国家自然科学基金(39970346)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 相关作者：文格波曹仁贤洪涛王红卫刘江华更多>>
- 相关机构：南华大学中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲状腺癌特异性低表达基因的筛选与克隆
- 2004年
- 目的 筛选并克隆在甲状腺癌组织中特异性低表达的基因。方法 ( 1 )应用抑制性消减杂交 (SSH)进行基因差异表达分析 ,构建人甲状腺癌组织与正常甲状腺组织之间差异表达的cDNA消减文库。 ( 2 )克隆、鉴定甲状腺癌组织特异性低表达的基因。 ( 3)登录Genbank ,运用Blastn程序进行同源性分析。 ( 4 )应用cDNA末端快速扩增法 (RACE)获取目的基因TCRS30的cDNA全长。 ( 5 )Northernblot验证TCRS30号基因的差异表达。结果 构建了高消减效率的人甲状腺癌cDNA消减文库 ,通过筛选阳性克隆 ,获得一个在甲状腺癌组织中低表达的基因片段 ,经检索Genbank表明 ,在已知的人类EST数据库中找不到高度同源的序列 ,提示它可能来自于在甲状腺癌中特异性低表达的新基因。以RACE法获知TCRS30的cDNA全长约为 4.5kb ,通过Northernblot初步验证了TCRS30号基因在甲状腺癌和正常甲状腺组织中存在差异表达。结论 通过SSH和RACE技术 ,获得了一个在甲状腺癌和正常甲状腺组织中差异表达的未知基因片段TCRS30 ,它可能代表着一条对甲状腺癌有抑制作用的新基因。
- 文格波廖二元
- 关键词：甲状腺癌抑制性消减杂交技术CDNA末端快速扩增基因
- 钙结合蛋白S100A13的研究进展被引量：8
- 2005年
- S100蛋白家族是一个钙结合蛋白家族,该家族的所有蛋白都具有与钙离子结合的空间结构,并凭借与钙离子的相互作用在体内发挥重要的生物学功能。S100A13是钙结合蛋白家族的一个较新成员,它具有S100蛋白家族的一些共性,又有其独有的结构和功能特点。S100A13通过介导FGF1和IL 1α跨膜转运,在肿瘤、炎症、动脉硬化等许多疾病的病理过程中发挥着重要作用。
- 杨靖曹仁贤文格波
- 关键词：钙结合蛋白IL-1
- 人甲状腺乳头状癌高表达基因片段筛选与克隆被引量：8
- 2004年
- 应用抑制性消减杂交技术构建人甲状腺乳头状癌cDNA消减文库 ,并从中克隆了 3个cDNA片段 ,通过测序 ,同源性分析 ,表明这些片段与来自恶性肿瘤相关基因片段具有同源性 ,提示他们可能在甲状腺癌的发生发展中起到某种重要作用。
- 王红卫洪涛刘江华曹仁贤文格波
- 关键词：克隆消减文库抑制性消减杂交技术DNA片段同源性分析
- 抑制性消减杂交法构建甲状腺癌差异表达基因文库
- 2003年
- 目的 筛选并克隆在甲状腺癌组织与正常甲状腺组织之间差异表达的基因。方法 (1)应用抑制性消减杂交(SSH)进行基因差示表达分析,构建人甲状腺癌组织与正常甲状腺组织之间差异表达的cDNA消减文库;(2)克隆、鉴定甲状腺癌组织特异性高/低表达的基因;(3)登录Genbank,运用Blastn程序进行同源性分析。结果成功构建了高消减效率的人甲状腺癌cDNA消减文库,对其中数个克隆的插入cDNA片段进行测序,经检索Genbank表明,正向SSH产物中有3个片段与来源于结肠上皮腺癌和Lung Epidermoid carcinoma的:EST有100％同源性,提示它们来自恶性肿瘤相关基因。反向SSH产物中有5个片段为未知新序列,提示它们可能来自于在甲状腺癌中特异性低表达的新基因。结论通过抑制性消减杂交技术,构建了人甲状腺癌cDNA消减文库,为下一步筛选鉴定甲状腺癌特异性基因及其全长克隆、功能研究等工作打下了基础。
- 洪涛王红卫文格波
- 关键词：甲状腺癌特异性基因基因文库
- 无血清处理对甲状腺癌TT细胞内S100A13及FGF-1释放机制的初步研究
- 2011年
- 目的探讨无血清处理人甲状腺髓样癌细胞（TY细胞）内S100A13及成纤维细胞生长因子1（FGF—1）蛋白释放的机制，初步阐明Ca^2＋在S100A13及FGF-1蛋白释放过程中的作用。方法Western印迹检测无血清处理TT细胞S100A13及FGF-1蛋白表达；ELISA检测培养上清液FGF—1蛋白浓度；激光共聚焦显微镜实时动态检测无血清处理TT细胞1h内Ca^2＋浓度（[Ca2^＋]i）变化；间接免疫荧光观察TT细胞内S100A13及FGF-1蛋白荧光分布。结果无血清处理111细胞4h和6h后S100A13及FGF-1蛋白表达降低（P〈0．05或P〈0．01），而TT细胞培养上清液中FGF-1蛋白浓度升高（P〈0．05或P〈0．01）。激光共聚焦Ca^2＋荧光显像发现无血清处理TT细胞23min内[Ca^2＋]i保持相对稳定，23min后[Ca^2＋]i迅速上升达到峰值1．6μmol／L，第40min后下降至一个较低水平，第40min至第60min[Ca^2＋]i接近0．3—0．6μmol／L。1h内TT细胞平均[Ca^2＋]i明显高于正常培养组、EGTA组和BAPTA—AM组。加入钙离子螯合剂EGTA组和BAPTA—AM组TT细胞内的S100A13、FGF-1蛋白表达无明显下降。结论无血清处理诱导，TT细胞内S100A13及FGF-1蛋白的释放与[Ca^2＋]i变化有关；Ca^2＋螯合剂EGTA、BAPTA—AM能有效拮抗无血清处理引起的TT细胞[CA^2＋]i升高，并抑制S100A13及FGF-1蛋白的释放。
- 杨井金文芳曹仁贤钟警文格波
- 抗肿瘤和乙肝双效IL18-HBVS基因疫苗的构建
- 2001年
- 目的]探讨IL_18及乙肝病毒S基因(HBVS)的联合功效。[方法]从胎肝组织中抽提总RNA ,RT-PCR扩增IL-18cDNA基因。从载体 pcDNA3.0/S中限制性酶切获取HBVS基因 ,然后 ,将其与IL -18cDNA一并亚克隆到真核表达质粒 pIRES-EGFP中。[结果]构建了具有抗肿瘤及乙肝双重功效的IL18_HBVS乙肝基因疫苗。
- 何淑雅薛志红任为刘映霞尹志华
- 关键词：基因重组人白细胞介素18乙型肝炎表面抗原
