的免疫和炎症反应[2].本实验采用氯化钆（GdCl3）处理ANP大鼠模型,通过研究AM分泌炎症介质的变化,以明确氯化钆能否减轻ANP所致肺损伤.
- 程石宋茂民史敬东
- 关键词：急性坏死性胰腺炎炎症介质氯化钆肺源性肺泡巨噬细胞稀有金属
- 大鼠重症胰腺炎肺泡巨噬细胞凋亡与Bax/Bcl-2表达的研究被引量：1
- 2009年
- 目的观察Bax和Bcl-2在肺泡巨噬细胞(AM)中的表达,探讨氯化钆(GdCI3)诱导重症急性胰腺炎(SAP)大鼠AM凋亡的可能机制。方法将48只成年SD大鼠随机分为正常对照组(对照组),SAP组,GdCI3治疗组;每组16只。SAP模型制成6 h后,经支气管肺泡灌洗液获取AM,检测该灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平;HE染色检查肺脏/胰腺组织;透射电镜观察和流式细胞仪Annexin V/FITC及碘化丙啶双染色法检测AM凋亡情况;用Western Blot方法检测AM中Bax和Bcl-2的表达。结果GdCI3治疗组电镜可见AM典型凋亡形态学特征,肺组织中MPO活性、支气管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-1β含量均较SAP组减低,差异均有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测到AM凋亡率较对照组和SAP组明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);Western Blot检测到AM中Bax较对照组和SAP组明显增高,而Bcl-2明显减低,差异亦均有统计学意义。结论GdCI3可能通过激活Bax和抑制Bcl-2表达诱导SAP大鼠AM发生凋亡,进而减轻SAP所致的肺损伤。
- 闫文貌程石宋茂民
- 关键词：氯化钆BAX/BCL-2肺泡巨噬细胞
- 肺源性一氧化氮过度表达在急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨肺源性一氧化氮(NO)过度表达对急性坏死性胰腺炎(ANP)肺损伤的影响。方法将72只成年SD大鼠随机分为三组各24只。ANP组、ANP预处理组(预处理组)逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型,对照组注射等量生理盐水。造模前30 m in,预处理组腹腔注射N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAM E)10 m g/kg。造模后1、3、6、12 h分别处死大鼠各6只,取肺泡巨噬细胞(AM)检测NO水平及诱导型一氧化氮合成酶(iNO S)mRNA表达情况及TNF-α水平,并行肺组织病理学检查。结果ANP组肺损伤随时间延长而逐渐加重;AM分泌TNF-,αNO水平逐渐升高,至6 h达到高峰,12 h回落。AM iNO S mRNA的表达情况与NO的变化趋势相似。预处理组各指标变化趋势与ANP组相似,但各指标均低于ANP组(P均<0.05);肺组织髓过氧化物酶(M PO)、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、肺组织湿/干重值逐渐升高,12 h达最高值,动脉血氧分压值逐渐降低。结论ANP发生后肺泡AM的iNO S表达增强,肺源性NO过量表达,并促进TNF-α大量分泌,加重肺损伤,应用iNO S抑制剂则能减轻肺损伤。
- 程石宋茂民史敬东
- 关键词：一氧化氮胰腺炎肺损伤一氧化氮合酶
- 氯化钆对急性坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞分泌炎症介质的影响被引量：14
- 2006年
- 目的探讨氯化钆(Gdcl3)对急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)分泌炎症介质的影响。方法90只成年SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、ANP组、Gdcl3处理正常对照组(C+Gdcl3组)、ANPGdcl3预处理组、ANPGdcl3治疗组。每组18只。各组大鼠均经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,行支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平、AM分泌肿瘤坏死因子α(TNF-a)和一氧化氮(NO)水平分析;行血气分析,检测肺湿/干重比值,并行肺组织病理学检查。结果C+Gdcl3组各指标与正常对照组相比差异无显著性(P>0.05)。ANPGdcl3预处理组和ANPGdcl3治疗组除动脉血氧分压外各项指标显著高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05),但与ANP组相比有降低,差异有显著性(P<0.05)。结论氯化钆可抑制ANP大鼠AM分泌炎症介质,并减轻ANP所致的肺损伤。
- 程石宋茂民史敬东
- 关键词：氯化钆炎症介质
- 氯化钆对重症急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的防护作用及机制被引量：3
- 2008年
- 目的通过观察FasL在肺泡巨噬细胞(AM)中的表达,探讨氯化钆(GdCl3)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠所致肺损伤的防护机制。方法将48只成年SD大鼠随机分为三组各16只。对照组不予任何处理。模型组和治疗组逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立SAP大鼠模型,治疗组造模后即刻由阴茎背静脉注入2%GdCl315 mg/kg。6 h后处死大鼠,经支气管肺泡灌洗液(BALF)获取肺泡AM,检测BALF中TNFα、IL-1β水平及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,肺、胰腺组织行HE染色检查,透射电镜观察和流式细胞仪检测肺泡AM凋亡情况,同时行免疫组化法检测肺泡AM的FasL表达。结果与对照组、模型组比较,治疗组透射电镜可见肺泡AM典型凋亡形态学特征,肺组织中MPO活性、BALF中TNFα和IL-1β水平均较模型组降低,肺泡AM凋亡率明显增高,FasL阳性表达率亦明显增高(P均<0.05)。结论GdCl3对SAP所致肺损伤具有防护作用,其机制可能通过激活FasL通路诱导SAP大鼠肺泡AM发生凋亡发挥作用。
- 闫文貌程石韩颖
- 关键词：氯化钆FAS重症胰腺炎肺损伤肺泡巨噬细胞
- 核因子κB活化对急性坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞炎症介质表达的影响及意义被引量：13
- 2006年
- 目的探讨核因子κB(NF-κB)活化对急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)分泌炎症介质的影响和对肺损伤的影响。方法30只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP后1、3、6、12 h组,每组6只。逆行性胰胆管注射5％牛磺酸钠建立ANP大鼠模型,正常对照组大鼠自胆胰管内逆行注入生理盐水。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平、肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNFα),一氧化氮(NO)水平,测定肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达情况。行肺组织的病理学检查并评分,同时行免疫组化检查肺组织中NF-κB的表达。结果正常肺组织较少见到NFκB活化的AM,ANP各组肺组织均可见到NF-κB活化,并且随时间进展NF-κB逐渐由细胞质更多进入细胞核。ANP大鼠肺损伤随着病情进展而逐渐加重,肺组织MPO及支气管肺泡灌洗液中蛋白含量逐渐升高;肺泡巨噬细胞分泌TNFα,NO水平逐渐升高,至6 h达到高峰,12 h又回落。ANP发生后,肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、iNOSmRNA的表达情况与TNFα,NO的变化趋势相似。ANP大鼠各组指标与正常对照组相比均有统计学差异(P<0．05)。结论ANP形成后,NF-κB发生活化,使AM炎症介质表达增强,并促进肺损伤。
- 程石宋茂民史敬东
- 关键词：胰腺炎核因子ΚB肺泡炎症介质
- TLCK对急性出血坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨盐酸-对甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基甲酮(TLCK)对急性出血坏死性胰腺炎(AH-NP)肺损伤的保护作用。方法将SD大鼠随机分为7组,每组10只:①组为注射生理盐水的正常对照组;②组为生理盐水静脉注射的AHNP对照组;③组为5μg/kg TLCK干预AHNP组;④组为10μg/kgTLCK干预组;⑤组为20μg/kg TLCK干预AHNP组。②～⑤组均于AHNP模型制成后立即静脉给予干预药物;⑥组为制AHNP模型30min前TLCK干预组;⑦组为制AHNP模型30 min后TLCK干预组(后2组TLCK均以10μg/kg剂量给药)。上述7组动物检测7d生存率,用于筛选TLCK的最佳给药时间和剂量。AHNP模型采用逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立。根据筛选结果再将实验动物分为:假手术对照组(N组),AHNP组(P组),TLCK干预组(于AHNP模型制成后立即静脉给予TLCK 10μg/kg)(T组)。每组大鼠6只。后3组手术后6 h处死动物,行支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞(AM),并测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量;检测AM中NF-κB活化情况及AM分泌TNFα水平。测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)的变化,并行组织学检查。结果①～⑦组7d生存率分别为100%,0%,70%,100%,80%,0%和90%。N组肺组织MPO活性较低,BALF蛋白含量亦低;P组和T组显著高于N组(P<0.05),而T组显著低于P组(P<0.05)。N组AM可检测到低水平TNFα活性,P组AM分泌TNFα活性明显高于N组及T组(P<0.05)N组亦显著低于T组(P<0.05)。NF-κB在N组不表达,P组高表达,T组低表达。结论TLCK可通过抑制NF-κB表达,减少炎症细胞因子的分泌,明显减轻AHNP所致肺损伤。TLCK干预的最佳剂量为10μg/kg,最佳时间为AHNP发生后即时给药。
- 程石史敬东宋茂民
- 关键词：胰腺炎急性坏死性肺损伤肺泡巨噬细胞
