国家自然科学基金(30370074)
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
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- 健康学生大肠埃希菌第1类整合子的鉴定及特征
- 2007年
- 目的:探讨健康学生肠道大肠埃希菌携带第1类整合子的分布及所含基因盒的特征。方法:常规方法分离大肠埃希菌;纸片扩散法对10种抗生素进行耐药性监测和分析;PCR鉴定第1类整合子阳性株;PCR产物测序并对结果进行分析。结果:从97份标本中鉴定出大肠埃希菌76株,其中25株(32.8%)为多重耐药,耐药谱为复合磺胺-氨苄西林-四环素-红霉素-链霉素。25株中有14株(56.0%)鉴定出1类整合子,1 800 bp10株,750 bp 4株。PCR产物测序得知1 800 bp整合子携带aadA1-dfrA14-orf基因盒,传递对氨基糖苷类-磺胺类抗菌药物的耐药性;750 bp整合子携带dfrA14基因盒,传递对磺胺类抗菌药物的耐药性。结论:不同种类的1类整合子存在于健康人大肠埃希菌中,携带耐药基因盒,决定多重耐药性。
- 李明成李凡
- 关键词：大肠埃希菌
- 产志贺样毒素大肠埃希菌Ⅰ类整合子的鉴定和分析被引量：4
- 2005年
- 目的阐明各种来源的产志贺样毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producingE.coli,STEC)中Ⅰ类耐药整合子的分布、特征、所含基因盒的状况以及所表达的耐药信息。方法常规分离出大肠埃希菌、血清学分型,PCR法鉴定产stx1-2毒素性菌株;纸片扩散法对17种抗菌药物进行耐药性监测和分析;PCR法鉴定Ⅰ类整合子阳性株;PCR产物测序并对结果进行分析。结果各种标本中共鉴定出46株产志贺样毒素大肠埃希菌,其中23株为O157∶H7;全部STEC对复方新诺明耐药,对链霉素耐药率为28.3%,氨苄西林为30.4%,而且有5株对至少>4种抗菌药物多重耐药,耐药谱为复方新诺明-链霉素-氨苄西林-庆大霉素;46株分离株中有11株(23.9%)鉴定出Ⅰ类整合子,PCR产物测序得知9株携带aadA1基因盒,2株携带aadA2基因盒,均来自氨基糖苷类抗菌药物耐药菌株(39.3%),传递对氨基糖苷类抗菌药物的耐药性。结论Ⅰ类整合子存在于各种来源的产志贺样毒素大肠埃希菌中,并携带相应的基因盒,决定着对氨基糖苷类抗菌药物的耐药性。
- 李咏梅李凡
- 关键词：志贺样毒素大肠埃希菌整合子
- 食品中变形杆菌第1类整合子鉴定和特征被引量：1
- 2006年
- 目的探讨肉类食品中变形杆菌第1类整合子的分布、特征及所含基因盒的种类。方法常规方法分离变形杆菌;纸片扩散法对9种抗生素进行耐药性监测和分析;PCR鉴定1类整合子;阳性株PCR产物测序并对结果进行分析。结果91份标本中共鉴定出27株变形杆菌,有13株(48.1%)对至少4种以上抗生素表现多重耐药,耐药谱为复合磺胺-氨苄西林-红霉素-四环素-链霉素。13株中有3株鉴定出1类整合子,2株携带0.75和1.8 kb 2个整合子。1株携带1.0 kb整合子,PCR产物测序,1.0 kb整合子携带aadA2基因盒,传递对氨基糖苷类抗生素的耐药性。结论肉类食品中变形杆菌携带第1类整合子,1.8 kb整合子携带pse-1-aadA1-dfrA14基金盒,传递对β-内酰胺类、磺胺类、氨基糖苷类抗生素的耐药性。携带复杂的基因盒,决定着对β-内酰胺类、氨基糖苷类和磺胺类抗生素的耐药性。
- 李明成王放李凡
- 关键词：变形杆菌
- 产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株第1类整合子-基因盒的特征
- 2007年
- 目的:探讨产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株携带第1类整合子的特征及所含基因盒的种类。方法:采用纸片扩散法对8株产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株进行抗生素耐药性监测;制备细菌转接合子,采用PCR技术鉴定第1类整合子,并对PCR产物测序及结果分析。结果:4株产志贺毒素大肠埃希菌对复合磺胺、四环素、氨苄西林、环丙沙星表现多重耐药,其中2株同时对链霉素和壮观霉素耐药。PCR检测第1类整合子1000 bp 2株,PCR产物测序1000 bp整合子携带腺苷酰基转移酶(aadA1)基因盒并存在于7800 bp可接合质粒上,与sul 1和qacEΔ1基因连锁,分别传递着对链霉素、壮观霉素、复合磺胺和季胺盐类消毒剂的耐药性。结论:产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株可接合质粒上第1类整合子携带的aadA1耐药基因盒是该菌株对氨基糖苷类抗生素耐药产生和扩散的重要原因。
- 李明成王放李凡
- 关键词：志贺毒素大肠埃希菌整合子
- 产志贺毒素大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因型的研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨产志贺毒素大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)类型及耐药机制。方法采用纸片琼脂扩散法筛选36株产志贺毒素大肠埃希菌产ESBLs菌株,接合传递实验、质粒谱分析、PCR检测耐药基因和DNA序列分析产ESBLs菌株的表型和基因型。结果双纸片扩散法证明有2株产志贺毒素大肠埃希菌产ESBLs,美国株E.coli 5nonO157:H7和中国株E.coli 27 O157:H7对头孢他啶等第三、第四代头孢菌素和氨基糖苷类抗生素耐药,并能通过5.8kb的质粒传递给受体菌。PCR检测含有blaTEM基因。DNA同源分析表明861bp的blaTEMDNA片段与blaTEM-IDNA片段同源。结论产志贺毒素大肠埃希菌美国株和中国株产生相同类型的ESBLs,表现出对第三、第四代β-内酰胺酶类抗生素耐药。
- 李明成李凡
- 关键词：产志贺毒素大肠埃希菌超广谱Β-内酰胺酶基因型
- 不同来源产志贺毒素大肠埃希菌分布特征被引量：2
- 2006年
- 目的探讨不同标本中产志贺样毒素大肠埃希菌(STEC)的分布特征。方法采集动物粪便、肉类食品和排污口污泥样品,常规分离大肠埃希菌,血清学分型,PCR鉴定产志贺样毒素(stxl,stx2)菌株。结果293份标本中鉴定出8株STEC,1株为产志贺毒素O157:H7型,2株为不产志贺毒素O157:H7型,5株为产志贺毒素非O157:H7型。结论STEC存在于不同来源的标本中,菌株表型与毒力因子存在一定差异。
- 李明成李凡
- 关键词：志贺样毒素大肠埃希菌
- 肠出血性大肠埃希菌1类整合子与耐药性关系被引量：4
- 2005年
- 目的 研究 4 8株 (国内 2 8株 ,美国 2 0株 )肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)的耐药特点以及 1类整合子的分布 ,探讨整合子中耐药基因盒的种类及与细菌耐药性的相互关系。方法 琼脂稀释法对 18种抗生素进行耐药性监测和分析 ;PCR法鉴定 1类整合子阳性株 ;PCR产物测序及分析。结果 4 8株肠出血性大肠埃希菌中 2 3株为O15 7:H 7;2个地域的肠出血性大肠埃希菌对抗生素的耐药情况大多无差别 ,只存在对氨苄西林和红霉素耐药率的差异 ,前者为国内分离株 (6 0 7% )高于美国分离株 (30 % ) ,后者为美国分离株 (95 % )高于国内分离株 (6 0 7% )。耐 3种以上抗生素的肠出血性大肠埃希菌 18株 (美国 3,中国 15 )。 4 8株分离株中有 11株 (2 2 9% )鉴定出 1类整合子 ,PCR产物测序分析可见 ,9株携带aadA 1基因盒 ,2株携带aadA 2基因盒 ,传递对氨基糖苷类抗生素的耐药性。结论 1类整合子及其相关的基因盒广泛存在于肠出血性大肠埃希菌中 ,而且决定着对氨基糖苷类抗生素的耐药性。
- 李咏梅李凡赵春燕
- 关键词：肠出血性大肠埃希菌耐药性整合子
- 柯萨奇病毒B4双siRNA表达载体的构建及表达被引量：1
- 2006年
- 目的:构建以柯萨奇病毒B4的1A和2A基因为靶基因并带有绿色荧光蛋白标志的可表达发夹结构的双链siRNA的表达载体pU6/double-siRNA/Neo/GFP/1A/2A。方法:选择柯萨奇病毒B4的1A和2A区基因21 bp为靶序列分别合成65 bp的互补片段并克隆到pSilencer2.1U6 Neo和pGCsi-U6/Neo/GFP质粒中,经限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳分离、回收DNA片段,及连接酶连接构建双siRNA表达质粒pU6/double-siRNA/Neo/GFP/1A/2A;将构建的载体转染Hela细胞后,荧光显微镜观察荧光的表达。结果:限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳检测重组质粒pU6/double-siRNA/Neo/GFP/1A/2A,有正确的特异性片段,DNA测序也证明其具有正确序列;将该重组质粒转染入Hela细胞后,重组质粒构建成功并在真核细胞内表达GFP,表达时间可达15 d以上。结论:针对柯萨奇病毒B4的1A和2A基因的双siRNA表达载体pU6/double-siRNA/Neo/GFP/1A/2A构建成功,并可在真核细胞内持续表达15 d以上。
- 史红艳徐德启李凡
- 关键词：SIRNA
- 污水中大肠埃希菌携带第1类整合子的鉴定和特征分析被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨污水中大肠埃希菌携带第1类耐药整合子的分布、特征及所含基因盒的种类。方法:常规方法分离大肠埃希菌;纸片扩散法对9种抗生素进行耐药性监测和分析;PCR鉴定1类整合子阳性株;PCR产物测序并对结果进行分析。结果:42份标本中分离出24株大肠埃希菌,为多重耐药菌株,耐药谱为氨苄西林-复方磺胺-红霉素-四环素-链霉素-庆大霉素。有3株(12.5%)鉴定出1.6 kb 1类整合子,PCR产物测序得知携带pse-1-aadA1、pse-1-aadA2、pse-1-aacA1基因盒,传递对β-内酰胺类-氨基糖苷类抗生素的耐药性。结论:1类整合子存在于污水来源的大肠埃希菌中,并携带相应的耐药基因盒,决定着对β-内酰胺类-氨基糖苷类抗生素的耐药性。
- 李明成李凡
- 关键词：大肠埃希菌整合子耐药性
