国家自然科学基金(31160488)
- 作品数：31 被引量：54H指数：5
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- 高原牦牛隐睾组织结构特征被引量：2
- 2015年
- 观察成年牦牛隐睾的组织结构特点,分析高原环境对其生殖微环境的影响。应用HE、Masson’s、Gomori’s特殊染色以及免疫组织化学方法和透射电镜观察比较成年牦牛隐睾与单侧正常睾丸、正常睾丸组织结构特点,进而用IPP图像分析软件进行定量统计。与正常组睾丸相比,隐睾生精小管管径极显著减小(P<0.01),基膜增厚,腔内生殖细胞丢失,散在少数幼稚型Sertoli细胞,胞内线粒体变性且含有大小不等的脂褐素颗粒;间质内胶原纤维增生,间质/管腔面积比极显著增大(P<0.01),Leydig细胞数量减少,胞内线粒体肿胀,间质血管数量减少,管壁增厚皱缩,血管内皮细胞内含大量脂褐素颗粒;睾丸实质部分钙化。单侧正常组睾丸生精上皮细胞为3~4层,Sertoli细胞发育成熟,少见初级精母细胞及精子;间质/管腔面积比与正常睾丸无明显差异(P>0.05),Leydig细胞数量较多,内质网丰富呈一定扩张状态,线粒体减少。免疫组织化学显示,VEGF及VEGFR2在隐睾组与单侧正常组、正常组睾丸均表达于Sertoli细胞、Leydig细胞及各级生精细胞,血管内皮细胞偶见表达;隐睾组VEGF表达量较正常组、单侧正常组睾丸明显下降(P<0.05),VEGFR2表达量明显高于正常组与单侧正常组(P<0.05);单侧正常组VEGF及VEGFR2表达量较正常组均无明显差异(P>0.05)。高原低氧环境,牦牛隐睾血管发育受阻,组织出现不同程度的纤维化和局部钙化,Sertoli细胞发育异常严重影响生精功能;单侧正常睾丸Leydig细胞数量增加,而其中线粒体数量减少,发育程度较正常组织有所降低,隐睾组织中VEGF与VEGFR2可能参与调节双侧睾丸生精抑制作用。
- 陈国娟袁莉刚李聪闫振龙
- 关键词：牦牛隐睾血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体2
- 不同繁殖季节成年牦牛附睾组织特征比较被引量：6
- 2016年
- 为比较不同繁殖季节成年牦牛附睾组织结构特征变化,应用苏木精—曙红常规染色、Masson’s和Gomori’s特殊组织化学染色方法比较不同繁殖季节牦牛(6头繁殖期成年牦牛和9头繁殖间期成年牦牛)附睾的组织结构特点并用IPP图像分析软件进行定量分析。结果显示,与繁殖间期相比,繁殖期附睾尾间质胶原纤维和网状纤维较附睾头及附睾体明显增多;附睾头和附睾体柱状上皮厚度显著增加(P<0.05),附睾头纤毛长度增加显著(P<0.05);附睾头和附睾尾管腔内径及外径显著增高(P<0.05);但是附睾尾管腔外径繁殖期与繁殖间期相比差异不显著(P>0.05)。本研究结果表明,成年牦牛附睾管外围网状纤维与胶原纤维分布一致,二者在附睾尾较为丰富,可能与其较强的收缩能力及精子运输有关;柱状纤毛上皮高度及纤毛长度、管腔内径与外径的变化与其所处的不同繁殖季节密切相关,附睾管腔的膨大和回缩亦可能是高原地区季节性繁殖的哺乳动物中一种普遍存在的现象。
- 杨栋慧袁莉刚李聪周凯仁包小霞张军梅
- 关键词：繁殖期组织化学附睾网状纤维
- 不同繁殖周期成年牦牛睾丸细胞外基质相关蛋白的分布比较被引量：2
- 2017年
- 应用Masson三色染色法、Gomori银浸染色法以及免疫组织化学SP法结合IPP统计分析法,比较了层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)和硫酸乙酰肝素糖蛋白(HSPG)在繁殖期和繁殖间期牦牛睾丸的分布及组织化学特征。结果,不同繁殖期牦牛睾丸间质胶原纤维及网状纤维均较为丰富;繁殖间期牦牛睾丸LN在支持细胞(sertoli cells)和生精细胞表达与繁殖期相近,在间质细胞(leydig cells)表达降低,但其平均吸光度检测无统计学差异(P>0.05);ColⅣ在不同繁殖期牦牛睾丸支持细胞和各级生精细胞均有阳性表达,但繁殖期牦牛ColⅣ在近管腔面生精细胞显示有强阳性表达,平均吸光度统计表明繁殖期显著高于繁殖间期(P<0.01);HSPG在不同繁殖期牦牛睾丸精原细胞及支持细胞强阳性表达,繁殖间期平均吸光度检测极显著低于繁殖期(P<0.01)。上述研究结果表明,高原环境中成年牦牛睾丸间质组织纤维成分随繁殖季节变化并不明显,睾丸组织LN合成与不同繁殖季节间质细胞分泌功能变化相关,繁殖期ColⅣ合成增强更有利于精子生成,HSPG的显著增加主要与精原细胞及支持细胞分化相关。
- 袁莉刚陈国娟李聪路琪中
- 关键词：牦牛睾丸层黏连蛋白
- 不同日龄滩羊皮肤组织化学特征比较被引量：1
- 2021年
- 为比较2、35日龄滩羊皮肤毛囊的发育特点与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)的分布特征,探究出生后滩羊被毛生长发育的变化特点,试验应用常规HE染色及改良Masson胶原纤维染色、Gomori银氨法染色、磷钨酸染色等特殊染色观察2与35日龄滩羊皮肤组织结构特点;应用免疫组织化学法结合免疫荧光染色法观察VEGF及VEGFR2在2与35日龄滩羊皮肤组织中的分布定位,并用IPP图像分析软件进行定量分析。结果显示:与2日龄滩羊皮肤组织比较,35日龄滩羊表皮与真皮间界限更加清晰,毛囊结构发育完整;毛囊密度显著降低(P<0.05);胶原纤维与弹性纤维含量增加,形成网格状分布。免疫组化及免疫荧光结果显示,VEGF及VEGFR2在滩羊皮肤表皮及毛囊外根鞘、皮脂腺上均有表达。统计表明,VEGF及VEGFR2在2日龄滩羊皮肤组织中的表达量均显著高于35日龄(P<0.05)。综合上述结果,滩羊毛囊发育过程中,胶原纤维和弹性纤维增加明显;VEGF与VEGFR2通路在毛囊角质形成中起直接调节作用。
- 郭妍丁伟陶金忠陈少宇袁莉刚李颖康
- 关键词：滩羊
- 老龄牦牛睾丸细胞外基质相关蛋白的分布特征被引量：8
- 2015年
- 探索细胞外基质相关蛋白在老龄牦牛睾丸的分布特征。应用组织化学方法比较、观察9头健康老龄牦牛和10头青年牦牛睾丸组织结构特点及层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)和硫酸乙酰肝素糖蛋白(HSPG)的分布特征。结果显示:光镜下,老龄牦牛生精上皮部分或完全退化,生精小管固有膜及间质胶原纤维及网状纤维较青年牦牛丰富;老龄睾丸间质血管及生精小管固有膜中AB-PAS阳性反应较青年牦牛增强。数据统计表明,老龄牦牛Sertoli细胞及Leydig细胞数均明显减少,生精小管横截面积以及平均间质组织面积极显著大于青年牦牛(P<0.01)。免疫组织化学显示,LN在老龄牦牛睾丸Sertoli细胞和肌样细胞表达与青年牦牛相近,LN在生精细胞表达降低,而在Leydig细胞几乎无表达;ColⅣ在不同年龄牦牛睾丸组织表达位置及强弱相似,但其平均吸光度检测结果无统计学差异;老龄牦牛睾丸组织HSPG主要在Leydig细胞表达降低,平均吸光度检测统计极显著低于青年牦牛(P<0.01);同一年龄段LN、ColⅣ和HSPG表达无明显差异。高原环境中,老龄牦牛生精上皮退化伴随着间质成分增加、间质面积增大、Leydig细胞及Sertoli细胞数量减少等形态学变化;睾丸组织ColⅣ分泌增加且胶原纤维合成增强,LN和HSPG的显著降低可能影响Leydig细胞合成分泌能力。
- 袁莉刚朱峻峰谷来凤陈国娟
- 关键词：睾丸层黏连蛋白胶原蛋白
- Ⅳ型胶原蛋白在成年牦牛生精小管的定位及分布特征被引量：1
- 2015年
- 采用H．E和Masson特殊染色以及免疫组织化学法结合形态计量学统计分析，对成年牦牛（5～7岁）生精小管中的Ⅳ型胶原蛋白进行定位，研究其分布特征．结果表明：睾丸生精上皮结构清晰，有4～8层细胞，胶原纤维分布于生精小管固有膜和间质血管壁上；免疫组织化学染色观察Ⅳ型胶原蛋白在sertoli细胞、各级生精细胞及精子上呈强阳性表达，血管内皮细胞有阳性表达，生精小管基膜及管周肌样细胞为弱阳性表达，而leydig细胞几乎元表达；Ⅳ型胶原蛋白的相对表达量在sertoli细胞及各级生精细胞显著高于在leydig细胞和管周肌样细胞中（P〈0．05），但在固有膜和管周肌样细胞之间的相对表达量无显著差异（P〉0．01）．IV型胶原蛋白在成年牦牛睾丸中的分布特征与胶原纤维分布相一致，sertoli细胞和管周肌样细胞在合成及分泌Ⅳ型胶原蛋白中发挥作用．
- 路琪中袁莉刚吕亚楠周福来沈岩尔王亭亭
- 关键词：睾丸免疫组织化学染色法
- 蛋白基因产物9.5在高原黄牛与平原黄牛睾丸中分布情况的比较被引量：1
- 2014年
- 为了探索蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)在不同海拔地区黄牛睾丸组织中的分布特征及其与生精功能的关系,采用免疫组织化学SP法观察了PGP9.5在平原地区和高原地区黄牛睾丸组织中的分布特点。结果显示,PGP9.5显著分布于平原黄牛和高原黄牛睾丸Leydig细胞中,间质血管周围或血管壁内为阴性,生精小管内初级精母细胞为阴性,其余生精细胞为阳性;PGP9.5在平原黄牛Sertoli细胞为强阳性表达,而高原黄牛阳性信号有所减弱,仅在Sertoli细胞顶部呈弱阳性表达;PGP9.5阳性信号高原黄牛和平原黄牛表达均在睾丸头和睾丸尾较强,睾丸体最弱。结论:PGP9.5在不同海拔地区黄牛睾丸生精小管及Leydig细胞中均有分布,表明PGP9.5影响精子发生和激素合成等生殖机能活动;PGP9.5在高原黄牛Sertoli细胞中的分布明显较平原黄牛弱,提示高原环境对睾丸生精功能有一定影响。
- 袁莉刚曲亚玲谷来凤闫振龙田旦增
- 关键词：免疫组织化学SP法睾丸黄牛
- 不同发育阶段牦牛睾丸生精小管和间质细胞的形态学变化被引量：10
- 2014年
- 利用常规石蜡切片、HE染色进行显微结构观察并结合形态剂量学分析，研究不同年龄（3月、1岁、3岁、9岁）牦牛睾丸的显微结构，探讨不同发育阶段牦牛睾丸生精小管和间质细胞的发育及其变化规律.结果表明：3月龄牦牛睾丸生精小管细而稀疏，偶见完整的内腔，小管中仅仅是精原细胞和支持细胞，可以看见单个或者成群分布的间质细胞；1岁牦牛生精小管排列略紧密，上皮中有不同发育阶段的生精细胞，间质可见3～4群的间质细胞；3岁牦牛生精小管密集、生精小管外直径增加明显（P〈0.05），上皮细胞层数较其它年龄达到最大值，大量间质细胞出现；9岁牦牛生精小管稀疏，上皮生精细胞和间质细胞均明显减少（P〈0.05）.3月牦牛龄生精小管内无精子生成；1岁牦牛时有精子的出现，间质细胞数量逐渐增加；3岁牦牛生精小管及间质细胞发育充分，处于生殖旺盛的性成熟阶段；9岁牦牛睾丸生精小管内生精能力明显降低.
- 朱俊峰谷来凤闫振龙田旦增袁莉刚
- 关键词：牦牛睾丸生精小管间质细胞
- 不同月龄高原型藏绵羊睾丸组织中蛋白基因产物9.5和神经肽Y的分布比较被引量：4
- 2016年
- 旨在比较蛋白基因产物9.5(PGP9.5)和神经肽Y(NPY)在不同发育时期藏绵羊睾丸的组织分布特征,探索其对藏绵羊睾丸发育及生殖机能调节的相关作用。采用睾丸摘除手术收集0.5、2、5、8、12及18月龄藏绵羊睾丸,应用免疫组织化学SP法及IPP图像分析技术研究PGP9.5和NPY的分布特征。PGP9.5和NPY在0.5月龄藏绵羊睾丸组织表达量较低,生殖母细胞中基本无表达,但2月龄时,PGP9.5表达量增加极显著(P<0.01),且同年龄段PGP9.5表达量均极显著高于NPY(P<0.01),至18月龄时,PGP9.5和NPY表达量明显升高,且与0.5月龄相比差异极显著(P<0.01),二者在12月龄及以后初级精母细胞中表达均为阴性。PGP9.5在Sertoli细胞阳性信号随睾丸发育随年龄增加逐渐降低,至18月龄时基本无表达,其在各年龄段Leydig细胞及其周围血管壁呈阳性表达。NPY在Leydig细胞的阳性信号较弱,2月龄及以后各发育阶段睾丸Sertoli细胞中均为阳性表达,在血管壁的表达亦随年龄增加而增强。高原缺氧环境中,不同月龄高原型藏绵羊睾丸组织中PGP9.5和NPY的表达差异与Sertoli细胞发育及精子发生调控关系密切;PGP9.5在Leydig细胞强阳性,表明其与激素合成分泌相关,NPY表达随着月龄而增强,有利于加强睾丸血管舒缩以适应对低氧的调节,或在局部血液循环与Sertoli细胞之间物质传递发挥作用。
- 袁莉刚曲亚玲鲁玉荣李聪
- 关键词：藏绵羊睾丸年龄
- 高原地区成年藏绵羊和小尾寒羊附睾组织中eNOS差异表达研究被引量：2
- 2017年
- 采用免疫组化SP法结合IPP统计分析法,比较高原地区成年藏绵羊和小尾寒羊附睾组织中eNOS的定位及分布特征。平均光密度数据统计表明,eNOS的平均光密度值在藏绵羊附睾尾部显著高于附睾头和附睾体(P<0.05),藏绵羊附睾头和附睾体之间无显著差异(P>0.05),但在小尾寒羊附睾体显著高于附睾头(P<0.05)。小尾寒羊附睾体的平均光密度值显著高于藏绵羊(P<0.05),附睾头和附睾尾之间无显著差异(P>0.05)。结果表明,eNOS的活性在附睾尾部最高,提示NO与精子运输相关,对于高原地区不同品种绵羊附睾中eNOS分布较大差异的原因尚需深入研究。
- 成旭东范文刚赵振娜汉武娇袁莉刚
- 关键词：内皮型一氧化氮合酶藏绵羊小尾寒羊附睾免疫组织化学SP法
