国家自然科学基金(30370038)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：李元张勇王渭池胡箭王柯更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院中国科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 微生物来源白细胞介素-4受体拮抗剂的筛选被引量：2
- 2007年
- 目的:从链霉菌4849的代谢产物中分离白细胞介素4受体(IL-4R)拮抗剂。方法:采用大孔吸附,溶媒萃取,硅胶柱色谱,重结晶等方法进行分离和纯化,以酶联免疫法进行活性跟踪,通过UV,ESIMS和NMR进行化合物的结构鉴定。结果:分离得到化合物4849A,4849B和4849C,根据波谱解析,确定其分别为金丝菌素、硫藤黄菌素和4,’7-二甲氧基异黄酮,其中4,7-二甲氧基异黄酮的拮抗活性比较明显。结论:从链霉菌4849的代谢产物中首次筛选出白细胞介素-4受体拮抗剂4,’7-二甲氧基异黄酮。
- 王柯李元吴剑波
- 关键词：白细胞介素4受体拮抗剂
- 人可溶性白介素4受体(sIL4R)在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：4
- 2004年
- 白细胞介素 4 (IL 4 )作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用 .IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应 .sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂 ,应用于哮喘等疾病治疗 .采用RT PCR方法 ,以人单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序确证后插入大肠杆菌高效表达质粒pBV2 2 0 ,得到重组质粒pBV2 2 0 sIL 4R ,重组质粒转化E .coliDH5α .重组菌经温度诱导后超声破碎得到包涵体 ,经SuperdexHR75分子筛柱和DEAE SepharoseFastFlow离子交换柱进行纯化 ,HPLC检测表明纯度达到 90 % .N端测序证明 ,重组sIL 4R与天然sIL 4RN端序列完全一致 .Western印迹、配基结合印迹对重组sIL 4R进行鉴定 .结果表明 ,重组sIL 4R具有结合IL
- 张勇王渭池李元
- 关键词：PBV220
- 人可溶性白介素-4受体(sIL-4R)在甲醇酵母中的表达被引量：3
- 2004年
- 白细胞介素 4(IL 4)作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用。IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应。sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递来介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂应用于哮喘等疾病的治疗。采用RT PCR方法以人的单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序证实后插入到甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中 ,得到重组质粒pPIC9K sIL 4R ,利用限制性内切酶BglⅡ将其线性化后用电穿孔法导入PichiapastorisGS115。分别用SDS PAGE、Westernblot和Ligandbindingblot对重组菌发酵上清中的sIL 4R进行鉴定。结果表明 ,在分子量约为 3 0kD处有sIL 4R特异条带出现 ,并具有结合其配基IL
- 张勇胡箭李元
- 关键词：白细胞介素-4IL-4甲醇酵母生物学活性
