山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2007BS03061)
- 作品数：8 被引量：50H指数：7
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- 藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞凋亡的诱导作用被引量：7
- 2011年
- 目的观察藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞凋亡的诱导作用。方法体外培养肺癌A549细胞,分别给予40、80、160μg/ml的藤梨根乙酸乙酯提取物(实验组),同时设对照组(0.04%DMSO+肺癌A549细胞)。采用DNA琼脂糖凝胶电泳检测用药后DNA梯状条带、TUNEL检测用药后肺癌A549细胞凋亡率的变化、免疫组化SP法检测用药后肺癌A549细胞Survivin蛋白表达变化、RT-PCR法检测用药后A549细胞Survivin mRNA的表达。结果实验组细胞DNA凝胶电泳均出现凋亡细胞所特有的DNA梯状条带图谱,而对照组细胞未出现。各实验组细胞随着藤梨根乙酸乙酯提取物浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,并存在时相性和量—效依赖性;其Survivin蛋白和mRNA表达均低于对照组(P均<0.05),亦存在时相性和量—效依赖性。结论藤梨根乙酸乙酯提取物可明显诱导肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与降低Survivin蛋白和mRNA表达有关。
- 孙雪飞裴艳涛尹秋伟杨国涛吴铭生
- 关键词：肺肿瘤细胞凋亡
- 藤梨根提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用被引量：12
- 2012年
- 目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其作用机制。方法建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,观察藤梨根乙酸乙酯提取物的作用,设置对照组、治疗组(低剂量组、高剂量组)。通过测量移植瘤体积变化绘制生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,采用TUNEL法检测移植瘤凋亡指数,采用免疫组化法检测移植瘤Survivin蛋白表达、增殖指数,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测移植瘤Survivin mRNA变化。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。各治疗组移植瘤组织凋亡指数则明显高于对照组,而Survivin mRNA及蛋白表达较对照组明显减少,高剂量组尤其明显,各组间上述指标比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论藤梨根乙酸乙酯提取物在体内对肺癌A549细胞生长有抑制作用,可以诱导移植瘤细胞发生凋亡,促进癌细胞凋亡并下调瘤细胞Survivin蛋白和mRNA表达。
- 孙雪飞裴艳涛尹秋伟杨国涛王德江
- 关键词：藤梨根提取物肺肿瘤SURVIVIN逆转录聚合酶链式反应
- 藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞增殖的影响被引量：10
- 2011年
- 目的探讨藤梨根乙酸乙酯提取物影响肺癌A549细胞生长增殖的作用机制。方法体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,倒置显微镜观察藤梨根乙酸乙酯提取物作用后A549细胞形态学变化,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测藤梨根乙酸乙酯提取物对A549细胞增殖活性的影响,集落形成实验观察藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌克隆原细胞增殖的影响,3H-掺入法检测藤梨根乙酸乙酯提取物对A549细胞DNA合成的影响,免疫组化SP法检测用药后A549细胞Ki-67抗原表达变化。结果倒置显微镜下观察细胞形态学变化、MTT实验、集落形成实验结果均显示在体外藤梨根乙酸乙酯提取物在一定浓度下可以抑制肺癌A549细胞的生长,当药物浓度在20～160μg/ml时,抑制呈现出明显的时间和剂量依赖性。并且A549细胞cpm值及增殖指数随着药物剂量的增加和作用时间的延长而逐渐降低,仍以40、80、160μg/ml组作用明显,与对照组比较差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论藤梨根乙酸乙酯提取物可以明显抑制肺癌A549细胞的生长、增殖,其机制可能与抑制细胞DNA合成、降低Ki-67抗原表达有关。
- 杜庆聪裴艳涛杨国涛孙雪飞尹秋伟吴铭生
- 关键词：藤梨根提取物肺肿瘤KI-67抗原DNA合成
- 藤梨根提取物抗肺癌作用的体内实验研究被引量：9
- 2011年
- 目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,探讨其可能机制。方法用肺癌A549细胞建立肺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、治疗组(高剂量组、低剂量组)。根据瘤体积变化绘制移植瘤生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,移植瘤细胞凋亡指数检测采用TUNEL法,移植瘤细胞Bcl-2、Bax蛋白、Ki-67抗原表达检测采用免疫组化SP法,RT-PCR检测移植瘤Bcl-2、Bax mRNA表达。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组(P均<0.01),高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。治疗组移植瘤细胞透射电镜下均可见不同阶段典型的凋亡细胞形态学变化。各治疗组移植瘤组织凋亡指数明显高于对照组,而增殖指数明显减低,Bcl-2 mR-NA及蛋白表达较对照组亦明显减少,Bax蛋白及mRNA表达较对照组明显增加,高剂量组尤其明显(P均<0.01)。结论藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,其机制与抑制移植瘤细胞的增殖活性和诱导癌细胞凋亡有关,而降低Bcl-2基因表达、上调Bax基因表达可能是其诱导细胞凋亡机制之一。
- 孙雪飞裴艳涛杨国涛尹秋伟吴铭生
- 关键词：肺肿瘤藤梨根提取物小鼠基因,BCL-2
- 藤梨根提取物对食管癌EC109细胞抑制作用被引量：9
- 2011年
- 目的观察藤梨根乙酸乙酯提取物对食管癌EC109细胞生长、凋亡影响,并探讨其作用机制。方法体外培养食管癌EC109细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测用药后EC109细胞凋亡率变化,免疫组化法检测用药后EC109细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达变化,激光共聚焦显微技术测定用药后EC109细胞胞内[Ca2+]i变化。结果细胞培养24、48、72 h后,对照组细胞凋亡率分别为(1.67±0.76)%、(2.32±0.45)%、(2.98±0.89)%,Bcl-2蛋白表达率分别为(50.12±3.41)%、(49.78±5.65)%、(51.25±6.34)%,Bax蛋白表达率分别为(17.98±2.85)%、(18.27±3.12)%、(17.76±3.64)%,而各干预组细胞凋亡率为7.05%～51.11%,均明显增加(t=5.419～17.826,P<0.05),存在时-效和量-效趋势,同时其细胞Bcl-2蛋白表达降低,为43.32%～10.46%,Bax蛋白表达上调,为24.54%～63.47%,均存在时-效和量-效趋势,当作用时间≥48 h或浓度≥100μg/mL时,干预组上述变化与对照组比较,差异有统计学意义(Bcl-2:t=3.58～10.14;Bax:t=5.047～11.065,P<0.05);用药后细胞内[Ca2+]i明显升高,12 h达高峰,此后缓慢减低,至48 h仍明显高于对照组。结论藤梨根乙酸乙酯提取物可以明显抑制食管癌EC109细胞增殖,并诱导细胞发生凋亡,可能与降低其Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,升高细胞内[Ca2+]i有关。
- 孙雪飞裴艳涛杨国涛吴铭生尹秋伟
- 关键词：藤梨根提取物食管肿瘤BAX基因BCL-2基因细胞内钙离子浓度
- 藤梨根提取物抑制肺癌A549细胞增殖作用机制研究被引量：17
- 2009年
- 目的观察藤梨根乙酸乙酯提取物(RAE)对肺癌A549细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的RAE进行干预,流式细胞术检测用药后A549细胞凋亡率变化,免疫组化SP法检侧细胞Bcl-2、Bax蛋白表达变化,RT-PCR法检测细胞Bcl-2、Bax mRNA表达,激光共聚焦显微技术测定细胞胞内Ca2+浓度变化。结果各治疗组给予RAE作用后细胞凋亡率明显增加,并存在时相性和量效依赖性;用药后A549细胞Bcl-2蛋白和mRNA表达降低,而Bax蛋白和mRNA表达上调,细胞内Ca2+浓度明显升高,与对照组比较均有显著统计学差异(P均<0.01),亦存在时相性和量效依赖性。结论RAE可明显诱导肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与降低其Bcl-2蛋白和mRNA表达、上调Bax蛋白和mRNA表达、升高细胞内Ca2+浓度有关。
- 孙雪飞尹秋伟裴艳涛杨国涛李希波王德江
- 关键词：藤梨根提取物肺肿瘤基因,BCL-2细胞内钙离子浓度
- 藤梨根提取物对肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响被引量：10
- 2011年
- 目的观察藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞生长增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,台盼蓝计数活细胞绘制不同浓度药物作用后细胞的生长曲线;四甲基耦氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度药物作用不同时间对A549细胞生长的抑制率;采用流式细胞术(FCM)测定肺癌细胞周期、凋亡率变化;采用透射电镜观察药物作用后细胞的超微结构变化。结果台盼蓝计数活细胞及MTT实验结果均显示当药物浓度在20～160μg/ml之间时,体外藤梨根提取物可明显抑制肺癌A549细胞的生长,呈现出明显的时间和剂量依赖性。FCM检测显示药物作用后,G0/G1期细胞数目增多,S期和G2/M期细胞数目相应减少,细胞发生G0/G1期阻滞,细胞凋亡率亦明显增加,随药物浓度增加、作用时间延长,其细胞周期阻滞作用及凋亡诱导作用逐渐增强。药物处理48 h后各组A549细胞透射电镜下均可见不同阶段典型的凋亡细胞形态学变化。结论藤梨根提取物对人肺癌A549细胞生长有明显的抑制作用,呈现时效-量效关系,其作用与使细胞周期发生阻滞和诱导细胞凋亡有关。
- 孙雪飞裴艳涛杨国涛尹秋伟吴铭生
- 关键词：藤梨根提取物肺肿瘤细胞周期细胞凋亡
- 藤梨根提取物对食管癌细胞系EC109细胞裸鼠移植瘤的抑制作用被引量：6
- 2009年
- 目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对食管癌细胞系EC109细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用和凋亡诱导作用，并探讨其作用机制。方法建立食管癌EC109细胞裸鼠移植瘤模型，观察藤梨根乙酸乙酯提取物的作用。将裸鼠分为对照纽、冶疗组（低剂量组、高剂量组），每组6只。通过测量移植瘤体积变化绘制生长曲线，根据终末瘤重比较计算抑制率；采用TUNEL法检测移植瘤凋亡指数，采用免疫组织化!学法检测移植瘤生存素（Survivien）蛋白表达和增殖指数；用RT-PCR法检测移植瘤Survivien mRNA变化。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢，治疗结束时治疗组移植瘤重及瘤体积明显低于对照组，高、低剂量组的瘤重抑制率分别为64．57％和46．78％。各治疗组移植瘤组织凋亡指数则明显高于对照组，而Ki．67抗原、Survivin mRNA及蛋白表达较对照组明显减少，高剂量组尤其明显，各组间l：述指标比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论藤梨根乙酸乙酯提取物对食管癌EC109细胞裸鼠移植瘤生K有抑制作用，其机制与抑制移植瘤细胞的增殖活性，降低其Survivin蛋白和mRNA表达及促进癌细胞凋亡有关。
- 孙雪飞李希波杨国涛尹秋伟王德江
- 关键词：藤梨根提取物生存素裸鼠
