国家自然科学基金(30670808)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：何泽武慧娟徐宁王露沈传陆更多>>
- 相关机构：东南大学浙江大学医学院附属儿童医院浙江省苍南县人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的影响。方法:用Western blotting方法检测阿霉素处理MCF-7细胞后不同时间该细胞表达的KIF4A蛋白;用不同浓度的阿霉素处理MCF-7细胞96h后,检测KIF4A蛋白,并进行衰老相关半乳糖苷酶染色。结果:与未用阿霉素处理的MCF-7细胞相比,阿霉素处理的MCF-7细胞表达KIF4A蛋白降低;衰老相关半乳糖苷酶染色率由5%提高到42%,染色阳性的细胞形态亦呈衰老样变。结论:阿霉素处理MCF-7细胞可使KIF4A蛋白表达水平降低,KIF4A蛋白表达降低与阿霉素引起MCF-7细胞衰老的关系有待进一步研究。
- 王露武慧娟徐宁王丛阳何泽沈传陆
- 关键词：阿霉素细胞衰老MCF-7细胞
- 人β-微管蛋白2C蛋白的原核表达与纯化被引量：2
- 2009年
- 目的构建体外原核表达和纯化人β-微管蛋白2C(TubB2C)蛋白。方法通过聚合酶链反应(PCR)扩增出人TubB2C基因完整开放读码框架(ORF),并插入pGEX-6P-1载体中构建pGEX-TubB2C重组质粒。经大肠杆菌BL21转化后,用异丙醇-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导谷胱甘肽S转移酶(GST)-TubB2C融合蛋白表达,用免疫印迹(W estern b lot)分析鉴定表达的GST-TubB2C蛋白,并在非变性条件下利用G lutath ione Sepharose 4B纯化GST-TubB2C蛋白。结果酶切分析和DNA测序表明TubB2C cDNA完整ORF以正确的阅读框架插入pGEX-6P-1载体;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示表达的GST-TubB2C蛋白相对分子量约为78 000,W estern b lot结果显示该融合蛋白可被抗GST抗体特异性识别。纯化后的GST-TubB2C蛋白纯度约90%。结论TubB2C蛋白可在体外大量表达和纯化。
- 武慧娟田田王露徐宁王丛阳何泽沈传陆
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 热应激和热惊厥幼龄大鼠海马及大脑皮层CCK蛋白表达研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨热应激（beat stress，HS）和热惊厥（febrile eonvulsiom，FC）对大鼠海马和大脑皮层胆囊收缩素蛋白（choleeystokinin，CCK）表达的影响。方法采用热水浴诱导21日龄大鼠FC模型，应用免疫组织化学技术对HS和FC大鼠CCK在海马和大脑皮层的表达进行分析。结果对照组中，大脑皮层偶见CCK零星表达。HS组CCK在大脑皮层有较弱表达，主要分布于杏仁周皮质、内嗅皮质和压部后皮质，海马未见表达。而FC组则于大脑皮层、海马见大量CCK强阳性细胞，呈弥漫性分布，无明显核团分布特征。结论CCK在FC组中大脑皮层和海马各区明显表达，表明CCK参与海马等前脑结构对惊厥活动的中枢调控机制。
- 倪宏陈大庆水泉祥
- 关键词：热性惊厥热应激胆囊收缩素
