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国家自然科学基金(30471999)
作品数:
3
被引量:7
H指数:2
相关作者:
刘娜
孙志扬
李杨
宋海燕
孙庆文
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相关机构:
同济大学附属东方医院
复旦大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
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文献类型
3篇
中文期刊文章
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医药卫生
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BCL-2
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蛋白结构
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突变
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基因
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基因突变
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DOMAIN
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LOOP
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脱噬作用
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细胞
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纤维细胞
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NIH3T3
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成纤维细胞
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同济大学附属...
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复旦大学
作者
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孙志扬
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刘娜
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宋海燕
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李杨
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孙庆文
传媒
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中华急诊医学...
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中华实验外科...
1篇
复旦学报(医...
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2009
1篇
2007
1篇
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bcl-2及其重要功能结构域在调节成纤维细胞NIH3T3凋亡中的研究
被引量:5
2009年
目的以成纤维细胞NIH3仍作为细胞模型,探讨bel-2Loop Domain结构域在成纤维细胞凋亡中的作用地位。方法构建正常和Loop Domain结构域突变bcl-2基因的真核表达质粒,用于成纤维细胞转染;脂质体介导,分别将(1)空载体质粒(2)携带bcl-2基因质粒和携带突变基因的质粒转染成纤维细胞(NIH3T3),转染后用肿瘤坏死因子(TNF)-α刺激NIH3T3细胞诱导凋亡,应用流式细胞仪(FCM)检测各组细胞凋亡,应用华联小鼠全基因表达谱芯片检测各组细胞基因表达谱的变化。结果成功构建bcl-2基因和Loopdomain中突变的真核表达载体;成功将携带突变基因、野生基因的质粒转染人NIH3T3细胞;各组转染后用TNF-α刺激细胞诱导凋亡,FCM检测发现,TNF-α刺激细胞17h后,NIH3T3未转染细胞凋亡明显增加,细胞凋亡率为(53.18±8.18)%,NIH3T3转染野生型bcl-2质粒组与NIH3T3未转染细胞组比较细胞凋亡率明显下调;NIH3T3转染突变bcl-2质粒组与NIH3T3未转染细胞组比较细胞凋亡率差异无统计学意义(P〉0.05);NIH3T3转染野生型bcl-2质粒组与NIH3T3转染突变bcl-2质粒组比较细胞凋亡率明显上调;基因芯片检测发现:转染bcl-2基因的NIH3T3细胞凋亡基因与转染空质粒组下调,转染Loopdomain突变的真核表达载体的NIH3T3细胞凋亡基因比转染bcl-2基因的NIH3T3细胞上调。结论证实bcl-2基因Loopdomain结构域突变对bcl-2基因功能产生明显影响,bcl-2基因Loopdomain结构域突变使NIH3T3细胞凋亡产生明显变化。
孙志扬
刘娜
关键词:
成纤维细胞
BCL-2
LOOP
DOMAIN
脱噬作用
Bcl-2环状结构域对Bcl-2蛋白结构的影响
被引量:2
2007年
目的探讨Bcl-2 Loop domain环状结构域安全检查突变对Bcl-2蛋白结构的影响。方法在同济大学附属东方医院细胞治疗室分别对Bcl-2 Loop domain结构域的55和70位氨基酸行点突变及对Bcl-2 Loop domain结构域行缺失突变并应用PCR及Western blot方法检测Bcl-2 Loop domain结构域突变前后Bcl-2蛋白的表达变化。结果对Bcl-2 Loop domain结构域的55和70位氨基酸进行点突变组,Bcl-2蛋白在上清中和沉淀中均能检测到,对Bcl-2 Loop domain结构域行缺失突变组Bcl-2蛋白只在沉淀中表达,在上清中未检测到。结论Bcl-2 Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中起到重要作用。
孙志扬
刘娜
李杨
宋海燕
关键词:
基因突变
Bcl-2 loop domain在Bcl-2蛋白结构中的作用初探
2006年
目的探讨B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中的作用。方法应用PCR及Western blot方法检测Bcl-2 Loop domain结构域突变前后Bcl-2蛋白的表达情况。结果Bcl-2 Loop domain结构域突变后Bcl-2蛋白只在沉淀中检测到,在上清中未检测到。结论Bcl-2 Loop domain结构域被突变后,Bcl-2蛋白空间结构发生改变,推测Bcl-2 Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中起到重要作用。
刘娜
孙志扬
李杨
宋海燕
孙庆文
关键词:
基因突变
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