国家科技支撑计划(2011BAll0804)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：孙吉平吕佳李燕尹爱萍耿瀛洲更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新月体性肾炎中肿瘤坏死因子受体的表达及信号途径新认识
- 2016年
- 肿瘤坏死因子（TNF）最初被报道可引起肿瘤细胞凋亡并引起恶液质，如今研究发现它是一个广泛的生物活性中介物，参与了细胞增殖到细胞死亡以及细胞分化过程，并引起炎性反应、调节免疫功能。TNF通过与细胞表面两个受体肿瘤坏死因子受体1和2（TNFRI和TNFR2）接触来发挥其生物学效应。这两个受体与TNF结合后，通过一系列信号转导途径，引起细胞信号输出，一方面引起组织损伤，另一方面也能激起保护性和有利的免疫应答。近年来国内外很多学者研究发现TNF和其受体参与了多种疾病的发生发展，然而它们在肾脏疾病中的作用仍不甚清楚。本文就TNF受体（TNFR）表达和信号途径的最新认识及其引起新月体性肾炎的发病机制作一论述。
- 闵璐琳倪兆慧
- 关键词：肿瘤坏死因子受体1新月体性肾炎信号途径TNF受体调节免疫功能
- 阻断Notch信号通路促骨髓间质干细胞体外分化为胰岛样细胞被引量：1
- 2014年
- 目的通过Notch信号途径抑制剂DAPT构建Notch信号敲除模型，探讨Notch信号通路在骨髓问质干细胞（BMSCs）体外分化为胰岛样细胞中的作用。方法体外分离培养BMSCs并鉴定，体外诱导其分化。用ν-分泌酶特异性抑制剂DAPT阻断Notch信号通路。采用双硫腙（DTZ）染色法鉴定胰岛细胞；间接免疫荧光染色，RT—PCR和Western印迹等方法检测诱导后细胞的胰岛素、胰高血糖素、胰十二指肠同源框1基因（Pdx-1）和神经元素3（Ngn3）的表达。ELISA法检测细胞葡萄糖刺激后分泌胰岛素水平。结果（1）BMSCs鉴定：间接免疫荧光染色结果显示：BMSCs表达CD59和CD90抗原，体外可表达神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）等神经细胞标记物，证实其具多向分化潜能。（2）MTr结果显示：ν-分泌酶抑制剂（DAPT）可抑制BMSCs增殖，其效应有时间和剂量依赖性。并以剂量和时间依赖性方式抑制Notch信号通路靶基因Hcsl的表达。用1、5、20μmol DAPT处理96h后细胞的Hesl表达分别为对照组的92．06％、71．40％、46．89％，提示其对Notch信号通路阻断率分别达到7．94％、28．6％和53．11％（均P＜0．05）。（3）间接免疫荧光结果显示：DAPT阻断组的胰岛素和胰高血糖素阳性细胞百分比较对照组明显增多[分别为（74．03±3．96）％比（36．49±3．24）％；（64．81±4．37）％比（37．50±3．69）％，均P＜0．051。提示阻断Notch信号通路后BMSCs体外分化效率增加。（4）RT-PCR和Western印迹结果提示：BSMCs诱导14d后可以检测到胰岛素、胰高血糖素表达，DAPT阻断后上述蛋白表达上调；BMSCs诱导早期（7d）即表达Pdx-1和Ngn3，14d后达到高峰，之后逐渐下降。DAPT阻断后Pdx-1和Ngn3的表达增加。（5）ELISA结果显示：诱导后细胞对葡萄糖刺激有分泌胰岛素反应，DAPT阻断后诱导细胞的反应更好。结论大鼠BM
- 张一婷尹爱平李利利孙吉平
- 关键词：间质干细胞骨髓胰岛NOTCH信号
- miR-384-5p通过阻断BMP7转录后调控促进肾纤维化被引量：3
- 2019年
- 目的研究miR-384-5p是否通过调节肾小管上皮细胞BMP7转录而影响肾纤维化。方法建立小鼠单侧输尿管阻塞模型(unilateral ureteral obstructive,UUO),流式细胞仪荧光激活细胞分选(FACS)分离肾组织获取肾小管上皮细胞进行培养,通过脂质体转染表达miR-384-5p的质粒、表达反义miR-384-5p的质粒及空白质粒;静脉注射空质粒( n =10)或反义-miR-384-5p质粒( n =10),14周后处死UUO模型小鼠,肾组织切片进行Masson三色染色评估肾纤维化程度;Western blot和实时定量PCR检测miRNA靶基因(miR-384-5p、miR-30、miR-92和miR-128)表达。结果 UUO模型14 d时肾脏出现明显纤维化,肾组织BMP7 mRNA明显增加,但BMP7蛋白无明显增加。miR-384-5p没有影响肾小管上皮细胞中BMP7 mRNA表达,但是过表达miR-384-5p的肾小管上皮细胞中BMP7蛋白明显减少,过表达反义miR-384-5p的肾小管上皮细胞中BMP7蛋白明显增加。免疫组化和定量PCR检测结果显示,UUO小鼠14 d肾组织纤维化显著增加,而注射反义miR-384-5p组肾组织纤维化程度明显减轻。虽然反义-miR-384-5p处理后不影响BMP7 mRNA水平,但能明显增加肾脏组织BMP7蛋白表达,提示抑制miR-384-5p能减轻UUO大鼠的肾损伤。结论 miR-384-5p是调节肾损伤后纤维化机制的关键因子,靶向miR-384-5p有希望成为防治肾脏纤维化的新方法。
- 张文静孙吉平吕佳李燕耿瀛洲邵耀中尹爱萍路万虹
- 关键词：肾小管上皮细胞肾纤维化
