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野生二粒小麦粒重QTLs位点分析被引量：3: 2014年; 为了挖掘野生二粒小麦的优异基因资源,对从以色列魏茨曼科学院引进的一套以普通小麦品种中国春为遗传背景的野生二粒小麦染色体臂渐渗系(Introgression lines,渐渗系)进行了一年两点的田间试验,考查了构成粒重的三个重要因子即粒长、粒宽和千粒重。结果表明,8个渐渗系(3AS、7AL、5AS、1BS、7AS、3BL、2AL、1BL)的籽粒显著宽于亲本,推断在这些染色体臂上至少有一个正效QTL控制野生二粒小麦的粒宽;同样可以推断,12个控制野生二粒小麦粒长的正效QTLs分别定位在2AS、7AL、1BL、4BS、3AS、7BS、4BL、7AS、5BS、2BS、3AL、6AS上;5个控制野生二粒小麦千粒重的正效QTLs分别定位在7AS、4BS、7AL、1BS、6AS上。各粒重构成因子关联性分析表明,粒长、粒宽和千粒重主要受遗传因素调控,粒长和粒宽都与千粒重显示出较高的遗传相关性。; 程啸天萧峰丰宇凯吴莎莎丁明全周伟戎均康孙丽英; 关键词：野生二粒小麦粒重

小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及饲养层制备被引量：10: 2014年; 背景:建立一种既可以大量制备,又易于保存并保持较高活性的饲养层细胞是人胚胎干细胞培养研究的重要环节。目的:建立昆明小鼠胚胎成纤维细胞的最佳分离培养方法,评价其用于人胚胎干细胞饲养层研究的可行性。方法:用不同浓度胰蛋白酶分步消化法体外分离和培养昆明小鼠胚胎成纤维细胞,观察其生物学特性,制备胚胎成纤维细胞饲养层,检测人胚胎干细胞在饲养层上培养的生长状态。结果与结论:制备昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的最佳胎龄为13.5 d。不同浓度胰蛋白酶分步消化法制备的胚胎成纤维细胞生长状态好,获得的成纤维细胞纯度高,增殖活跃。冻存2周,1,3,6个月内复苏的细胞存活率差异无显著性意义。小鼠胚胎成纤维细胞在第2-4代增殖旺盛,第5代以后细胞增殖活力明显下降。人胚胎干细胞在小鼠胚胎成纤维细胞长期传代后呈典型的未分化形态,碱性磷酸酶和过碘酸-雪夫染色均为阳性。结果表明建立的昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层分离培养法可为人胚胎干细胞扩增提供稳定、优质的饲养层细胞。; 胡三强王妍妍马永宾胡嘉波; 关键词：干细胞人胚胎干细胞小鼠胚胎成纤维细胞饲养层国家自然科学基金

生长抑制因子4基因在胃癌中的表达及临床意义: 2010年; 目的检测生长抑制因子4(ING4)在胃癌患者组织及外周血中的表达,探讨其与胃癌发生、发展的相关性及在胃癌诊疗中的应用。方法收集30例胃癌患者手术切除的癌组织、对应的癌旁组织和外周血,用RT-PCR、实时定量RT-PCR、巢式RT-PCR检测ING4 mRNA表达;用western blot和免疫组织化学法在蛋白质水平上进行验证,分析ING4在胃癌中的表达水平与临床病理因素的相关性。结果 RT-PCR和定量结果显示76.7%(23/30)的胃癌组织ING4表达低于对应的癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);western blot和免疫组织化学法在蛋白质水平上证实了胃癌组织较癌旁组织中ING4的表达水平下降。胃癌组织ING4的表达与肿瘤分化状态和复发相关,但与临床分期无关。分化水平越低,ING4 mRNA表达越低(P<0.05);复发的患者癌组织ING4 mRNA表达显著低于未复发患者(P<0.05)。胃癌患者外周血ING4 mRNA的表达也显著低于健康人。结论胃癌组织ING4的表达下调,且与胃癌的分化与复发相关,ING4的基因和蛋白质水平检测可能作为胃癌病程进展或复发监测的新指标。; 钱晖李继刚王胜王梅彭秀娟顾红兵陶洋许文荣; 关键词：生长抑制因子4 胃癌 RT-PCR 免疫组化免疫印迹

人胚胎干细胞饲养层的制备及生物学活性被引量：7: 2011年; 背景:建立一种既可以大量制备,又能保存并保持较高活性的饲养层是胚胎干细胞培养研究不可缺少的环节。目的:体外分离培养、冻存复苏ICR小鼠胚胎成纤维细胞,观察其生物学特性。方法:取ICR小鼠13.5d胚胎,用胰蛋白酶分步消化法分离培养小鼠成纤维细胞,对冻存复苏后的小鼠胚胎成纤维细胞形态、生长曲线、贴壁率、细胞化学染色及支持人胚胎干细胞生长特性等进行观察。结果与结论:复苏后的小鼠胚胎成纤维细胞在体外传代30min时80%以上细胞贴壁,生长曲线显示细胞增殖活跃,细胞化学染色AKP、PAS、POX阴性,能长期支持人胚胎干细胞传代生长。提示此方法所获得的小鼠胚胎成纤维细胞复苏后有较高的生物学活性,可为人胚胎干细胞扩增提供稳定、优质的饲养层细胞。; 胡嘉波麻全慧胡三强周中卫王晓慧钱晖许文荣; 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞 ICR小鼠人胚胎干细胞冻存

人胚胎干细胞向间充质干细胞分化的初步研究: 2013年; 目的建立人胚胎干细胞(hESCs)向间充质干细胞(MSCs)分化方法,并初步鉴定hESCs来源的MSCs(hESC-MSCs)。方法用拟胚体法将hESCs分化为MSCs,对其形态进行观察;用流式细胞术检测细胞表面标志;测定细胞化学染色特性。结果 hESC-MSCs形态与人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)相似;流式细胞分析显示hESC-MSCs表达CD29、CD44、CD13,但不表达CD14、CD133、CD34、CD45、HLA-DR;细胞化学染色显示,hESC-MSCs碱性磷酸酶阴性,过碘酸-雪夫反应弱阳性。结论hESCs在体外可分化为hESC-MSCs,hESC-MSCs符合MSCs特性。; 胡嘉波王晓慧麻全慧张微王妍妍闻向梅; 关键词：胚胎干细胞间充质干细胞流式细胞术细胞化学染色

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国家自然科学基金(31071421)