山东省医药卫生科技发展计划项目(2009HW106)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：刘雨清李媛媛张宝刚赵云徐滨更多>>
- 相关机构：潍坊医学院潍坊市中医院泰安市肿瘤防治院更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目国家自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小RNA干扰降低COX-2表达对乳腺癌细胞趋化和侵袭能力的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨利用小RNA干扰技术降低COX-2表达对高度恶性乳腺癌MDA-MB-231细胞趋化和侵袭能力的影响。方法应用合成的小RNA干扰质粒转染MDA-MB-231细胞株,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2mRNA的表达。通过趋化运动实验检测细胞的运动能力;体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力。结果限制性内切酶的酶切结果和DNA测序结果显示成功构建了干扰质粒pSUPER-siCOX-2,转染后的细胞株分别命名为MDA-MB-231/pSUPER-basic(对照组)和MDA-MB-231/pSUPER-siCOX-2(实验组)。转染后48h,与MDA-MB-231/pSUPER-basic细胞相比,MDA-MB-231/pSUPER-siCOX-2细胞的COX-2mRNA表达水平下降(P<0.01);COX-2减低的乳腺癌细胞的趋化运动能力比对照组细胞降低(P<0.01);COX-2减低的乳腺癌细胞侵袭并穿透Matrivgel膜基质的细胞数量比对照组细胞少(P<0.01)。结论利用siRNA干扰技术降低COX-2表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞株的趋化和侵袭能力具有明显的抑制作用。
- 赵云李媛媛张宝刚刘秀静徐滨赵一诺刘雨清王琳
- 关键词：环氧合酶-2乳腺肿瘤RNA干扰
- 乳腺癌中mTOR、CCR7的表达及与淋巴结转移的关系被引量：5
- 2013年
- 目的探讨乳腺浸润性导管癌中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)与趋化因子受体7(chemokine receptor 7,CCR7)的表达以及与乳腺癌侵袭、转移之间的关系。方法采用免疫组化MaxVision法检测105例乳腺浸润性导管癌、55例转移淋巴结及40例正常乳腺组织中mTOR和CCR7的表达,并分析mTOR和CCR7的表达与乳腺癌侵袭和淋巴结转移的关系以及二者之间的相关性。结果 mTOR在乳腺浸润性导管癌、转移淋巴结及正常乳腺组织中的阳性率分别为68%(71/105)、93%(51/55)、25%(10/40),差异有统计学意义(P<0.05);CCR7在乳腺浸润性导管癌、转移淋巴结及正常乳腺组织中的阳性率分别为74%(78/105)、94%(52/55)、28%(11/40),差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌中,mTOR和CCR7的表达呈正相关(rs=0.203,P<0.05)。mTOR和CCR7的高表达均与淋巴结转移有关(P<0.05)。结论mTOR和CCR7的异常高表达可能与乳腺癌的侵袭、转移有关,且检测二者的表达可作为判断乳腺癌转移及预后的预测指标。
- 刘清华孙磊李媛媛李小龙王竹青刘雨清
- 关键词：乳腺肿瘤浸润性导管癌MTORCCR7
- 降低COX-2表达与乳腺癌细胞迁移和侵袭关系的研究
- 2011年
- 目的 探讨利用小RNA干扰技术降低COX-2表达对高度恶性乳腺癌MDA-MB-231细胞趋化和侵袭能力的影响.方法 应用合成的小RNA干扰质粒转染MDA-MB-231细胞株,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测COX-2mRNA的表达.通过划痕实验检测细胞的运动能力;体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力;应用细胞黏附实验检测细胞的黏附能力.结果 限制性内切酶的酶切结果显示成功构建了干扰质粒pSUPER-siCOX-2,转染后的细胞株分别命名为MDA-MB-231/pSuPER-basic和MDA-MB-231/pSuPER-siCOX-2.转染后48h,与MDA-MB-231/pSUPER-basic细胞相比,MDA-MB-231/pSUPER-siCOX-2细胞的COX-2 mRNA表达水平下降（P＜0.01）;COX-2减低的乳腺癌细胞单位时间内向划痕移动的距离比对照组细胞减少（P＜0.05）;黏附实验结果显示：黏附5min,15min后,COX-2减低的乳腺癌细胞比对照组的黏附细胞数量均减少（P＜0.01）;COX-2减低的乳腺癌细胞侵袭并穿透Matrigel的细胞数量比对照组细胞少（P＜0.01）.结论 利用siRNA干扰技术降低COX-2表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞株的迁移和侵袭能力具有明显的抑制作用.
- 赵云李媛媛张宝刚徐滨赵一诺王琳刘雨清
- 关键词：环氧化酶-2乳腺肿瘤RNA干扰
- 小RNA干扰降低COX-2表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨小RNA干扰对MDA-MB-231乳腺癌细胞株COX-2蛋白表达及增殖凋亡的影响。方法:应用已合成的小RNA干扰质粒转染MDA-MB-231细胞株,采用免疫荧光技术和蛋白印迹法(Westernblotting)检测COX-2蛋白的表达;通过MTT实验和流式细胞术分别检测siRNA后对细胞增殖和凋亡的影响结果:转染后72 h,与阴性对照组细胞相比,实验组细胞的COX-2蛋白表达水平明显下降(P<0.01);COX-2减低的乳腺癌细胞的增殖能力比对照组细胞明显受抑制(P<0.05);流式细胞仪检测实验组细胞与阴性对照组细胞相比早期凋亡增加(P<0.05)。结论:利用siRNA技术能够显著抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231中COX-2蛋白的表达;同时能够明显抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖,并可诱导其凋亡的发生。
- 徐滨李媛媛张宝刚赵云刘雨清
- 关键词：乳腺肿瘤环氧化酶-2RNA干扰
- 乳腺癌mTOR基因和蛋白表达与侵袭转移的关系
- 2013年
- 目的探讨mTORmRNA及编码蛋白在人乳腺浸润性导管癌组中的表达水平及其与侵袭、转移的关系。方法采用原位杂交法和免疫组化(PV-9000)法分别检测65例乳腺浸润性导管癌及32例癌旁正常乳腺组织中mTORmRNA及蛋白水平的表达情况。结果 mTORmR NA在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率(69%,45/65)高于癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率(31%,10/32),差异有统计学意义(P<0.01);mTOR蛋白在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率(68%,44/65)高于癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率(25%,8/32),差异有统计学意义(P<0.01)。同时,mTORmRNA和蛋白表达水平与乳腺浸润性导管癌的淋巴结转移呈显著正相关(P<0.05),且原位杂交和免疫组化两种检测方法的结果呈显著关联(P<0.05)。结论 mTOR信号通路的激活和异常表达,可能与乳腺癌的侵袭和转移有关,且检测mTORmRNA及蛋白表达水平可作为评价乳腺癌预后的重要指标。
- 刘清华孙磊李小龙刘雨清
- 关键词：免疫组化原位杂交
