国家自然科学基金(81061160509)
- 作品数：9 被引量：50H指数：5
- 相关作者：沈叙庄杨永弘刘岚王传清邓秋莲更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京儿童医院重庆医科大学复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染分离株毒力特征研究被引量：5
- 2015年
- 目的 探讨儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染分离株的毒力特征.方法 收集2004年6月至2012年7月4家儿童医院分离的243株MRSA,采用PCR法对MRSA进行多位点序列分型（MLST）;按随机分层抽样法对136株菌进行42种毒力基因及4种重要毒力基因hla、psmα、RNAⅢ和pvl的表达水平检测.结果 MRSA分离株大多数来源于肺炎和皮肤软组织感染（SSTIs）,占88.1％（214/243株）.243株菌检测到22种MLST,6种主要流行克隆是ST59、ST239、ST1、ST910、ST88和ST338.131株菌（96.3％）至少含有1种超抗原基因.所有菌株均携带黏附基因中的fnbA、clfA和spa.所有菌株均携带hla,psmα和RNAⅢ,pvl的携带率为39％.pvl在ST59、ST910、ST338分离株中的携带率较ST239、ST1、ST88高（P均＜0.05）.hla、smα、RNAⅢ在ST59中的表达水平较其他分型高（P均＜0.05）.社区获得性MRSA （CA-MRSA）分离株pvl的携带率高于医院获得性MRSA（HA-MRSA）分离株（48.8％比24.1％,x2 =8.356,P=0.004）,但pvl表达水平比较差异无统计学意义（t=-0.777,P=0.441）.CA-MRSA分离株hla、smα和RNAⅢ的表达水平较HA-MRSA分离株高（P均＜0.05）.肺炎分离株fnbB的携带率明显高于SSTIs分离株（27.5％比12.7％,x2 =4.050,P=0.044）,而SSTIs分离株pvl的携带率明显高于肺炎分离株（52.7％比27.5％,x22=8.186,P=0.004）.侵袭性感染分离株的hla表达水平较非侵袭性感染高（=2.433,P=0.0163）.结论 儿童MRSA感染分离株的主要流行克隆间部分毒力基因携带存在差异.CA-MRSA较HA-MRSA高表达hla、psmα、RNAⅢ,尤其是ST59型,提示该型菌株可能具有较强的致病性.fnbB与肺炎、pvl与SSTIs可能有关.菌株高表达hla可能与侵袭性感染有关.
- 董燕红李士朋乔艳红宁雪曾婷俞桑洁姚开虎高薇袁琳杨永弘沈叙庄
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌儿童毒力基因
- 儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎分离株分子及临床特征被引量：16
- 2013年
- 目的研究儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)肺炎临床分离株的分子特征、耐药性及Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因携带情况。方法 2006—2012年国内8家儿童医院在CA-MRSA肺炎患儿中分离出76株菌株;用PCR方法检测PVL基因;对所有菌株进行MLST、spa和SCCmec分型;采用琼脂稀释法进行14种抗生素的体外药物敏感试验。结果 76株CA-MRSA分离株中有32株(42.1%)携带PVL基因。在11种MLST型中,ST59(44.7%)是最主要的ST型;在17种spa型中,以t437(46.1%)为主;共有2种SCCmec型,以Ⅳ(82.9%)为主。CA-MRSA对红霉素和克林霉素的耐药率分别为86.9%和72.4%。PVL阳性菌株对庆大霉素的耐药率高于PVL阴性菌株,差异有统计学意义(53.1%比25.0%,P=0.012)。5例坏死性肺炎中4例分离株为PVL阳性T910-MRSA-Ⅳa-t318,1例为PVL阴性ST398-MRSA-Ⅴ-t034。结论 ST59-MRSA-Ⅳa-t437是儿童CA-MRSA肺炎分离株的主要流行克隆,未发现PVL与坏死性肺炎有相关性,但PVL阳性ST910-MRSA-Ⅳa-t318菌株与坏死性肺炎有关。CA-MRSA肺炎分离株对红霉素和克林霉素有较高的耐药性。
- 李士朋李娟王丽娟孙静孙明娇乔艳红宁雪曾婷杨永弘沈叙庄
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎儿童
- 儿童金黄色葡萄球菌感染分离株致病基因和相关可移动遗传元件研究被引量：2
- 2011年
- 目的研究儿童金黄色葡萄球菌(金葡菌)感染分离株中致病基因和相关可移动遗传元件的流行。方法对2005年6月至2009年7月于北京、上海等国内8家医院收集到的109株金葡菌,通过聚合酶气边反应(PCR)方法检测19种超抗原基因、2种剥脱毒素基因和3种黏附基因,并比较致病基因在不同感染菌株中的分布。结果 60株金葡菌分离自肺炎患儿,49株分离自皮肤软组织感染患儿。90.8%的菌株携带超抗原基因,最常见的超抗原基因为sek(57.8%),seq(57.8%),其次为seb(45.9%),sea(40.4%)。未检测到sed和etd。发现了37种超抗原基因型,最常见的为seb-sek-seq(20.2%),78.4%的超抗原基因型可被认为是携带超抗原基因的可移动遗传元件组合。有12株菌携带sek-seq,但不携带seb,另有1株菌携带seb-seq但不携带sek,有1株携带seb-sek但不携带seq。在tst-1阳性的菌株中,有10株同时携带seb基因。在sej阳性的菌株中,有4株同时携带ser基因。3种黏附基因bbp、sdrE、cna分别存在于91.7%、77.1%、30.3%的菌株中。seb,seq,bbp,sdrE与皮肤软组织感染有显著相关性(P<0.05),seg,sei,sen,seo,cna与肺炎有显著相关性(P<0.05)。结论引起儿童肺炎和皮肤软组织感染的金葡菌超抗原基因的分布特点提示,菌株可能携带新型可移动遗传元件或其变异体,3种黏附基因的携带率不同于其他地区,致病基因在肺炎及皮肤软组织感染中的作用尚需进一步研究。
- 李向梅吴德静耿文静刘颖超王传清邓秋莲郑跃杰刘岚李昌崇尚云晓赵长安杨永弘沈叙庄
- 关键词：金黄色葡萄球菌皮肤软组织感染致病基因可移动遗传元件
- 儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎分离株的多重耐药克隆研究被引量：5
- 2014年
- 目的研究中国儿童社区获得性耐甲氧西林金葡菌（CA—MRSA）肺炎分离株的多重耐药情况与克隆之间的关系。方法2006--2012年收集85株CA—MRSA分离株和50株医院获得性MRSA（HA-MRSA）分离株，进行多位点序列分型（MLST）和16种抗菌药物药敏试验，用脉冲场凝胶电脉（PFGE）和Southern印迹杂交定位莫匹罗星耐药基因mupA。结果CA—MRSA和HA—MRSA对红霉素和克林霉素的耐药率较高，CA—MRSA对庆大霉素、四环素和利福平的耐药率低于HA-MRSA（分别为36．5％和60．0％，P〈0．01；34．1％和54．0％，P〈0．05；8．2％和48．0％，P〈0．01），对头孢呋辛、氯霉素和红霉素的耐药率高于HA—MRSA（100％和72．0％，P〈0．01；22．3％和2．0％，P〈0．01；87．0％和72．0％，P〈0．05）。CA-MRSA多重耐药率明显低于HA-MRSA。CA-MRSA多重耐药表型呈多样化，4种克隆（ST59、ST88、ST965和ST45）的多重耐药率高于50．0％。CA—MRSA中，1株对夫西地酸耐药，5株对莫匹罗星耐药，高水平莫匹罗星耐药基因mupA位于23～54．2kb的质粒上。结论儿童CA-MRSA分离株对非β内酰胺类抗菌药物有较高的耐药率，并且多重耐药率和耐药谱与菌株克隆有关。
- 李娟王群王丽娟孙明姣李士朋孙静王传清邓秋莲郑跃杰刘岚李昌崇尚云晓赵长安杨永弘沈叙庄
- 关键词：儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多位点序列分型多重耐药
- 中国七城市儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染分离株分子学特征的研究被引量：9
- 2012年
- 目的探讨我国7个城市儿童耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）感染分离株的分子特征。方法收集2005至2009年全国7个城市（北京、上海、深圳、广州、温州、沈阳、重庆）9所三级儿童医院分离的134株MRSA。采用PCR和测序对MRSA进行多位点序列分型（MLST）和spa分型，采用多重PCR进行SCCmec分型，同时检测pvl基因。结果MRSA大多数来源于肺炎和皮肤软组织感染分离株，占82．1％；共检测到16个MLST型，最主要的sT型是ST59（44．8％），其次是ST239（16．4％）；SCCmec分型共有Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V型4型，其中Ⅳ型是最常见的SCCmec型（50．0％），其次是V型（23．9％）和Ⅲ型（23．9％），Ⅳ型中最常见的亚型是Ⅳa（77．6％）；检测到26种spa分型，最重要的spa型是t437（47．8％）；菌株的pvl携带率与菌株SCCmec分型有关，SCCmecⅣ和Ⅴ型菌株的pvl携带率大于Ⅱ和Ⅲ型（58．6％vs．14．3％，P〈0．05），且差异有统计学意义。不同疾病来源和不同地区来源的菌株，其流行克隆不同。结论2005至2009年我国儿童MRSA感染分离株的流行克隆为ST59-MRSA—IVa（t437）和ST239．MRSA—m（t037），可能分别属于社区获得性MRSA与医院获得性MRSA。因此，开展对于MRSA临床流行病学监测和分子生物学的研究十分必要，能够为制定本地区防治措施提供循证依据，从而有效降低MRSA在社区和医院内的发病。
- 刘颖超耿文静吴德静李向梅王传清陆权邓秋莲郑跃杰刘岚李昌崇尚云晓赵长安杨永弘沈叙庄
- 关键词：葡萄球菌甲氧西林抗药性细菌分型技术
- 儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤软组织感染临床分离株的分子特征及耐药性研究被引量：9
- 2013年
- 目的了解儿童社区获得性耐甲氧西林金葡菌(CA-MRSA)皮肤软组织感染(SSTIs)的临床分离株分子生物学特征及药物敏感性。方法收集儿科CA-MRSA SSTIs患儿60例,对CA-MRSA分离株进行多位点基因分型(MLST分型)、SC-Cmec分型及spa分型,同时检测pvl基因,并进行15种抗菌药物药敏试验。结果在60例SSTIs患儿中,脓肿25例(41.7%),脓疱疮12例(20.0%),其他23例(38.3%)。60株临床分离株共分出12种ST型,ST59 29株,占48.3%,ST88和ST1均为6株,各占10.0%;SCCmec分型共有4种,SCCmecⅣ型占55.0%(33/60),SCCmecⅤ型28.3%(17/60),SCCmecⅢ型15.0%(9/60),SCCmecⅡ型1.7%(1/60)。在21种spa基因型中,t437占46.7%。分离株pvl携带率50.0%。该菌对红霉素、克林霉素、庆大霉素、氯霉素、四环素、环丙沙星、甲氧苄胺-磺胺甲口恶唑、利福平、夫西地酸和莫匹罗星的耐药率分别是90.0%、80.0%、46.7%、38.3%、38.3%、33.3%、28.3%、11.6%、3.3%和3.3%。多重耐药率为73.3%。结论儿童SSTIs的CA-MRSA临床分离株最常见的克隆是MRSA-ST59-SCCmecIVa-t437和MRSA-ST59-SCCmecV-t437,多重耐药率高,在儿童CA-MRSA SSTIs的经验性治疗中不宜首选红霉素和克林霉素。
- 孙明姣王丽娟刘颖超李向梅孙静王传清邓秋莲郑跃杰刘岚李昌崇尚云晓赵长安杨永弘沈叙庄
- 关键词：社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤软组织感染细菌分型技术抗生素敏感性
- 儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎临床分离株分析被引量：6
- 2016年
- 目的探讨儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)肺炎临床分离株的分子分型特征、pvl基因携带及耐药性特点,为临床监控及治疗提供参考。方法收集2010-2015年4所医院MRSA肺炎住院患儿的临床资料和临床分离株共52株,分析其临床特点,对MRSA进行MLST、spa、SCCmec和agr分型;PCR方法检测分离株的pvl毒力基因;采用琼脂稀释法进行抗菌药物的体外药敏试验。结果 52例MRSA肺炎患儿中21例出现脓胸占40.5%,10例出现呼吸衰竭占19.2%,6例为坏死性肺炎占11.5%,21例同时合并肺外部位的感染占40.4%,5例患儿死亡,病死率9.6%;11种MLST型中ST59最常见占50.0%,其次为ST239占25.0%;SCCmec型中SCCmecⅣ占59.6%,SCCmecⅢ占28.8%;3种agr型中Ⅰ型占84.6%;ST59-SCCmec IV-t437型为主要流行克隆占44.2%;18株携带pvl基因占34.6%,主要存在于ST59型菌株中;pvl基因在坏死性肺炎分离株中的携带率明显高于非坏死性肺炎分离株(P<0.05);所有菌株的多药耐药率为55.8%,对万古霉素、利奈唑胺、夫西地酸均敏感。结论 MRSA肺炎患儿常合并肺部并发症和肺外感染灶,病死率较高,ST59-SCCmec IVt437是儿童MRSA肺炎主要流行克隆,ST59型菌株是携带pvl基因的主要克隆,pvl基因与坏死性肺炎有相关性。
- 乔艳红李娟李士朋郭素梅王秋月杨薇沈叙庄
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎儿童分子学
- 新生儿侵袭性社区获得性金黄色葡萄球菌感染的临床及分离株的分子特征被引量：2
- 2015年
- 目的了解新生儿侵袭性社区获得性金黄色葡萄球菌（CA-SA）感染的临床及分子特征。方法收集国内3所儿童医院侵袭性CA—SA感染新生儿56例并进行分析，对分离株行多位点基因分型（MLST）、SCCmec及spa分型，检测pvl基因并进行体外药物敏感试验。结果56例侵袭性CA—SA感染的新生儿中，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）感染37例（66．07％），耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染19例（33．93％）；晚发型感染48例（85．71％），16例（28．57％）需入住重症监护病房（ICU）。最常见诊断：肺炎41例（73．20％），脓毒症33例（58．93％）。MSSA组脓毒症比例（70．27％，26／37例）显著高于MRSA组（36．84％，7／19例）（P=0．016）。43例（76．79％）患儿存在多部位感染，21例（37．50％）患儿有并发症，2例患儿死亡。45例患儿（80．36％）联合使用抗生素，MRSA组使用万古霉素的比例（52．63％，10／19例）明显高于MSSA组（16．22％，6／37例）（P=0．004）；22例（39．29％）患儿接受外科干预治疗。分离株共检测到16种ST型，ST59最常见（19株，33．93％），5种SCCmec型以Ⅳ型（10株，52．63％）为主，Ⅳ亚型主要为Ⅳa（9／10株），有25种spa型，t437（17株，30．36％）为主，13株（23．21％）检测到pvl基因。各ST型在疾病谱分布上差异均无统计学意义（P均〉0．05），多重耐药率为42．86％。结论新生儿侵袭性CA—SA感染多见于重症、晚发型，以肺炎和脓毒症为主，MSSA组发生脓毒症比例高于MRSA组，多部位感染多见，联合用药和外科干预率高。分离株最常见克隆为ST59-t437，不同分型分离株感染在疾病谱上无明显差别。
- 李文婷董燕红宁雪曾婷俞桑洁姚开虎史伟高薇袁琳杨永弘沈叙庄
- 关键词：社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌侵袭性感染
- 儿科Panton-Valentine杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征及Panton-Valentine杀白细胞素基因多态性和耐药特征
- 2012年
- 目的研究儿童感染Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株分子特征、PVL基因序列变异情况及耐药特征。方法对PVL阳性MRSA感染患儿临床资料进行回顾性调查,分析病例临床特征;采用PCR联合测序对MRSA临床分离株进行多位点序列分型(MLST);并应用分段PCR扩增PVL基因,拼接序列与日本ST30 CA-MRSA菌株NN1的PVL序列进行比对,分析序列变异与STs分型之间的关系,构建系统树对PVL基因的系统发生多样性进行分析;采用琼脂稀释法进行16种抗生素的体外药物敏感试验。结果在73例PVL阳性MRSA感染病例中:皮肤软组织感染35例(47.9%),肺炎27例(37.0%),其他严重感染及健康儿童分离株中也检测到PVL基因;社区感染55例(75.3%)。感染菌株MLST分型共有9种,最常见的3种为ST59、ST910、ST338,分别占53.4%、17.8%、9.6%。PVL序列检测及比对结果:共发现9个核苷酸位点变异,其中3个为非同义突变(16 C→A,62 C→T,527 A→G),其余均为同义突变;有9种不同的单体型序列,各STs分型在9种序列中呈散在分布;所研究的MRSA 71株为H型,仅2株R型。PVL阳性MRSA菌株对红霉素、克林霉素、头孢呋辛耐药率高达94.5%、86.3%和82.2%。结论 PVL阳性MRSA分离株来源广泛,以皮肤软组织感染和肺炎为主;分子分型以ST59型最为常见;lukSF-PV序列高度保守,序列变异主要为H型,R型罕见。
- 孙静李向梅孙明姣王丽娟刘颖超王传清邓秋莲刘岚杨永弘沈叙庄
- 关键词：甲氧西林耐药
