国家自然科学基金(39970332)
- 作品数：11 被引量：31H指数：4
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- 蛋白激酶C对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道的作用被引量：2
- 2003年
- 张永昶倪望甄国华张珍祥徐永健
- 关键词：蛋白激酶C慢性缺氧肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道肺动脉高压
- cGMP对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞膜电压门控钾通道的作用被引量：5
- 2003年
- 目的 :探讨cGMP对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)膜电压门控钾通道 (Kv通道 )的作用 ,为进一步阐明慢性低氧性肺动脉高压的发病机理提供理论依据。方法 :Wistar大鼠 ,随机分为对照组和慢性低氧组 ,低氧组大鼠每天低氧 (氧浓度 10 %± 1% ) 8h ,连续 4周。单个大鼠PASMC的获得采用急性酶分离法 (胶原酶Ⅰ型和木瓜蛋白酶 )。采用全细胞膜片钳技术测定两组PASMC的静息膜电位 (Em)和电压门控钾通道的钾离子电流 (IKV) ,观察并比较cGMP (1mmol/L)以及cGMP和蛋白激酶G(PKG)抑制剂H - 8(1mmol/L)应用后两组PASMCIKV的不同变化。结果 :慢性低氧大鼠PASMC的静息膜电位和电压门控钾通道电流明显低于正常对照组。cGMP可抑制正常和慢性低氧大鼠PASMC +5 0mV刺激时的峰值IKV[正常组从 (118 0± 5 0 )pA/pF下降到 (89 9± 16 5 )pA/pF ,n =6 ,P<0 0 5 ;慢性低氧组则从 (81 0± 5 0 )pA/pF下降到 (5 6 8± 9 1)pA/pF ,n =6 ,P <0 0 5 ],该抑制作用可被PKG的抑制剂H - 8阻断 [正常组 (119 2± 10 3)pA/pFvs (117 8± 9 1)pA/pF ,n =6 ,P >0 0 5 ;慢性低氧组 (96 8± 6 2 )pA/pFvs(98 0± 2 2 )pA/pF ,n =6 ,P >0 0 5 ]。结论 :慢性低氧抑制肺动脉平滑肌细胞的电压门控钾通道。
- 张永昶倪望甄国华张珍祥徐永健
- 关键词：低氧肺动脉钾通道
- 内皮素对大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钾通道的影响被引量：5
- 2004年
- 目的 观察内皮素 (ET 1)对大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)膜电压门控钾通道 (KV)的作用。方法 用全细胞膜片钳记录方法研究ET 1对膜电位 (Em)、膜电容 (Cm)、电压门控钾电流 (IKV)的影响。结果 ET 1可引起PASMCs去极化 ,并抑制IKV,抑制IKV 时间明显早于其对Em 变化的影响 ,ET 1对IKV 的影响呈可逆性和浓度依赖性 ,在有钙的环境中 ,ET 1对IKV 峰电流的抑制率明显高于无钙时。结论 ET 1可浓度依赖性的抑制IKV ,使常氧大鼠PASMCs去极化 ,且ET 1对IKV 的抑制作用早于对Em 的影响 ,这些作用不完全依赖于钙的参与 ,但钙可加强ET 1对IKV 的抑制作用。
- 樊再雯张珍祥徐永健
- 关键词：内皮素肺动脉平滑肌细胞钾通道膜片钳慢性低氧性肺动脉高压
- 钾通道对大鼠肺动脉平滑肌细胞[Ca^(2+)]_i的调节被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨在常氧、低氧条件下钾通道对大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs) [Ca2 + ]i 的调节。方法 :采用钙荧光探针 (Fura - 2 /AM)负载培养的大鼠PASMCs,观察常氧、低氧培养后 3种钾通道抑制剂 (4AP ,TEA、Glib)对PASMCs [Ca2 + ]i的调节 ,同时用四唑盐 (MTT)比色法比较 4AP、TEA、Glib对大鼠PASMCs增殖的影响。结果 :(1)常氧状态下 ,PASMCs[Ca2 + ]i 为 (15 6 91± 8 6 0 )nmol/L ,低氧时为 (2 94 0 1± 16 81)nmol/L(P <0 0 1)。 (2 )常氧状态下 ,4AP可引起PASMCs[Ca2 + ]i 升高 ,达 (2 80 5 2± 2 3 2 1)nmol/L(P <0 0 1) ,而TEA、Glib无此作用。 (3)低氧时 ,4AP和TEA都可引起PASMCs[Ca2 + ]i 的升高 ,分别为 (42 2 4 1± 2 4 2 8)nmol/L、(380 84± 11 0 2 )nmol/L(P <0 0 1) ,Glib无作用。(4)MTT比色法中 ,常氧和低氧状态下 4AP均引起吸光度 (A)值升高 ,分别是 0 5 82± 0 0 6 2 ,0 873± 0 0 4 3(P <0 0 1)。TEA仅在低氧时A值升高 (0 72 9± 0 0 4 1,P <0 0 5 ) ,而Glib无论常氧还是低氧均无影响。结论 :无论常氧还是低氧条件下 ,电压依赖性钾通道 (KV)对PASMCs[Ca2 + ]i 及其增殖起主要作用。钙激活的钾通道 (KCa)在常氧条件下对[Ca2 + ]i 不起调节作用 ,而在低氧下使 [Ca2 + ]
- 樊再雯张珍祥徐永健
- 关键词：钾通道钙肺动脉
- BQ123对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨内皮素-1受体拮抗剂BQ123对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道亚型基因表达的影响。方法:根据常氧(PO2152mmHg)及慢性低氧(PO240±5mmHg)的不同培养条件,将肺动脉平滑肌细胞分为常氧组和慢性低氧组,并用BQ123分别处理上述两组细胞,采用半定量RT-PCR技术检测大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv2·1、Kv9·3基因表达的变化。结果:经过慢性低氧,大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv2·1、Kv9·3的mRNA表达水平明显低于常氧组(P<0·01,n=5),BQ123对常氧组Kv2·1的mRNA表达无影响(P>0·05,n=5),但可明显增加慢性低氧组Kv2·1的表达(P<0·01,n=5)。无论在常氧还是慢性低氧时,BQ123对Kv9·3的mRNA表达均无影响(P>0·05,n=5)。结论:慢性低氧可降低大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道的表达,内皮素-1受体拮抗剂BQ123可能通过抑制PASMCs的增殖,改变了细胞内信号转导通路中某些因子的表达,从而间接促进Kv的表达。
- 樊再雯张珍祥徐永健
- 关键词：钾通道肺动脉
- BQ123对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1.5表达的影响
- 2005年
- 樊再雯张珍祥徐永健
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞慢性低氧钾电流
- 长期应用左旋精氨酸对慢性低氧肺动脉平滑肌细胞钾通道的作用被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨长期应用左旋精氨酸 (L Arg)对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)膜钾通道的作用 ,为慢性低氧性肺动脉高压的防治手段提供理论依据。方法 雄性Wistar大鼠 18只 ,每组 6只 ,随机分为三组 :生理盐水对照组 (A组 )、慢性低氧组 (B组 )和慢性低氧 +L Arg组 (C组 )。单个大鼠的PASMC获得采用急性酶分离法 (胶原酶Ⅰ型和木瓜蛋白酶 )。用全细胞膜片钳技术测定三组PASMC的静息膜电位 (Em)、电压门控钾通道 (Kv通道 )电流和钙激活钾通道 (KCa通道 )电流。结果 (1)B组大鼠PASMC的静息膜电位为 (- 31± 8)mV ,A组为 (- 4 2± 5 )mV ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。C组大鼠PASMC的静息膜电位为 (- 39± 4 )mV ,与B组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。(2 )对Kv通道 (在 +5 0mV电压刺激时峰值电流 ) :B组大鼠PASMC的峰值电流为 (6 2± 5 )pA/pF ,A组为 (12 1± 9)pA/pF ,两组比较差异也有显著性 (P <0 0 1)。C组大鼠PASMC的峰值电流为 (95± 3)pA/pF ,与B组比较差异也有显著性 (P <0 0 0 1)。 (3)对KCa通道 (+5 0mV电压刺激时的峰值电流 ) :B组大鼠PASMC的峰值电流为 (74 7± 4 1)pA/pF ,A组为 (5 3 6± 5 9)pA/pF ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。应用L Arg后 。
- 张永昶倪望甄国华张珍祥徐永健
- 关键词：左旋精氨酸肺动脉平滑肌细胞钾通道
- 内皮素对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钾通道活性的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 观察内皮素(ET 1)对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)膜电压门控钾通道 (KV)活性的影响。方法 将 12只Wistar大鼠随机分为对照组和慢性低氧组,每组 6只。用全细胞膜片钳记录方法研究ET 1对两组大鼠PASMCs膜电位 (Em )、膜电容 (Cm )及电压门控钾电流 (IKV)的影响。结果 ET 1可引起两组大鼠PASMCs去极化,且对两组大鼠IKV均有明显的浓度依赖性抑制作用。在慢性低氧组,高浓度ET 1对IKV的抑制作用强于对照组。结论 低氧并未改变ET 1引起PASMCs去极化及浓度依赖性抑制IKV的特性,且慢性低氧可能改变了PASMCs对ET 1的敏感性,内皮素和低氧对PASMCsIKV的抑制作用有协同性。
- 樊再雯张珍祥徐永健
- 关键词：钾通道内皮素膜片钳慢性低氧肺动脉平滑肌细胞
- 慢性低氧对大鼠肺组织电压门控钾通道表达的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨慢性低氧对大鼠肺组织电压门控钾通道亚型Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3表达的影响。方法 :将12只Wistar大鼠随机分为对照组和慢性低氧组 ,每组 6只。采用RT -PCR和Westernblot对大鼠肺组织匀浆中Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3mRNA和Kv1 5蛋白质的表达进行观察。结果 :慢性低氧组大鼠肺组织匀浆中Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3mRNA和Kv1 5蛋白质表达明显低于对照组 (P <0 0 1)。结论 :慢性低氧可以从转录、翻译两个水平抑制大鼠肺组织中Kv1 5、Kv2 1Kv9 3的表达 ,Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3表达的减少必将导致Kv数目的减少和电流的降低。Kv1 5、Kv2 1、Kv9
- 樊再雯张珍祥徐永健
- 关键词：钾通道基因表达缺氧
- 克罗卡林对缺氧性肺动脉高压的影响及其机制探讨被引量：2
- 2003年
- 杨慧张珍祥徐永健
- 关键词：克罗卡林缺氧性肺动脉高压
