公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

DNA疫苗佐剂的研究进展被引量：1: 2009年; 近年来佐剂的发展迅猛,多种新型佐剂层出不穷。DNA疫苗作为第3代新型疫苗越来越受到人们的关注,DNA疫苗的佐剂也随之引起研究者们的广泛兴趣。本文就几种有效的增强DNA疫苗效力的策略和机制作了简要综述,并对DNA疫苗针对性佐剂的研究前景进行了展望。; 陈建国许化溪

人HMGB1 B box蛋白的表达、鉴定及其单克隆抗体的制备被引量：1: 2011年; 目的:表达人HMGB1 B box蛋白,制备其单克隆抗体(mAb),为进一步研究HMGB1 B box在免疫调节和抗感染免疫中的作用奠定基础。方法:将pET28-HMGB1 B box转化DH5α摇菌表达,使用His标记的蛋白纯化柱纯化、鉴定后免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0细胞进行常规融合,经间接ELISA筛选阳性克隆,获得分泌人HMGB1 B box蛋白mAb的杂交瘤细胞株,通过ELISA、Western blot等方法鉴定其特性(mAb的效价、Ig类别及特异性)。结果:成功地建立了2株稳定分泌抗人HMGB1 B box的mAb细胞株,分别命名为1D2F4E3和2D4E3A2。2株mAb的免疫球蛋白类型均为IgG,Western blot显示,2株mAb均能与HMGB1 B box发生特异性反应,其滴度为1×106,mAb1 D2F4E3和2D4E3A2的A450值分别为0.324±0.093和0.296±0.085。结论:获得了2株分泌HMGB1 B box mAb的细胞株,为HMGB1 B box蛋白的生物学功能研究奠定了基础。; 苏兆亮王胜军周成林陈建国汪汀陶才华邵启祥许化溪; 关键词：HMGB1 蛋白表达单克隆抗体

类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1RORγ／t和白细胞介素-17表达水平的检测及临床意义被引量：3: 2010年; 目的检测类风湿关节炎（RA）患者外周血高迁移率族蛋白1（HMGB1）及Th17细胞特异性转录因子、相关细胞因子的表达水平，同时分析其与C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）和类风湿因子（RF）的关系，初步探讨RA患者HMGB1的表达水平及其与Th17的关系。方法收集80例RA患者外周血标本，其中静止期32例、活动期48例，健康志愿者50名。采用实时荧光定量聚合酶链反应（QRT—PCR）检测外周血单个核细胞（PBMC）中HMGB1、RORγt和白细胞介素（IL）-17的mRNA水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆HMGB1、IL-17、IL-23的蛋白浓度，采用单因素方差分析和Spearillan相关分析进行统计学处理。结果RA患者PBMC中HMGB1、RORγt和IL一17mRNA的表达水平均高于健康对照组（P〈0．05），且活动期[HMGB1（0．424±0．262）pg／ml，RORγt（0．34±0．25）pg／ml，IL-17（1．42±0．38）pg／ml]明显高于静止期（R0．01）。血浆HMGB1、IL-23和IL-17蛋白水平也显示类似的结果，RA组明显高于健康对照组（P〈0．05），且与CRP、ESR、RF呈正相关（P〈0．05）。结论检测RA患者外周血HMGB1和Th17细胞特异性转录因子及相关细胞因子水平，有助于探讨HMGB1和IL-17在RA发病过程中的病理生理作用，也为寻找RA的治疗靶点提供了新的思路。; 石燕王胜军陈建国薛渊何志强周成林郑东杨恒李雅贞仝佳苏兆亮邵启祥许化溪; 关键词：白细胞介素17

MyD88-铜绿假单胞菌表位核酸疫苗的构建及其真核表达被引量：6: 2009年; 目的:构建重组MyD88基因的铜绿假单胞菌(PA)表位核酸疫苗,并研究其在真核细胞中的表达。方法:将PA的OprF的三个中和性B细胞表位及一个外源通用T细胞表位串联,表位之间用赖氨酸间隔,采用重叠PCR方法合成全基因,并在此序列前插入组织纤溶酶原激活物(tPA)的信号肽基因,将获得的片段与MyD88基因分别克隆到pIRES载体的两个多克隆位点,构建真核双表达重组质粒pIRES-tPA-OprF-MyD88。电穿孔法将pIRES-tPA-OprF-MyD88转入COS-7细胞,通过Westernblot检测其细胞上清tPA-OprF蛋白及细胞内MyD88蛋白的表达。结果:构建的真核表达质粒pIRES-tPA-OprF-MyD88,经电转COS-7细胞后,在其培养的上清液及细胞内检测到目的蛋白。结论:成功构建pIRES-tPA-OprF-MyD88表达载体,并在转染的真核细胞中得以有效地表达,为研究PA预防性疫苗奠定了实验基础。; 陈建国苏兆亮柳迎昭王胜军黄新祥邵启祥许化溪; 关键词：铜绿假单胞菌 MYD88 表位疫苗真核表达

hGITR_(aa1-165)-IgG1Fc真核表达质粒的构建及其表达: 2009年; 目的:构建含有人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)胞外段基因的真核表达质粒hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达。方法:以pGEMT-GITR质粒为模板,通过PCR扩增获得人GITR胞外段的基因hGITRaa1-165,将该目的基因连接至IgG1Fc-pcDNA3.1(+)质粒,构建hGITRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+)真核表达质粒。将该重组质粒采用脂质体法转染COS-7细胞,通过SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达。结果:成功构建真核表达质粒hGI-TRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),并在其转染的COS-7细胞培养上清中检测到hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白的表达。结论:成功表达hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白,为进一步研究GITR的生物学功能奠定了基础。; 崔大伟王胜军陈君仝佳陈建国王海生杨先知史烨许化溪邵启祥; 关键词：COS-7细胞真核表达

铜绿假单胞菌B细胞表位-MyD88表达质粒的构建及其相关研究: 2009年; 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，Pa）外膜蛋白F（OprF）的主动免疫能诱发机体产生特异性体液免疫应答，发挥局部保护作用。然而OprF的完整蛋白对机体具有潜在的危害性。现有研究表明OprF蛋白含有大量的B细胞表位，因此，应用OprF优势抗原表位设计的疫苗，既能诱导机体产生抗Pa的中和抗体，又能克服非抗原决定簇成分潜在的毒副作用。考虑到表位蛋白的免疫原性较弱，不足以引发良好的免疫应答，; 陈建国王胜军柳迎昭苏兆亮李雅贞戴晓莉彭素芳邵启祥许化溪; 关键词：铜绿假单胞菌 B细胞表位表达质粒体液免疫应答抗原决定簇主动免疫

抗hGITR_(aa27-165)多克隆抗体生物学活性的初步鉴定: 2011年; 目的:明确兔源性抗人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体胞外段的多克隆抗体(anti-hGITRaa27-165 PcAb)与人类天然GITR分子的结合能力及其对CD4+T细胞的生物学作用。方法:分离、刺激培养人外周血单个核细胞后,利用流式细胞术(FCM)检测anti-hGITRaa27-165 PcAb与细胞膜表面GITR分子的结合能力;免疫磁珠分离人外周血收集CD4+T细胞,以3H-TdR掺入试验分别检测在细胞刺激生长剂存在或不存在的情况下,anti-hGITRaa27-165PcAb对CD4+T细胞增殖的影响。结果:兔源性anti-hGITRaa27-165 PcAb可以与天然构象的GITR分子结合,且此种结合具有浓度依赖性;在细胞生长刺激因子存在或不存在情况下,该多抗均能促进CD4+T细胞增殖。结论:本室制备的兔源性anti-hGITRaa27-165 PcAb具有与天然分子结合的能力以及一定的生物学活性,进一步的研究可考虑将其应用于临床相关疾病的检测和治疗。; 蔡玲刘艳张慧韩清珍郑东陈建国; 关键词：多克隆抗体流式细胞术 CD4+T细胞

全选清除导出

共1页<1>

江苏省卫生厅面上基金(H200859)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

江苏省卫生厅面上基金(H200859)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈