转基因生物新品种培育专项(2009zx08009-157B)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：史新娥刘月光杨秋梅杨公社沈清武更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学四川农业大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- LiCl激活经典Wnt信号通路诱导猪骨骼肌卫星细胞向慢肌分化被引量：4
- 2012年
- Wnt/β-catenin信号通路参与调控细胞的增殖及分化,决定细胞的命运。LiCl通过抑制GSK-3β(glycogen synthetase kinase-3β)稳定细胞内β-catenin的表达。为研究Wnt/β-catenin信号通路在哺乳动物骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的作用。以原代培养猪骨骼肌卫星细胞为实验材料,将其培养在含有1%CEE和20%胎牛血清的GMEM培养液中,再用15 mmol/L LiCl诱导分化,并采用免疫荧光染色和Western blotting等方法检测经典Wnt信号通路中相关因子及成肌分化过程中细胞的蛋白表达。结果表明:LiCl处理猪骨骼肌卫星细胞后促进分化,p-GSK-3β、β-catenin、myosin及慢肌蛋白增加,p-β-catenin、GSK-3β及快肌蛋白减少,并且核内源性β-catenin增多。结果提示,激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨骼肌卫星细胞成肌分化,并且诱导其向慢肌分化。
- 杨秋梅刘月光沈清武史新娥杨公社
- 关键词：卫星细胞WNT/Β-CATENIN分化LICL
- Wnt/β-catenin信号通路相关基因及MyHCs在猪骨骼肌发育中的表达规律被引量：4
- 2011年
- 为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪骨骼肌纤维类型发育的影响,并探讨其潜在的作用机制。本研究以1日龄、1周龄、2周龄、1月龄、2月龄和6月龄大白猪背最长肌组织为研究材料,利用Real-time PCR、Westernblot、冰冻切片免疫组化等方法,研究Wnt/β-catenin信号通路相关基因及MyHCs在猪骨骼肌发育过程中的表达规律。Real-time PCR结果显示:MyHC-Ⅰ、GSK-3β、β-catenin和Fz3mRNA随着个体日龄增加表达量下降,My-HC-Ⅱb mRNA表达逐渐升高,MyHC-Ⅱa mRNA表达量在1日龄～2周龄阶段升高后又降低,MyHC-Ⅱx mRNA表达量变化不显著;免疫组化结果显示:快肌蛋白呈棕色,慢肌蛋白呈灰白色,在出生1日龄～1周龄时,快、慢肌呈弥散交叉分布,到2周龄时慢肌簇被快肌包被在肌束中间,随着年龄增加,慢肌簇逐渐减少。Western blot检测结果显示:慢肌蛋白从出生到2周龄显著下降,在2周龄～2月龄阶段下降不明显,生长到6月龄时又显著降低;快肌蛋白随日龄增加而增加,在2周龄～6月龄期间增加极显著;β-catenin、GSK-3β蛋白表达量与其mRNA表达一致,而p-β-catenin在2周龄时显著高于1日龄,且随后持续上调;Tyr216 p-GSK-3β蛋白表达量早期生长下调极显著;Ser9p-GSK-3β蛋白表达量则是在后期生长显著降低。上述基因表达变化规律揭示,Wnt/β-catenin信号通路相关基因β-catenin、Fz3、GSK-3β与MyHC-Ⅰ表达呈正相关,与MyHC-Ⅱ表达呈负相关,其在骨骼肌生长过程中对肌纤维类型组成具有重要影响。
- 杨秋梅史新娥沈清武刘月光高晓娟陈宗正杨公社
- 关键词：WNT/Β-CATENIN信号通路肌纤维类型背最长肌发育
