国家自然科学基金(30670894)
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
- 相关作者：牛继红阮国瑞李金兰黄晓军谢敏更多>>
- 相关机构：北京大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京大学人民医院研究与发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 急性髓性白血病N-ras基因突变的检测及临床意义被引量：1
- 2010年
- 目的研究急性髓性白血病(AML)患者中N-ras基因突变的检出率及其临床意义。方法采用聚合酶链式反应(PCR)及序列分析方法检测117例初治AML患者N-ras基因第12、13和61位密码子的突变情况。结果在117例AML患者中,发现N-ras基因突变9例,包括50例FAB分型M2中1例,35例M4中5例,16例M5中2例及6例M6中1例,而在2例M0、2例M1及6例M3中未发现N-ras基因突变,总检出率为7.7%。共检出3例第12密码子GGT→GAT突变,1例第13密码子GGT→GAT突变和5例第61密码子突变(包括3例CAA→CGA突变,1例CAA→AGA突变,1例CAA→AAA突变)。N-ras突变在正常核型中的检出率(4/30,13.3%)高于在异常核型中的检出率(1/19,5.3%),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论在AML患者中可以检测到N-ras基因突变,该突变可发生在N-ras基因的第61、12和13密码子,可能在AML发病机制中发挥一定作用。
- 张瑶牛继红李玲娣李金兰秦亚溱赖悦云刘艳荣陈珊珊黄晓军阮国瑞
- 关键词：聚合酶链反应
- 实时定量PCR检测人白血病细胞hTERT mRNA的临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的利用实时荧光定量RT-PCR方法,检测白血病细胞人类端粒酶反转录酶(hTERT)的表达水平并探讨其临床意义。方法采用基于TaqMan荧光技术的实时定量RT-PCR方法检测白血病患者骨髓单个核细胞及10种白血病细胞系hTERT mRNA拷贝数,来自同种基因移植供者的正常人骨髓细胞作为对照。结果与28例正常人组相比,33例AML1/ETO融合基因阳性的急性髓性白血病(AML)患者骨髓细胞hTERT mRNA水平较高,中位数分别为8.96%(0.23%～76.73%)和4.20%(0.21%～19.90%)(P<0.01)。47例B-ALL患者骨髓细胞hTERT mRNA水平中位数为20.80%(0.25%～1566.34%),高于正常人组(P<0.001)及156例AML组(中位数为2.06%,范围为0～2133.41%)。70例慢性髓性白血病(CML)、36例M3型白血病患者hTERT mRNA水平中位数分别为0.57%(0～14.77%)、0.53%(0～11.10%),均低于正常人组(P均<0.001)。15例治疗后达到完全缓解的急性白血病患者与初治时相比,hTERT mRNA水平明显下降,中位数分别为46.53%(8.96%～218.10%)和2.25%(0.18%～45.85%)(P<0.001)。10种白血病细胞系的hTERT mRNA水平差异甚大。结论 hTERT mRNA在人白血病细胞中的表达水平存在异质性。高表达hTERT mRNA可能是B-ALL及AML1/ETO阳性的AML发病机制中的因素之一。
- 谢敏江滨李金兰李玲娣张瑶牛继红秦亚溱刘艳荣陈珊珊黄晓军阮国瑞
- 关键词：白血病逆转录聚合酶链反应HTERT
- Pdcd5基因在多发性骨髓瘤患者中的异常表达被引量：8
- 2010年
- 本研究探讨骨髓瘤患者骨髓细胞中pdcd5基因的表达。应用ELISA方法和实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time quantitative RT-PCR,RQ-RT-PCR)技术,检测多发性骨髓瘤(MM)患者及正常人PDCD5蛋白和基因的表达,比较pdcd5基因的表达与患者临床特征的关系。结果表明:45例初治及难治复发MM患者血浆PDCD5蛋白水平显著低于20例健康人和20例治疗有效患者,分别为(16.91±0.28)ng/ml,(19.11±0.29)ng/ml,(17.94±0.154)ng/ml(p均<0.05)。45例初治及难治复发MM患者骨髓细胞pdcd5基因表达量显著低于正常人,分别为0.64±0.47和1.28±1.21,p<0.05。结论:多发性骨髓瘤患者低表达PDCD5,pdcd5基因可能参与了MM的发病机制。
- 鲍立阮国瑞卢锡京张晓辉路瑾牛继红张瑶谢敏秦亚溱李玲娣李金兰刘艳荣陈珊珊黄晓军
- 关键词：多发性骨髓瘤骨髓细胞
- 多发性骨髓瘤病人骨髓细胞中Cmtm5基因异常低表达被引量：4
- 2010年
- 本研究检测cmtm5(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing member5)基因在多发性骨髓瘤(MM)骨髓细胞中的表达水平,并探索其与临床特征的关系。应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time quantitative RT-PCR,RQ-RT-PCR)技术检测MM患者骨髓细胞、MM细胞系及正常人骨髓细胞cmtm5基因的表达。以cmtm5拷贝数与abl拷贝数的比值表示cmtm5基因的相对表达水平。结果表明,51例初治及难治复发MM患者骨髓细胞cmtm5表达量(0.047±0.062)显著低于20例正常人骨髓细胞cmtm5表达量(0.255±0.333,p<0.01)。ISSⅢ期患者组cmtm5基因表达量(0.034±0.034)显著低于ISSⅠ期患者组的表达量(0.103±0.109,p<0.01)。两种人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226及CZ1的cmtm5基因表达量(为0.014±0.009、0.004±0.006)均低于正常人骨髓细胞。15例治疗有效患者的cmtm5基因表达量与治疗前及复发时相比显著升高(0.020±0.005;0.227±0.038,p<0.01)。cmtm5基因的表达量与骨髓浆细胞比例呈负相关(r=-0.307,p<0.05),而与性别、年龄、血红蛋白水平、M蛋白量、免疫球蛋白分型、IgH是否阳性等没有明显的相关性。结论:多发性骨髓瘤患者骨髓细胞cmtm5基因表达水平降低,且与ISS分期有关,与骨髓浆细胞数呈负相关,此结果说明cmtm5基因在MM的发病机制中发挥一定作用。
- 牛继红鲍立张瑶李金兰李玲娣谢敏秦亚溱赖悦云江倩史惠琳刘艳荣江滨陈珊珊黄晓军阮国瑞
- 关键词：多发性骨髓瘤骨髓细胞
- 携带Pdcd5基因的三调控增殖性腺病毒的构建及鉴定被引量：2
- 2009年
- 本研究旨在构建一种表达pdcd5基因的三调控增殖性腺病毒。应用DNA重组技术将pdcd5 cDNA插入三调控条件增殖性腺病毒SG600的E3区,SG600病毒系统是运用人端粒酶反转录酶基因启动子(hTERTp)和缺氧反应元件(HRE)分别调控病毒复制必须基因E1a和E1b的表达,去除E1a基因CR2区中24个核苷酸而构建成的靶向肿瘤细胞增殖的病毒系统。采用酶切及PCR鉴定并筛选重组成功的质粒。荧光显微镜下观察带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组腺病毒SG611-EGFP对白血病细胞系的感染效率。实时定量PCR检测感染重组腺病毒SG611-pdcd5的K562细胞pdcd5的表达水平。结果显示,构建的SG611-pdcd5病毒能扩增出hTERTp、HRE、pdcd5基因以及腺病毒骨架和11型纤突结基因序列。SG611-EGFP对白血病细胞系K562和MEG-01的感染效率均能达到70%以上。感染SG611-pdcd5的K562细胞pdcd5的表达水平较SG611空载体和携带pdcd5的非增殖性腺病毒(Ad-pdcd5)明显增加(p<0.001),其表达水平随感染复数增加而升高。结论:成功构建了三调控增殖性腺病毒SG611-pdcd5,后者能高效感染白血病细胞系并高效表达pdcd5,为进一步运用pdcd5靶向肿瘤细胞进行基因治疗的研究提供了基础。
- 谢敏吴红平李琳芳牛继红常艳李金兰黄晓军阮国瑞
- 关键词：基因治疗白血病
