国家自然科学基金(81071557)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
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- Notch信号通路激活／抑制对表皮干细胞增殖和分化的影响被引量：9
- 2013年
- 目的观察Notch信号通路激活或抑制对表皮干细胞增殖和分化的影响。方法体外分离培养并纯化大鼠表皮干细胞，分组加人Notch信号激活剂Jaggedl/FC蛋白（1000 μg/L）和抑制剂分泌酶抑制剂（DAPT，16 μmoVL），空白对照加磷酸盐缓冲液（PBS），共培养48 h后，通过观察各组细胞形态学变化、克隆计数、噻唑蓝（MTT）法检测吸光度（4）值，比较各组表皮干细胞的增殖能力;通过流式细胞仪及免疫细胞组化法检测细胞表面标记物蚪整合素（CD29）及角蛋白CK19、CK10的阳性细胞百分比，比较各组表皮干细胞的分化。结果3组细胞形态无明显差异。分组培养第5天，Jaggedl/FC组贴壁细胞的克隆计数为（45. 7 ±3. 8）个,显著高于DAPT组[（16. 9 ±2.1）个]及对照组[（33. 4 ±3.1）个，p〈0.05] ;MTT法检测细胞增殖能力，Jaggedl/FC组明显高于对照组，DAPT组明显低于对照组（P 〈0.05）;流式细胞仪检测Jaggedl/FC组的pi整合素表达率（96. 42 ±2.57）%显著高于DAPT组[（72.58 ±3.87）%]及阴性对照组[（88.75 ±3.14）%，p〈0.05]。免疫组织化学CK19阳性细胞百分比Jaggedl/FC组明显高于对照组，DAPT组明显低于对照组（p 〈0. 05）;而CK10阳性细胞百分比Jaggedl/FC组明显低于对照组,DAPT组明显高于对照组（P 〈0. 05） 0结论激活Notch信号通路能促进表皮干细胞增殖并维持低分化状态，而抑制Notch信号通路能促进表皮干细胞向表皮细胞分化。
- 杨荣华谢举临舒斌张利军施彦祁少海
- 关键词：表皮干细胞NOTCH增殖分化
- α1（I）型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸对人增生性瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨应用α1（I）型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸对增生性瘢痕成纤维细胞生长、胶原合成等生物学特性的影响。方法根据转染液分3组，实验组为脂质体加α1（I）型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸；对照组1为脂质体组；对照组2为培养基空白对照组。用脂质体法将α1（I）型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸转染增生陛髓魔成纤维细胞并运细胞计数法绘制细胞生长曲线；电子透射电镜观察转染后各组ttF超微结构的变化；转染后0．5、1、3、5、7d分别提取各组细胞总RNA，行RT-PCR后测定各组I胶原mRNA表达量；Western．bloring法检测转染后各组琏!胶原蛋白的变化。结果①反义寡聚脱氧核苷酸对增生陛瘢痕成纤维细胞生长增殖无抑制；②实验组增生l生瘢痕成纤维细胞蛋白合成的细胞器呈非活跃状态；③与对照组比较，实验组HF的a。（I）型前胶原蛋白mRNA的表达和例胶原合成量明显减少。结论α1（I）型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸能抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的α1（I）型前胶原蛋白mRNA的表达和理I胶原蛋白的合成，提示可能抑制瘢痕增生。
- 邢帮荣利天增谢举临徐盈斌祁少海
- 关键词：增生性瘢痕成纤维细胞I型胶原蛋白反义寡聚脱氧核苷酸
- 转化生长因子-β1诱导大鼠毛乳头细胞转分化为成纤维细胞的研究被引量：2
- 2011年
- 目的研究大鼠触须毛乳头细胞在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导作用下转分化为成纤维细胞的可能性,从新的角度探讨增生性瘢痕的形成机制。方法消化收集第4代毛乳头细胞,处理组以TGF-β1(10ng/mL)处理细胞4d;对照组加入正常培养基(不含胎牛血清的DMEM/F12培养液),每隔24h观察两组细胞生长形态及生长方式;分别用实时一步法RT-PCR和流式细胞仪检测细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达和蛋白表达,Western blotting检测成纤维细胞特异蛋白(FSP1)的表达。结果流式细胞仪检测TGF-β1诱导48h、72h后α-SMA表达明显低于对照组(P<0.01);TGF-β1诱导48h、72h、96h后Vimentin表达明显高于对照组(P<0.01)。实时一步法RT-PCR检测Vimentin的mRNA表达逐渐增强,α-SMA的mRNA表达在48h后明显下降(P<0.01),但96h后表达又有所增加;Western blotting法检测FSP1表达在诱导48h后逐渐增加(P<0.01)。结论毛乳头细胞经TGF-β1诱导后,失去其典型的细胞形态及生长方式,而表现出成纤维细胞的细胞形态及生长方式;其相对特异性标记物α-SMA的表达下降,而成纤维细胞的相对特异性标记物Vimentin和FSP1表达增加。故TGF-β1可诱导大鼠毛乳头细胞转分化为成纤维细胞。
- 李厚东舒斌徐盈斌祁少海谢举临
- 关键词：转化生长因子Β毛乳头细胞成纤维细胞
