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RNA干扰在植物中的应用被引量：2: 2011年; RNA干扰是一种进化上保守的机制,存在于植物、动物、真菌等生物中,目前已成为研究热点,在近几年得到了巨大的发展。对RNA干扰技术的发现过程、机制以及特点进行了综述,并对RNA干扰技术在植物上的应用进行了介绍,为相关研究提供信息。; 张旭张树彪金梅; 关键词：RNA干扰转录后基因沉默

Hela细胞对阳离子脂质体/DNA复合体的摄取机制被引量：2: 2011年; 该文主要研究了Hela细胞对阳离子脂质体/DNA复合体的摄取机制。通过使用抑制剂抑制真核细胞跨膜运输的相关路径,再通过阳离子脂质体将绿色荧光蛋白基因、荧光素酶报告基因转染到细胞中。利用荧光显微镜、微光检测仪定性以及定量检测不同抑制剂浓度下转染效率的差异,MTT法检测各浓度下的细胞存活率,确定对相应路径的依赖性。结果显示,在细胞存活率保持在60%以上的前提下,镜下观察到随着药物浓度的升高,荧光强度明显减弱,微光检测数据显示随着药物浓度增加,基因表达的效率具有明显的下降趋势。因此推测,Hela细胞主要通过网格蛋白以及小窝蛋白介导的路径摄取脂质体/DNA复合体,对于微管微丝介导的巨胞饮作用也具有一定的依赖性。; 丁会芹崔韶晖王冰洪洋张树彪; 关键词：阳离子脂质体基因转染抑制剂

脂质体介导RNAi的研究被引量：4: 2012年; 本文选用阳离子脂质体Lipofectamine 2000为基因载体,使用沉默荧光素酶基因的小干扰RNA(siRNA)进行体外RNA干扰(RNAi),对阳离子脂质体转运siRNA的效率进行研究。首先以阳离子脂质体运载质粒DNA转染细胞,并以延滞实验对阳离子脂质体与siRNA的结合能力进行检测;然后通过基因载体将荧光素酶基因载入细胞,转运不同浓度的siRNA对其进行沉默,应用酶标仪对荧光素酶基因的表达进行分析,并用MTT法对转染后细胞存活率进行检测。结果表明:阳离子脂质体Lipofectamine 2000可以高效转运质粒DNA,并可与siRNA很好地结合。在较低的siRNA浓度下,对荧光素酶基因的沉默率达到较高的水平,转运siRNA转染细胞对细胞活性的影响很小,但细胞存活率随着siRNA浓度的增加而逐渐降低。通过优化实验条件,阳离子脂质体转运较低浓度的siRNA即可高效沉默目的基因。; 张旭丁会芹王冰崔韶晖赵轶男金文实张树彪金梅; 关键词：RNA干扰阳离子脂质体小干扰RNA LIPOFECTAMINE

壳聚糖脂质体复合载体的核酸递送: 2012年; 目的构建一种由脂质体Lipofectamine2000、低分子质量壳聚糖、pDNA组成的三元新型复合载体用于核酸递送能力研究。方法复合物形态采用原子力显微镜轻敲模式下表征、载体与核酸结合能力采用凝胶延滞法表征,Hep-2细胞报告基因表达利用倒置荧光显微镜检测。细胞毒性研究采用3-甲基-2-噻唑硫酮(MTT)法。结果复合载体与pDNA结合能力强,可完全延滞pDNA。脂质体/壳聚糖/pDNA复合载体形态呈现出未完全压缩的球形,短棒状和不规则的聚集块。新型载体转染Hep-2细胞提高了绿色荧光蛋白报告基因的表达效率。与脂质体对照载体比较,基因转染效率提高了2～4倍,对照壳聚糖载体无明显转染效果。细胞毒性表明壳聚糖降低了脂质体的细胞毒性。结论基于脂质体的壳聚糖新型复合载体具有核酸递送潜力。; 王冰崔韶晖杨宝灵赵轶男赵不凋周集体张树彪; 关键词：壳聚糖脂质体

壳聚糖/Fe_3O_4复合纳米颗粒的制备被引量：1: 2012年; 以柠檬酸为改性剂,制备水基Fe3O4磁性纳米粒子,基于静电自组装作用,使壳聚糖分子在水溶液中包覆Fe3O4纳米晶粒,获得壳聚糖/Fe3O4复合纳米颗粒液溶胶。扫描电子显微镜(SEM)分析结果表明,复合纳米颗粒平均粒径为49.0 nm,标准差为11.0 nm。X射线衍射(XRD)和红外光谱(FT-IR)分析结果表明,复合纳米颗粒由壳聚糖分子和Fe3O4晶体粒子构成。; 石浩明张树彪陈会英赵轶男崔韶晖那立艳华瑞年; 关键词：壳聚糖四氧化三铁静电自组装复合纳米颗粒

阳离子脂质体运载基因的跨膜机制被引量：4: 2011年; 阳离子脂质体等非病毒载体以其制备简单、低毒性、低免疫原性、可生物降解等优点,成为近年来基因转运中的常用载体。理解阳离子脂质体运载基因的机制对阳离子脂质体的研究具有重要意义。从跨膜机制和信号调控的角度,介绍了脂质体/DNA复合体以特定构象避免细胞外基质中核酸酶的降解,跨越细胞膜进入细胞的过程;阐明了DNA在信号调控的作用下,逃离溶酶体并安全释放的机制;讨论了基因穿过核被膜进入到细胞核的方式,为进一步阐明阳离子脂质体运载基因的分子机制奠定基础。; 丁会芹崔韶辉王冰洪洋张树彪; 关键词：基因转染阳离子脂质体相结构内吞作用信号调控

壳寡糖季铵盐型基因载体制备的新方法研究: 2011年; 首次以甲醇/水为溶剂合成壳寡糖季铵盐型基因载体,并采用1 H NMR表征技术对合成条件进行了研究。结果表明,反应溶剂、NaOH浓度、CH3I用量、反应时间、一步法/两步法合成步骤等都会影响壳寡糖季铵盐的合成。甲醇/水溶剂比NMP溶剂更有利于壳寡糖季铵盐产品的控制、减少副反应的发生;适量的NaOH浓度,有利于壳寡糖季铵盐的合成,NaOH浓度过低,不利于季铵盐的生成,NaOH浓度过高,易发生壳寡糖3,6位-OH的甲醚化副反应;足够量的CH3I和反应时间及两步法合成步骤有利于壳寡糖季铵盐的合成。本研究为具有潜在临床应用价值的壳寡糖季铵盐基因载体提供了一种低碳、绿色、经济、环境友好的合成新方法。; 陈会英赵轶男丁雪边庆龙支德福张树彪; 关键词：壳寡糖 1H-NMR

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