上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金(slg-07046)
- 作品数：3 被引量：21H指数：2
- 相关作者：蔡文杰朱依纯琚立华王铭洁张宇玲更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院上海理工大学更多>>
- 发文基金：上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金上海市教育委员会创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 硫化氢的治疗性应用研究进展被引量：18
- 2009年
- 硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳后的第3个气体信号分子,具有广泛的生物学效应,在多种疾病状态中显示了极大的治疗性应用前景。该文结合H2S研究的最新进展围绕其治疗性应用作一综述。
- 蔡文杰琚立华朱依纯
- 关键词：硫化氢心血管系统代谢胱硫醚-Γ-裂解酶
- 显性负突变存活素质粒的构建
- 2009年
- 目的构建显性负突变存活素质粒。方法从大鼠心脏微血管内皮细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,利用巢式PCR扩增存活素基因全序列,并引入酶切位点,利用重叠PCR对存活素基因进行定点突变,然后与带绿色荧光的真核表达载体pEGFP-N3进行重组,经测序鉴定后转染细胞,观察对细胞凋亡的影响。结果用巢式PCR扩增出含存活素基因的496 bp产物,和引入酶切位点后的452 bp产物。通过重叠PCR 3次PCR反应,得到452 bp大小的定点突变产物。重组载体经测序鉴定表明插入片段无误,转染细胞后能发出明亮的绿色荧光,Hochest染色显示细胞凋亡比空质粒对照组显著。结论成功构建了显性负突变存活素质粒。
- 蔡文杰王铭洁张宇玲琚立华朱依纯
- 关键词：存活素重叠PCR
- 胱硫醚-γ-裂解酶在三种微血管内皮细胞上的表达被引量：3
- 2009年
- 目的鉴定微血管内皮细胞上是否表达生成硫化氢(H2S)的酶,为深入研究硫化氢的心血管作用提供新线索。方法原代培养大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC),设计相应引物后用RT-PCR的方法检测胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因转录情况,进一步用兔抗大鼠CSE和CBS多克隆抗体对CMEC进行蛋白水平的免疫荧光染色。此外对另两种微血管内皮细胞株RF/6A和bEnd.3也检测了H2S生成酶的表达。结果三种微血管内皮细胞都扩增出CSE基因的特异条带,而CBS基因都未扩增出相应产物。CMEC的免疫荧光染色显示CSE抗体染色为阳性,CBS抗体染色为阴性。结论首次发现了微血管内皮细胞上存在CSE的表达,提示内皮细胞可以通过生成硫化氢调节心血管活动。
- 蔡文杰王铭洁张宇玲金惠铭朱依纯
- 关键词：硫化氢胱硫醚-Γ-裂解酶微血管内皮细胞
