江苏省自然科学基金(BK2001132)
- 作品数：9 被引量：41H指数：5
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- 相关机构：南通医学院中山大学南通大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省高校高新技术产业发展项目更多>>
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- 中药神经再生素作用于背根神经节细胞过程中基因的表达变化被引量：7
- 2003年
- 目的 探讨中药神经再生素 (NRF)作用的分子生物学机制。 方法 采用半定量PCR方法 ,观察和比较NRF组、NGF组和空白对照组中生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、低分子量神经丝蛋白 (NF L)、翻译延伸因子 2A3 2(EF Ts ,RRAJ5 16 1)和锌指样蛋白DDP2 (F196 315 )基因水平的表达变化。 结果 在NRF作用于离体培养的DRG细胞过程中 ,GAP 4 3、NF L、2A3 2和DDP2基因表达在不同时间呈不同程度的上调。 结论 NRF促神经生长的作用与NGF相似 ,可作用于蛋白翻译水平 ,促进神经细胞的生长 ;作用于细胞骨架蛋白水平 ,维持神经细胞的形态和神经细胞正常生理活动 ;作用于神经细胞特异的蛋白水平 ,具有维持细胞生存及促进神经细胞突起生长的作用 ;还可以作用于反式因子调控水平 ,影响相关基因的表达 。
- 刘梅王林芳丁斐王东顾晓松
- 关键词：神经再生素背根神经节细胞分子生物学生长相关蛋白43
- 神经再生素激活PC12细胞ERK1/2的实验研究被引量：10
- 2003年
- 本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同作用时间 ( 0 min、15 min、3 0 min、1h、2 h)对无血清培养的 PC12细胞 ERK1/ 2活性的影响 ;还运用 MEK1/ 2阻断剂 U0 12 6,观察NRF激活 ERK1/ 2是否需要其上游信号蛋白 MEK1/ 2的激活。结果表明 ,NRF作用于无血清培养的 PC12细胞 ,可以激活ERK1/ 2 ,存在明显的剂量效应关系和时间依赖作用 ,在 10 0 0 ng/ ml浓度下最大 ,作用 2 h时达峰值 ;U0 12 6作用后 ,可抑制 NRF作用于 PC12细胞引起的 ERK1/ 2的激活。由此可见 ,NRF对无血清培养的 PC12细胞具有保护作用 ,可能通过激活 ERK1/ 2磷酸化级联途径来介导这些作用。
- 强亮顾星星丁斐
- 关键词：神经再生素U0126PCI2细胞信号传导途径
- 神经再生素对新生大鼠脊髓细胞凋亡的影响被引量：28
- 2002年
- 目的 :观察神经再生素对新生大鼠脊髓细胞凋亡的影响。方法 :将新生 SD大鼠一侧坐骨神经切断后 ,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧端 ,海绵内加入神经再生素 ,术后 3、6、1 2 h用 TUNEL法在光镜下检测 L4 -L5脊髓细胞凋亡情况 ,分别以神经生长因子和生理盐水作为阳性和阴性对照。结果 :新生大鼠在坐骨神经切断后脊髓细胞出现大量凋亡 ,神经再生素组凋亡细胞数量较生理盐水组显著减少 ( P<0 .0 1 ) ;神经再生素组与神经生长因子组之间凋亡细胞数量的差别无显著性意义 ( P>0 .0 5 )。结论
- 陈罡王晓冬张沛云丁斐
- 关键词：神经再生素新生大鼠坐骨神经脊髓细胞凋亡
- 神经再生素对皮层细胞基因表达影响的基因芯片研究被引量：10
- 2003年
- 目的 :采用基因芯片技术 ,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮层细胞基因表达的影响。方法 :取ICR胚鼠 (15d)大脑皮层细胞 ,无血清培养。实验组加入神经再生素 (2 μg/ml) ,对照组加入等量基础培养液。培养 6h后 ,抽提实验组和对照组皮层细胞总RNA ,经反转录分别用Cy5、Cy3荧光标记成cDNA探针。将荧光标记的cDNA与MGEC 40s基因表达谱芯片杂交 ,芯片扫描、数据处理。结果 :实验组和对照组大脑皮层细胞出现 64条差异性表达的基因。呈现上调的基因有 :钙调素结合蛋白、锌指蛋白激酶、核糖体蛋白等基因 ;下调基因有 :抑制细胞分裂因子等基因。结论 :神经再生素可作用于体外培养的胚鼠大脑皮层细胞 。
- 丁斐顾星星王东顾晓松
- 关键词：神经再生素皮层细胞基因表达基因芯片
- 人工组织神经移植物桥接狗缺损坐骨神经后腓肠肌内琥珀酸脱氢酶表达含量的变化被引量：2
- 2002年
- 目的 :了解人工组织神经移植物辅加神经再生素桥接狗坐骨神经缺损后相应腓肠肌形态与酶的变化。方法 :人工组织神经桥接修复狗的坐骨神经 30 mm缺损为实验组 ,自体神经桥接或神经缺损的为对照组 I或 II。术后 6个月时取腓肠肌 ,按 Nitro- BT法显示琥珀酸脱氢酶光镜标本。图像分析仪分析琥珀酸脱氢酶 (SDH)染色后灰度值及腓肠肌截面积。结果 :实验组腓肠肌 SDH的灰度值及截面积均与对照组 II有明显差别 ,而与对照组 I无明显差别。结论 :人工组织神经修复缺损神经后 ,重新支配靶器官 ,使腓肠肌萎缩明显减弱 ,琥珀酸脱氢酶活性的下降也明显减轻。
- 林巍巍张沛云王晓冬吴坚
- 关键词：神经缺损腓肠肌琥珀酸脱氢酶
- 神经再生素对大鼠大脑皮层细胞的作用被引量：1
- 2003年
- 目的 :观察神经再生素 (NRF)作用于离体培养的SD大鼠大脑皮层细胞过程中细胞活性、基因的表达变化 ,探讨NRF促神经生长机制。方法 :SD大鼠大脑皮层细胞分离、培养于含NRFL15培养基 ,采用RT PCR方法检测培养细胞生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、神经丝蛋白 (NF L)和锌指样蛋白 (DDP2 )基因经NRF作用后基因表达变化 ,MTT法检测细胞活力。结果 :2 μg/mlNRF作用于培养大脑皮层细胞为较佳使用浓度 ;NRF作用 6～ 12h ,GAP 4 3、NF L和DDP2基因表达分别上调至峰值 2 0 0 % ,15 0 % ,135 % ;NRF作用 2 4h后 ,基因表达回复至正常值 ,而细胞活力仍上调 2 3 2 %。结论 :NRF可通过上调神经生长相关基因表达 ,提高细胞活力达到促神经生长。
- 顾星星丁斐王林芳王东顾晓松
- 关键词：神经再生素基因表达细胞活性大脑皮层细胞
- 神经再生素对PC12细胞凋亡的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 研究神经再生素 (NRF)对PC12细胞凋亡的影响并初步探讨其机制。 方法 通过观察细胞形态的变化、MTT微量比色法、流式细胞仪AnnexinV和caspase 3活力检测等方法 ,了解NRF对低浓度血清培养下PC12细胞凋亡的影响。NGF和RPMI16 40作对照。 结果 培养细胞的突起生长数量和长度、MTT微量比色的A值、AnnexinV PE 7AAD显示的凋亡细胞比例、caspase 3活力的检测等指标 ,在NRF组和NGF组间无明显差异 ;而与空白对照组间差异有显著性意义。 结论 神经再生素对低血清培养下PC12细胞的凋亡有抑制作用。
- 陈罡王晓冬张沛云丁斐
- 关键词：神经再生素PC12细胞细胞凋亡磷脂结合蛋白
- 神经再生素促PC12细胞分化作用及其信号途径的初步研究
- 神经再生素是中药提取的有效组分(NerveRegeneration Factor,NRF,中国专利申请号01108209.7),以往的研究表明,NRF具有明显的促神经生长作用。本研究以神经生长因子(NGF)为阳性对照,采...
- 丁斐强亮
- 关键词：神经科学神经再生素PC12细胞
- 文献传递
- 神经再生素对实验性高眼压兔视网膜i-NOSmRNA表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的探讨中药有效成分神经再生素(NRF)对实验性高眼压视网膜可诱导型一氧化氮合成酶(i-NOS)表达的影响。方法前房灌注法建立兔右眼实验性高眼压模型,分别给予NRF和磷酸盐缓冲液(PBS)。NRF组(n=6)在灌注前、灌注后4d、7d玻璃体腔内多点注射NRF4.5μg;PBS组(n=6)在灌注前、灌注后4d、7d玻璃体腔内注射等量0.1mol/LPBS;两组兔的左眼为正常对照组(n=12)。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组兔眼视网膜i-NOS基因表达量。结果NRF组兔视网膜i-NOSmRNA的表达量低于PBS组(P=0.000),但高于左眼正常对照组(P=0.000)。结论神经再生素能抑制青光眼视网膜i-NOSmRNA的表达,对青光眼视网膜神经节细胞可能具有保护作用。
- 管怀进黄正如丁斐顾晓松
- 关键词：神经再生素实验性高眼压
- 神经再生素对PC12细胞分化的影响被引量：9
- 2003年
- 目的 探索神经再生素 (nerveregenerationfactor,NRF)诱导PC12细胞神经元性分化的潜在能力。方法 以NGF为阳性对照 ,采用细胞培养方法 ,观察NRF在低血清的情况下 ,诱导PC12细胞发生的形态学改变 ;同时 ,使用荧光免疫细胞化学方法 ,观察神经元标志性物质—低分子量神经丝蛋白 (NF L)在NRF诱导分化的PC12细胞中的表达。采用RT PCR方法观察NRF对无血清培养的PC12细胞即早基因c-fos的表达变化。结果 加药后第 14天 ,NRF组以及NGF组的PC12细胞呈现明显的形态学改变 :细胞胞体皱缩 ,且有明显的突起生长。空白对照组、NRF组 (0 0 1μg/ml、0 1μg/ml、 1μg /ml)、NGF组 (0 0 5 μg/ml)具有明显突起的分化细胞占总细胞的比例分别为 5 16 9%、 2 5 718%、4 3 32 5 %、 73 0 38%、 85 2 86 %。免疫荧光细胞化学结果显示NRF、NGF组的分化细胞基本都为NF L标记阳性的细胞 ;NRF能使c fos的表达上调 ,作用 2h后达峰值。结论 神经再生素具有诱导PC12细胞的神经元性分化作用 ,且能使c-fos表达上调。
- 强亮丁斐
- 关键词：神经再生素PCI2细胞细胞分化中药
