天津市应用基础与前沿技术研究计划(09JCYBJC09500)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：苏治国刘晓智刘洪良王亮王骏飞更多>>
- 相关机构：天津市第五中心医院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胶质瘤中miR-34a靶向作用于MAPK13 mRNA并抑制其表达被引量：1
- 2011年
- 目的预测并验证miR-34a与促分裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)的靶向作用关系,寻找胶质瘤基因治疗的新方法。方法将miR-34a相似物转染入胶质瘤细胞A172中,实时定量PCR检测miR-34a在胶质瘤中的表达。目的基因的mRNA水平用实时定量PCR来评估,蛋白水平分别用荧光素酶试验和蛋白印迹来评估。miR-34a与目的基因3'非翻译区(3'UTR)的结合用MAPK13报告实验确认。结果 miR-34a相似物转染入胶质瘤细胞A172后在A172细胞中大量表达,实时定量PCR、蛋白印迹和免疫荧光证明miR-34a降低MAPK13的表达量,MAPK13荧光素酶报告实验显示,MAPK13荧光素酶活性被miR-34a降低。结论 miR-34a通过与MAPK13 3'UTR区的特异结合作用发挥对胶质瘤责任基因MAPK13的靶向沉默作用,可能成为未来胶质瘤基因治疗的新选择。
- 王亮黄凯刘晓智李罡苏治国王骏飞赵玉军刘洪良陈镭
- 关键词：神经胶质瘤基因治疗
- 骨髓基质干细胞在Sprague-Dawley大鼠颅内移植致肿瘤形成3例报告被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)颅内移植后潜在的恶变致瘤的可能性及机制。方法:选取在20只Sprague-Dawley大鼠体内移植BMSCs实验中发现的3只对侧肢体偏瘫症状逐渐加重的实验大鼠,采用MRI检查其颅内是否发生占位性改变,观察并记录此3只大鼠的生存期;获取死亡大鼠的含瘤脑组织,采用端粒扩增(telemere repeat amplifi cation protocol,TRAP)-PCR-酶联免疫(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞端粒酶活性,免疫组织化学法检测含瘤脑组织中细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、巢蛋白(nestin)和胶质纤维酸性蛋白(glial fi brillary acidic protein,GFAP)的表达,蛋白质印迹法检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的相对表达量。以无瘤正常大鼠脑组织为对照组。结果:20只BMSCs移植大鼠中共有3只实验鼠出现左侧肢体偏瘫且呈进行性加重,3只大鼠的生存期分别为129、174和187d;TRAP-PCR-ELISA结果显示,3只含瘤组织中细胞端粒酶活性均高于无瘤组;免疫组织化学结果显示,3只大鼠含瘤组织中PCNA和nestin的蛋白表达水平均高于无瘤组,GFAP表达水平则低于无瘤组;蛋白印迹法检测结果提示,与无瘤组织比较,3例肿瘤组织中有1只EGFR表达增高,2只VEGF表达增高,而MMP-9表达水平差异均无统计学意义。结论:长期体外培养的BMSCs可出现端粒酶活性和细胞增殖活力增强,以及部分癌基因激活等致瘤表型,提示干细胞体内移植存在潜在的成瘤可能性。
- 刘振林王亮刘晓智刘洪良宋军苏治国宋迎李金艳姜忠敏
- 关键词：干细胞细胞移植致癌性试验
