国家自然科学基金(31071443)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 相关作者：唐桂香章洁琼卢涛李红艳胡小南更多>>
- 相关机构：浙江大学中国农业科学院油料作物研究所东北师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项浙江省重大科技专项基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- α-硫辛酸对大豆农杆菌介导GUS瞬时表达和芽诱导的影响被引量：8
- 2011年
- 以适宜转化大豆受体YC-2为材料,研究了抗氧化剂α-硫辛酸对农杆菌介导GUS瞬时表达和芽诱导率的影响。结果表明:在共培养基中添加不同浓度的抗氧化剂可显著降低外植体的褐化率,随α-硫辛酸浓度的增加外植体褐化率明显减少,但白化率增加,且这些白化的外植体在后期不易产生诱导芽;共培养中添加不同浓度的α-硫辛酸可增强GUS瞬时表达率和芽诱导的再生率,且以25 mg·L-1效果最佳。
- 杨晓凤卢涛周正剑寿惠霞唐桂香
- 关键词：大豆Α-硫辛酸
- 以bar基因为筛选标记转基因大豆的获得及鉴定被引量：8
- 2011年
- 在已优化的大豆农杆菌介导转化体系基础上,以发芽1～2 d的成熟大豆子叶节为外植体,以bar基因作为筛选标记基因,采用农杆菌介导法将胰蛋白酶抑制剂基因(Sporamin)和几丁质酶基因(Chitinase KDEL)转入大豆品种YC-2中。T0代得到生根苗115株,其中采用除草剂叶片涂抹法和目的基因PCR检测法鉴定出阳性植株45株,其中选取的6个T0代植株中有4个独立株系外源基因在T1代遗传,其中2个T1代株系呈3∶1的遗传分离比例,2个T1代株系分离比例大于3∶1。T0和T1代经草丁膦叶片涂抹法鉴定为阳性的植株,通过bar试纸条法和目的基因PCR检测法鉴定也均表现为阳性,因此,135 mg.L-1草丁膦叶片涂抹法可用于草丁膦筛选标记转基因大豆植株的大规模筛选。
- 卢涛李红艳章洁琼胡小南寿惠霞唐桂香
- 关键词：BAR基因转基因大豆
- 农杆菌介导的RNAiCP基因在大豆中的转化被引量：8
- 2013年
- 花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)病是大豆主要病害之一,生产上常采用种植抗性品种方法来防治。本研究以RNA干扰花叶病毒衣壳蛋白(coat protein,CP)基因为表达载体,Bar基因作为筛选标记基因,成熟子叶节为外植体,采用农杆菌介导法获得了22株T_0代转基因大豆生根苗,经草丁膦涂抹、Bar试纸条和PCR法鉴定,获得RNAi CP转基因植株18株;对转基因植株T_1代的遗传分析表明,外源基因能够稳定遗传到下一代且符合孟德尔遗传规律;T_1代Southern杂交表明,导入的干扰片段为单拷贝;花叶病毒摩擦接种表明,RNAi CP转基因大豆植株具有抗花叶病毒特性;摩擦接种后3周,DAS-ELISA检测进一步表明,RNAi CP转基因植株花叶病毒检出率仅为7.69%,而非转基因植株为100%。这表明RNAi花叶病毒CP基因可用于抗大豆花叶病毒的研究。
- 章洁琼李红艳胡小南单志慧唐桂香
- 关键词：大豆RNAI大豆花叶病毒病毒鉴定
- 甜菜胞囊线虫抗性基因及遗传工程改良策略
- 2012年
- 甜菜胞囊线虫(Heterodera schachtii)是甜菜的重要病害之一,给甜菜生产造成了极大的损失。随着分子生物学和遗传工程技术的发展,采用遗传工程改良策略进行甜菜抗性品种选育是甜菜胞囊线虫防治中最经济、有效的方法。介绍了甜菜胞囊线虫的生育史及抗性机制,综述了甜菜胞囊线虫抗性基因的克隆和鉴定研究进展及甜菜胞囊线虫抗性育种的遗传工程改良策略,并提出今后甜菜胞囊线虫抗性育种的展望。
- 章洁琼蔡大广唐桂香
- 关键词：抗性抗性基因
- 抗病基因KR3在大豆中的转化研究
- 2014年
- 采用农杆菌介导子叶节转化法将抗性基因KR3导入大豆中,共转化386个外植体,获得转基因生根苗15株,经草丁膦涂抹、Bar试纸条和PCR鉴定,最终获得12株KR3转基因阳性苗,农杆菌介导转化效率3.11%。RT-PCR结果显示转基因植株KR3基因表达量显著高于对照(非转基因植株);花叶病毒摩擦接种表明,转基因植株对花叶病毒能产生一定抗性,而非转基因植株则明显感病;摩擦接种三周后ELISA检测进一步表明在所检测的12株T1KR3转基因植株中未检测出SMV,而非转基因大豆植株SMV检出率为75%。研究结果表明,提高KR3基因的表达可以提高大豆的病毒抗性。
- 王浩铭贺红利汪自强刘宝唐桂香
- 关键词：大豆农杆菌介导转化花叶病毒病
