国家自然科学基金(81260494)
- 作品数：6 被引量：32H指数：4
- 相关作者：孙黔云李敏李亚男周英季仁升更多>>
- 相关机构：中国科学院贵州省人民医院贵州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技创新人才团队建设项目贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 补体旁路激活导致内皮细胞炎症反应及干预
- 2015年
- 目的基于补体旁路与一系列病征的重要关联,研究补体旁路激活导致微血管内皮细胞发生的变化及干预.方法采用眼镜蛇毒因子特异激活血清补体旁路途径.将补体旁路激活产物作用于培养的人微血管内皮细胞,分别检测黏附分子、炎症介质、纤溶凝血相关分子的表达和炎症相关信号通路的活化,采用多种化学小分子对上述炎症反应进行干预.结果补体旁路激活产物刺激微血管内皮细胞后,炎症相关信号通路JAK2、p38MAPK和NF-κB先后出现活化高峰,P-selectin和vWF先后瞬时释放,黏附分子（E-selectin、ICAM-1、VCAM-1）、炎症介质（IL-8、MCP-1）、纤溶凝血相关分子（t-PA、PAI-1、TF）的表达上调,而TM和NO下调.AG490、SB203580、PDTC以及白藜芦醇对内皮细胞的炎症反应表现出多样的干预作用及影响.结论补体旁路激活能导致微血管内皮细胞发生炎症反应,从而介导微血管内皮的生理结构与功能发生炎性变化;相关化学小分子能在一定程度上干预上述炎症反应,提示JAK2可能是一个重要的调控位点.
- 孙黔云李敏李红玲路青瑜李朝胜
- 关键词：内皮细胞黏附分子趋化因子纤溶眼镜蛇毒因子
- 补体旁路激活致内皮细胞纤溶凝血功能的改变及干预研究被引量：3
- 2017年
- 目的研究补体旁路激活导致的微血管内皮细胞纤溶凝血功能的变化以及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)和白藜芦醇(Res)的干预作用。方法采用眼镜蛇毒因子激活血清补体旁路途径。将补体旁路活化的血清作用于人微血管内皮细胞(HMEC),检测多个时间点细胞培养上清的水解发色底物活性变化和对凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响,并制备细胞悬液,检测细胞表面的抗凝血功能变化情况。采用PDTC、Res对上述变化指标进行干预研究。结果 HMEC经补体旁路活化产物刺激后,细胞培养上清的发色底物酶解活性明显上调;细胞培养上清导致正常血浆的APTT明显缩短,同时,对PT也有缩短的作用;经补体旁路活化产物刺激HMEC后制备的各时间点细胞悬液对正常血浆的APTT有明显的缩短作用,6 h刺激组的细胞悬液也表现出缩短PT的作用。PDTC和Res未能抑制发色水解活性的上调,但Res对APTT的缩短有明显的干预作用,而PDTC能在一定程度上抑制PT的缩短。结论补体旁路活化产物会导致HMEC纤溶凝血功能的失调,而PDTC和Res有一定的干预作用。
- 李敏路青瑜李亚男孙黔云
- 关键词：补体内皮细胞纤溶PDTC白藜芦醇眼镜蛇毒因子
- 绿原酸、咖啡酸和阿魏酸对补体旁路激活致内皮细胞炎症相关分子表达的干预被引量：11
- 2016年
- 目的研究绿原酸及其代谢产物咖啡酸和阿魏酸对补体旁路激活导致人微血管内皮细胞炎症反应相关分子表达的干预作用。方法采用眼镜蛇毒因子激活人血清补体旁路,将补体旁路激活产物作用于人微血管内皮细胞,分别取不同时间点的细胞培养上清,采用ELISA方法检测ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量;采用不同浓度的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸预处理内皮细胞,然后将细胞暴露于补体旁路激活产物,检测不同时间点细胞培养上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量变化。结果补体旁路激活产物作用于人微血管内皮细胞后,引起ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的表达上调。50、100、250μmol·L^(-1)的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的上调表达均有干预作用,其中对ICAM-1和IL-8的干预作用最明显。咖啡酸表现出最好的干预作用,其次为阿魏酸。结论一定浓度的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸能有效抑制补体旁路激活引起的人微血管内皮细胞表达ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的上调,提示绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对微血管内皮细胞的炎症反应有一定的干预作用。
- 周英李敏孙黔云
- 关键词：补体绿原酸咖啡酸阿魏酸
- Activation of endothelial cells by complement activation of the alternative pathway and intervention by inhibitors
- ＜正＞Aim:To investigate the effect of complement activation of the alternative pathway on human microvascular en...
- Qian-yun SUNMin LIHong-ling LIQiao-ling YEYu-lu HAO
- 关键词：COMPLEMENTINFLAMMATION
- 文献传递
- 原矛头蝮蛇毒及其组分对凝血功能的影响被引量：6
- 2015年
- 目的研究原矛头蝮蛇毒（PMV）及其组分作用于血液循环系统的部分生物学活性,进一步探讨其毒性机制。方法采用Sephadex G-75凝胶层析方法分离不同分子质量范围的蛋白组分FⅠ,FⅡ和FⅢ。贫血小板血浆调节富血小板血浆使血小板为3×1011L-1,血小板悬液分别与PMV,FⅠ,FⅡ和FⅢ0.03 g·L-1预孵育5 min,血小板聚集仪测定PMV及其组分诱导血小板聚集活性;PMV,FⅠ,FⅡ和FⅢ0.05 g·L-1分别与纤溶酶原0.1 U·L-1预孵育10 min,采用单一时间点测定和酶动力学测定PMV及其组分酶切发色底物S-2251的作用;将大鼠血浆与PMV,FⅠ,FⅡ和FⅢ1.0 g·L-1分别孵育5和30 min,测定凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）和纤维蛋白原（FIB）水平;PMV,FⅠ,FⅡ和FⅢ10,50和250 mg·L-1处理微血管内皮细胞24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活;PMV,FⅠ,FⅡ和FⅢ0.1 g·L-1与含卵磷脂和不含卵磷脂的豚鼠红细胞悬液分别孵育不同时间,计算溶血率。结果与对照组相比,PMV和高分子质量蛋白组分FⅠ（〉71 ku）诱导血小板聚集率显著升高〔（61.0±5.8）%和（56.9±5.9）%vs（12.4±4.1）%〕（P〈0.01）。酶切发色底物S-2251结果显示,PMV与中分子质量组分FⅡ（18~37 ku）具有酶切发色底物的作用（P〈0.01）。PMV和FⅠ可引起血浆凝固。与对照组相比,FⅡ组分和低分子质量蛋白组分FⅢ（〈10 ku）明显使TT,APTT和PT的时间延长（P〈0.01）。PMV,FⅠ及FⅡ导致内皮细胞解离悬浮,与对照组相比,细胞存活率下降,分别为（56.8±3.6）%,（71.6±3.8）%和（58.2±5.5）%。在无卵磷脂条件下,PMV和FⅡ可缓慢地引起红细胞轻度溶血;在卵磷脂参与下,PMV和FⅡ引起豚鼠红细胞急剧溶血,与正常对照组相比,在0.5 min内溶血率从（17.7±1.0）%分别升高至（81.0±4.0）%和（81.0±1.0）%（P〈0.01）。结论 PMV在体外表现出多方面的血�
- 李亚男孙黔云路青瑜
- 关键词：溶血抗凝血小板聚集
- 原矛头蝮蛇毒的抗凝作用被引量：5
- 2013年
- 目的研究原矛头蝮蛇毒(PMV)对血液系统的作用。方法将PMV 0.2 mg.kg-1一次性尾静脉注射给予SD大鼠。注射后0.5,1,3,6和24 h分别取下腔静脉血,制备抗凝全血、抗凝血浆和富血小板血浆(PRP)。利用血细胞计数板对抗凝全血和PRP进行血小板计数;将抗凝血浆用生理盐水稀释5倍,在412 nm测定血红蛋白含量;采用凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和纤维蛋白原(FIB)含量测定试剂盒分别测定抗凝血浆的TT,APTT,PT和FIB含量;用发色底物法测定抗凝血浆酶切发色底物S-2251的活性。给昆明小鼠一次性尾静脉注射PMV 0.28 mg.kg-1,在0.5,1,3,6和24 h测定尾部出血时间。结果给予PMV 0.2 mg.kg-130 min大鼠抗凝全血血小板计数减少至正常对照组的1/3(P<0.01),PRP中血小板计数减少至正常对照组的1/20(P<0.01),抗凝血浆血红蛋白含量增加约6倍(P<0.01);给予PMV 6 h APTT明显延长(P<0.05),3和6 h TT明显延长(P<0.01),1和3 h PT明显缩短(P<0.01);FIB含量和抗凝血浆酶切发色底物S-2251的活性无明显变化。给予小鼠PMV 0.28 mg.kg-130 min小鼠尾部出血时间达(2341±742)s,较正常对照组小鼠(81±11)s明显延长(P<0.01),1 h逐渐缩短(P<0.01),24 h仍未恢复至正常水平(P<0.05)。结论 PMV具有明显的抗凝作用。
- 李亚男孙黔云
- 关键词：血小板凝血功能
- 补体旁路过度激活影响体内凝血功能被引量：10
- 2014年
- 目的研究补体旁路的过度激活对体内纤溶、凝血及血小板的影响。方法采用尾静脉注射眼镜蛇毒因子(CVF)造成大鼠体内补体旁路的过度激活。检测大鼠给药前和给药后多个时间点血样的补体活性、t-PA、PAI-1、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、P-selectin、PF-4、β-TG、血小板数量及聚集活性的变化,并检测小鼠静脉给予CVF后其尾部出血时间的变化。结果大鼠注射CVF后,血清补体活性在1h内基本消失。t-PA和PAI-1含量在1h内有明显增加,在48 h时间点t-PA/PAI-1比值有明显下降(P<0.01);PT、APTT、TT均略有变化,而血浆FIB含量明显下降;补体旁路的过度激活导致血中P-selectin、PF-4、β-TG明显上调,血小板数量明显减少,凝血酶和花生四烯酸诱导的血小板聚集被明显抑制,而ADP诱导的血小板聚集只受到轻微影响。小鼠尾部出血时间在1 h时明显缩短。结论补体旁路的过度激活能明显影响体内凝血功能,导致血液的高凝状态。
- 李敏孙黔云赵琼蒿雨露季仁升沈良贤
- 关键词：补体激活内皮细胞活化凝血功能黏附分子眼镜蛇毒因子
