国家自然科学基金(31071278)
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- Hsa-miR-200a真核表达载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的:通过构建及鉴定miR-200a的真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-200a,为进一步研究miR-200a的功能奠定实验基础。方法:RT-PCR扩增pre-miR-200a基因序列,连接于表达载体pcDNA3.1(+)中,对重组质粒双酶切鉴定并测序验证。结果:pcDNA3.1(+)-miR-200a真核表达载体经酶切及测序鉴定正确。结论:pcDNA3.1(+)-miR-200a真核表达载体构建成功,为下一步深入研究miR-200a的生物学功能和验证miR-200a的靶基因提供有效工具。
- 陈倩陈雪梅何俊琳王应雄丁裕斌杨德辉刘学庆
- 关键词:MICRORNAS真核表达载体肿瘤
- IK细胞因子在小鼠早孕期子宫内膜的表达规律及其在胚胎着床中的作用
- 2012年
- 通过Real-time PCR、Western blot及免疫组织化学方法分析了IK细胞因子(IK cytokine)在早孕小鼠(妊娠D1-D7)子宫内膜中的表达规律及宫角注射IK细胞因子反义寡聚脱氧核苷酸后对胚胎着床的影响。结果显示,IK细胞因子mRNA表达在D1-D4逐渐升高,于D4达到高峰(P〈0.05);Western blot和免疫组织化学结果与Real-time PCR结果基本一致,其蛋白表达在D1-D5逐渐升高,于D5达到高峰(P〈0.05);IK细胞因子在D5胚胎着床点的表达显著高于着床旁组织;假孕小鼠子宫内膜IK细胞因子蛋白表达明显低于正常妊娠,且整个假孕过程中没有表达高峰;宫角注射IK细胞因子反义寡聚脱氧核苷酸后24 h和48 h(即D4和D5)子宫内膜IK细胞因子表达明显受到抑制,MHCⅡ抗原表达增强,且胚胎着床数量明显减少(P〈0.05),提示IK细胞因子在胚胎着床中发挥着重要作用。
- 邵如月刘学庆丁裕斌陈雪梅高茹菲王应雄何俊琳
- 关键词:胚胎着床免疫耐受