国家自然科学基金(39970315)
- 作品数：9 被引量：23H指数：4
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- 正常人与白血病患者GPI-PLD基因外显子1多态性分析被引量：2
- 2004年
- 禹虹唐建华王依丹张晓杰顾善兰谭玎
- 关键词：白血病多态性染色体
- PSCA与前列腺癌研究进展被引量：2
- 2012年
- 前列腺干细胞抗原(prostate stem cell antigen,PSCA)是一种前列腺癌相关肿瘤抗原,也是一种GPI(gly-cosyl phosphatidylinositol)锚定蛋白,通过其C端的GPI锚定结构锚定到细胞膜表面.PSCA在正常前列腺组织中的表达较低,提高的PSCA表达伴随着增加的肿瘤分期、分级以及雄激素非依赖性和转移癌的形成,且不随癌症进展而降低,是前列腺癌诊断和治疗的理想靶抗原.动物实验显示,PSCA抗体和疫苗可能在前列腺癌免疫靶向治疗中具有重要价值.
- 卢永娟唐建华
- 关键词：前列腺干细胞抗原前列腺癌免疫治疗
- 几种肝脏疾病血清中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的活性改变被引量：4
- 2001年
- 目的 观测几种肝脏疾病患者血清中糖基化磷脂酸肌醇特异性磷脂酶D(GPI -PLD)的活性改变。方法 利用自制的具完整糖基化磷脂酰肌醇 (GPI)结构的胎盘型碱性磷酸酶 (PLAP)做底物 ,通过TX - 114分相 ,定量测定血清GPI-PLD的活性 ,用SPSS 10 0统计软件分析资料。结果 检测 172例肝脏疾病患者 (包括A组 :2 6例急性重症病毒性肝炎 ;B组 :2 9例肝硬化 ;C组 :32例慢性病毒性肝炎 ;D组 :55例急性非重症病毒性肝炎 ;E组 :30例原发性肝癌 )血清中GPI -PLD的活性 (转化底物的百分率 ) ,发现A、B两组患者的该酶活性较正常人 (182名 )显著性降低 ,而D、E两组则较正常人显著性增高 ,C组患者的酶活性与正常人无显著性差异 ,但A、B、C、D、E两组之间的酶活性水平改变却均有显著性。结论 检测患者血清GPI -PLD活性水平 ,既可作为临床诊断急性病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝癌等肝脏疾病的一项生化指标 ,也可作为这些疾病临床疗效和预后的一项判断指标。
- 唐建华李文凯谢玉桃罗秀菊顾善兰彭小玲谢妮
- 关键词：肝疾病血清磷脂酶DGPI-PLD
- 胰岛素诱导肝癌HepG2细胞株GPI-PLD基因的表达及其免疫学效应
- 目的初步研究胰岛素对HepG2细胞GPI-PLD基因表达和GPI-PLD酶活性的影响,以及对细胞膜上GPI锚定蛋白质如CEA分子的释放改变,这些效应是否能够提高HepG2细胞和GPI-PLD基因转染HepG2细胞对淋巴因...
- 唐建华王锴佳卢永娟李娜
- 关键词：糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D糖基化磷脂酰肌醇胰岛素
- 文献传递
- 人骨髓基质细胞中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶DcDNA的克隆被引量：7
- 2002年
- 为探讨人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI PLD)cDNA的结构及功能 ,应用RT PCR从人骨髓基质细胞中克隆了长约 2 6kb的GPI PLDcDNA ,包含完整阅读框架 ,编码 2 3个氨基酸的信号肽及 817个氨基酸的成熟肽 .该cDNA与人胰腺GPI PLDcDNA几乎百分之百同源 ,与人肝脏GPI PLDcDNA同源性为 95 %,氨基酸同源性为 94 %,3者对应的结构基因只有 1个 ,位于人类第 6号染色体上 ,基因组序列长约 80kb ,包括 2 5个外显子 .构建克隆的GPI PLDcDNA的真核表达载体 ,通过脂质体转染能表达GPI锚定的胎盘型碱性磷酸酶 (PLAP)而无GPI PLD活性的G9细胞 ,同时设立对照组检测GPI PLDcDNA的功能 .结果显示 ,对照组细胞几乎检测不到GPI PLD活性 ,其表达的PLAP主要位于细胞膜上 ;而转染GPI PLDcDNA的G9细胞能检测到较高水平的GPI PLD活性 ,而且大部分酶活性存在于培养液中 ,其表达的PLAP也主要被释放入培养液 .结果证实 ,从人骨髓基质细胞中克隆的GPI PLDcDNA有生物学功能 ,它能释放细胞膜上GPI锚定蛋白质 .
- 顾善兰唐建华张晓杰
- 关键词：人骨髓基质细胞糖基化磷脂酰肌醇CDNA克隆
- 正常人与系统性红斑狼疮患者白细胞GPI-PLD基因多态性分析被引量：4
- 2003年
- 目的 检测湖南地区汉族系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus ,SLE)患者外周血白细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D (glycosylphosphatidylinositol-specificphospholipaseD ,GPI -PLD)基因外显子 1及外显子 2 5多态性、白细胞GPI -PLD活性及二者关系。方法 聚合酶链式反应与单链构象多态性分析 (PCR -SSCP)、测序技术进行多态性分析 ,利用自制具完整糖基化磷脂酰肌醇 (GPI)结构的胎盘碱性磷酸酶 (PLAP)做底物通过TX -114分相 ,定量检测白细胞中GPI -PLD活性。结果 湖南地区汉族 62名SLE患者与 10 9名正常人外周血白细胞GPI -PLD基因外显子 1区均存在 14处核苷酸改变 :转录起始点上游 -2 8A→C、-2 1C→T、-14G→A、-13G→C、-9T→C、-8G→C、-7G→C、+4T→G、密码子 14TTG→AAG (Leu14Lys)、密码子 17CTC→GTC(Leu17Val)、密码子 2 0AGA→AAA (Arg2 0Lys)、密码子 2 1GGT→GGG (Gly2 1Gly)、密码子 3 0GTA→ATA (Val3 0Ile) ;另转录起始点上游 -2 4C→T仅存在于SLE人群中 ,此变异在两组人群中具有显著性差异 ;该基因外显子 2 5 ,即 +60 496G→A均存在于两组人群中。经SSCP检出阳性率分别为正常人 3 3 0 3 %,SLE患者 2 5 81%。检测 62例SLE患者外周血白细胞GPI -PLD活性 (转化底物百分率 )
- 禹虹唐建华王依丹张晓杰顾善兰王成红
- 关键词：糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D多态性系统性红斑狼疮
- 竞争性RT-PCR法定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D基因的表达被引量：6
- 2003年
- 目的 :建立一种定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI PLD)基因表达水平的竞争性RT PCR方法 ,以研究GPI PLD与白血病等疾病的关系。方法 :首先用PCR定点诱变法构建GPI PLD的竞争性cDNA模板 ,该模板与靶cDNA具有相同的引物结合区 ,但在长度上要比靶cDNA少 2 0个碱基。把该竞争性cD NA模板在体外转录出的竞争性RNA作为RT PCR的内标准 ,与白血病细胞株K5 6 2细胞的总RNA在同一体系内进行逆转录和PCR扩增 ,二者的PCR产物因长度不同可经电泳区分开 ,然后对电泳图像进行光密度扫描 ,根据已知的竞争性RNA模板的量计算出GPI PLDmRNA的量 ,从而得到GPI PLD基因的绝对表达量。结果 :构建和制备了长度为 198bp的GPI PLD竞争性RNA模板 ,该模板与靶模板呈明显的竞争性RT PCR反应 ;测得K5 6 2细胞GPI PLD基因的表达水平为每纳克 (44 0± 2 0 )拷贝。结论 :成功地建立了一种定量检测GPI PLD基因表达水平的竞争性RT PCR方法 ,该方法具有灵敏、准确等优点。
- 张晓杰鲁纯平唐建华顾善兰禹虹
- 关键词：白血病
- 人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的基因结构初探被引量：3
- 2001年
- 探讨人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D (GPI PLD)的cDNA及其基因组基因的结构。从人骨髓基质细胞克隆出的GPI PLDcDNA中发现 ,它能编码信号肽 ,其编码的酶蛋白成熟肽为 817个氨基酸残基。该GPI PLDcDNA与从人肝组织和胰腺组织克隆到的GPI PLDcDNA的碱基序列的同源性分别为 95 %和 99%。人GPI PLD基因组基因定位于 6p2 2 .1～ 2 2 .3区域 ,包含 2 5个外显子 ,其上游调控区具有启动子 (TATA盒与CAAT盒 )、增强子核心序列 (TGGAAG)及同源转换盒Pit 1/GHF 1结合序列 (TATGCATAA)等顺式作用元件。
- 唐建华顾善兰张晓杰李文凯
- 关键词：骨髓糖基化磷脂酰肌醇磷脂酶DGPI-PLDCDNA骨髓基质细胞
- 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的研究进展被引量：5
- 2002年
- 羧基端结合有糖基化磷脂酰肌醇 (GPI)结构的膜蛋白 ,称为 GPI锚定蛋白 ;此后不久又鉴定出一种 GPI锚定蛋白专一性的磷脂酶 D(GPI- PL D)。 GPI- PL D能特异性地水解 GPI、释放出锚定蛋白并调节锚定蛋白的表达和生物功能等。本文概述了近年来有关 GPI- PL D的研究状况 ,包括它的组织和器官来源、生理功能、病理条件下的活性改变、分子结构以及 c
- 顾善兰唐建华
- 关键词：糖基化磷脂酰肌醇磷脂酶DGPI
- 糖基化磷脂酰肌醇磷脂酶D与动脉粥样硬化关系的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D（GPI—PLD）在动脉粥样硬化病理生理过程中的作用及其机制。方法分别收集102例冠心病患者和121例健康者外周血，测定其外周血GPI-PLD酶活性及其单个核细胞GPI—PLDmRNA表达。构建高表达GPI—PLD基因HUVEC细胞模型，并设立空白组和对照组，进行omLDL诱导，观察各组内皮细胞功能及生物学特性的改变。结果冠心病患者和健康者其外周血GPI—PLD酶活性分别为31．80±4．21和44．32±4．50，单个核细胞GPI—PI，DmRNA表达比值分别是0．92±0．16和1．53±0．14；冠心病患者组外周血GPI—PLD酶活性（t=21．31，P〈0．01）及其mRNA表达（t=30．36，P〈0．01），较健康者组分别减少28．2％和39．9％。ox-LDL诱导的各组细胞，高表达GPI-PLD细胞模型组细胞表面黏附单核细胞数、内皮素1、活性氧、丙二醛及凋亡率均低于空白组[29．59±1．40、3．51±0．45、（50．63±4．22）ng／L、0043±0．011、（3．32±0．44）nmol／L比41．39±2．15、10．57±1．12、（59．35±4．45）ng／L、0．052±0．011、（5．01±0．69）nmol／L3和对照组[42．68±2．45、9．92±1．03、（61．11±4．12）ng／L、0051±0．007、（4．89±0．71）nmol／L]，而一氧化氮含量高于空白组[（29．88±1．37μmol／L比（21．76±1．02）μmol／L]和对照组（23．43±0．85）μmol／L。结论GPI-PLD基因在冠心病患者中低表达，稳定高表达GPI—PLD有助于血管内皮细胞损伤的修复，有助于阻止动脉粥样硬化的发生和发展。
- 谭超超唐建华卢永娟李娜
- 关键词：动脉粥样硬化
